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UV-Vis 분광광도계 자료 모음
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UV-Vis 분광광도계 제품 관련 자료
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UV-Vis 분광광도계 웨비나
UV-Vis 분광광도계 원리
가장 기본적인 조건으로, 분광광도계는 자외선과 가시광선 스펙트럼에 걸쳐 상대적 빛 강도의 광도 비교를 가능하게 합니다. 제어된 일정한 강도의 광원(할로겐, 듀테륨, 크세논)을 스펙트럼 전체 또는 특정 파장에 샘플을 통과하게 하면 샘플 특성을 쉽게 확인하거나 계산할 수 있습니다. 입사광(I0)은 반사하여 뒤로 방향을 바꿀 수 있으며 흡수로 인한 에너지 손실이 있고 투과하여 투명 또는 반투명 샘플을 통과할 수 있습니다. 액체에 있는 샘플은 샘플 및 측정 파장과 호환되는 플라스틱, 유리, 석영으로 구성된 테스트 튜브나 큐벳에 넣고 측정하기 전에 샘플 구획의 홀더에 넣어야 합니다.
분광계는 단일, 더블(또는 분할) 또는 듀얼 빔 설정으로 다양한 광학 설정을 가질 수 있습니다. 가장 단순하고 가장 경제적인 장비는 파장 선택기(모노크로메이터 또는 필터 시스템)에서 검출기로 이동하는 단일 광선에 의존하지만 샘플 측정과 비교하기 위해 기준 용매 블랭크를 별도로 측정해야 합니다. 더블 빔 장치는 광선을 표준 빔과 샘플 빔으로 분할하여, 표준 빔과 샘플 간에 데이터 수집을 교대로 하는 단일 검출기를 사용하여 동일한 장비 조건에서 샘플 구획의 블랭크와 샘플을 측정할 수 있도록 합니다. 듀얼 빔 설정은 2개의 빔과 2개의 검출기를 병렬로 사용하여 샘플과 표준물질을 동시에 측정합니다.
UV-Vis 분광광도계 흡수
시료에 빛을 조사하면 특정 파장의 입사광을 선택적으로 흡수합니다. 흡광도가 가장 높은 파장(λmax)은 일반적으로 분석 파장으로 사용되며 나노미터(nm) 단위로 표시됩니다. 흡광도 측정은 간단하며 스펙트럼 그래프를 생성하는 데 사용됩니다.
흡수는 농도 계산을 위한 직간접 옵션을 제공할 수 있습니다. 단백질을 직접 측정하는 예는 A280이며, 이를 통해 280nm에서의 샘플 흡광도(A)와 Beer-Electronic을 사용한 단백질 특정 흡광 계수(ε)를 직접 기반으로 단백질 농도(c)를 계산할 수 있습니다. Lambert 방정식 c = A /(ε × L), 여기서 L은 경로 길이입니다. 비색 분석과 같은 간접 측정은 표준 곡선의 생성과 샘플의 단백질 양에 비례하는 색상 변화를 생성하는 반응에 의존합니다.
UV-Vis 분광광도계 스펙트럼 대역폭
모노크로메이터에서 나오는 슬릿 크기는 기기의 스펙트럼 대역폭(또는 대역 통과)을 제어하고 두 개의 인접한 피크(스펙트럼 분해능)를 구별하는 능력, 검출기에 도달하는 빛의 강도, 측정 시간과 신호 대비 잡음 비율에 영향을 미칩니다. 더 좁은 대역폭 분광광도계는 분해능과 신호 대 잡음비가 증가할 수 있으며, 대역폭이 넓으면 분해능 감소와 백그라운드 노이즈 증가를 희생하면서 결과 도출 시간을 줄일 수 있습니다. 미국 약전(USP), 유럽 약전(EP), 일본 약전(JP)을 포함한 모든 글로벌 약전에 대한 성능과 대역폭 요구 사항을 충족하려면, Thermo Scientific Evolution Pro 장비를 선택하고, USP나 EP에 대한 요구 사항을 충족하려면 Evolution One 시리즈 모델을 선택하십시오.
샘플 투과 비율
투과율은 샘플을 통과하는 빛의 양을 측정하고 재료의 알려진 반사 및 투과 특성을 기반으로 정량적 정보를 제공할 수 있습니다. 투과율 값은 일반적으로 샘플에 들어오는 입사광과 검출기에 도달하는 빛의 비율을 비교하여 백분율로 보고합니다. 완벽하게 투명한 샘플은 모든 빛을 투과시킵니다(100% T). 완전히 불투명한 샘플은 빛을 전혀 투과시키지 않습니다(0% T). 이 측정은 용액의 화학 물질 농도를 계산하고, 물과 박막의 투명도를 테스트하고, 메이플 시럽과 같은 제품의 등급을 평가하는 데 사용할 수 있습니다.
투과율(T)을 계산하려면 샘플에서 빠져나오는 빛의 양(I)을 샘플에 들어가는 입사광 양(I0)으로 나눕니다. T= I/I0. 일반적으로 이러한 측정값은 100을 곱한 백분율을 투과율로 보고합니다: %T= 100(I/I0). 흡광도와 투과율 사이에는 로그 관계가 있습니다. A=-log10T: 흡광도가 0이면 투과율은 100% T 이고 흡광도가 1 이면 투과율은 10%입니다.
반사율 측정
고체 또는 용액 형태의 샘플은 분광 분석에 사용되는 입사광을 반사할 수 있습니다. 표면이 매우 매끄러우면 입사광선이 입사각과 동일한 반사각에서 단일 광선으로 반사되는 거울과 같은 정반사를 생성할 수 있습니다. 거친 표면과 샘플 내부에서 빛을 산란시키는 표면은 단일 입사각에서도 넓은 각도 분포를 통해 분산되는 반사를 유발할 수 있는 난반사를 생성합니다. 기존 샘플 홀더를 사용하여 이러한 물질의 빛 투과율을 측정하면 검출기에 도달하는 빛 일부만 발생하여 스펙트럼 품질과 정보 손실이 줄어듭니다. 그러나 적분구 액세서리를 사용하면 샘플을 입구 지점에 배치하여 전체 투과 측정을 위해 샘플을 통과하는 모든 빛을 수집하거나 출구 포트에 샘플을 배치하여 전체 또는 확산 반사율 측정을 위해 수집할 수 있습니다.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.