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Invitrogen의 항체 라벨링 키트로 세포의 이야기를 전하세요.
- 반응성 염료—“do-it-yourself” 항체 컨주게이트를 위해 단백질 라벨링 시약 선택 가이드를 통해 다양한 색상 중에서 선택할 수 있습니다.
- 항체 라벨링 키트—성공적인 라벨링 실험을 위해 필요한 모든 것이 포함된 사전 최적화된 프로토콜과 키트를 활용하실 수 있습니다. 항체 라벨링 키트 선택 도구를 사용하여 실험에 적합한 키트를 선택할 수 있습니다.
- 맞춤형 형광 항체 라벨링—항체 컨주게이션 전문가가 우수한 컨주게이션 결과를 제공합니다.
고객은 탁월한 밝기와 광안정성 외에도 숙련되고 문제 해결을 위한 기술 지원팀, 응용 및 실험 팁, 실험 계획에 도움이 되는 프로토콜을 이용할 수 있습니다.
어떤 유형의 컨주게이션 키트를 사용해야 하는지 잘 모르시겠습니까? 아래 표와 섹션에서 해당 응용 분야에 가장 적합한 항체 컨주게이션 키트 유형을 찾아보십시오.
어떤 항체 라벨링 키트가 필요하십니까?
이 키트에는 15분 이내에 준비되는 빠른 프로토콜과 컨주게이트가 포함되어 있습니다.
| Zip Rapid Antibody Labeling Kits | Zenon Antibody Labeling Kits | |
|---|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 100 µg | 1-20 µg |
| 라벨링 표적/방법 | 유리 라이신/공유결합 아민-반응성 화학 | IgG의 Fc 부분/항체 친화성 |
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 아니요 | 아니요 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 예 | 아니요 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 아니요 | 아니요 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 아니요 | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 아니요 | 아니요 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 15분 | 5분 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | ||
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | ||
이 키트는 항체의 일차 아민을 공유결합하여 라벨링하는 기존의 아민-반응성 염료를 사용합니다.
| Standard Amine Reactive Antibody Labeling Kits | Zip Rapid Antibody Labeling Kits | Large Scale Antibody Labeling Kits | ReadyLabel Antibody Labeling Kits | |
|---|---|---|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 100 µg | 100 µg | 1 mg | 20 또는 100 µg |
| 라벨링 표적/방법 | 유리 라이신/공유결합 아민-반응성 화학 | |||
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 예 | 아니요 | 예 | 예 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 예 | 예 | 예 | 예 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 아니요 | 아니요 | 아니요 | 아니요 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 아니요 | 아니요 | 아니요 | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 예 - 포함 | 아니요 | 예 - 포함 | 예 - 포함 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 60분 | 15분 | 60분 | 60분 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | ||||
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | ||||
이 방법은 항원 결합 부위의 라벨링을 방지합니다.
| SiteClick Antibody Labeling Kits | |
|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 100 µg-5 mg |
| 라벨링 표적/방법 | IgG 중쇄 상의 탄수화물/공유결합, 구리가 없는(copper-free) 클릭 화학 |
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 예 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 예 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 예 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 예 - 포함 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 밤새 인큐베이션 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | |
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | |
치료용 항체의 결합을 신속하게 스크리닝하기 위한 항체 라벨링 키트
| Zenon Antibody Labeling Kits | ReadyLabel Antibody Labeling Kits | |
|---|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 1–20 µg (96회 라벨링) | 20 또는 100 µg (5회 라벨링) |
| 라벨링 표적/방법 | IgG의 Fc 부분/항체 친화성 | 유리 라이신/공유결합 아민-반응성 화학 |
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 아니요 | 예 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 아니요 | 예 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 아니요 | 아니요 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 예 | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 아니요 | 예 - 포함 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 5분 | 60분 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | ||
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | ||
pHrodo dye는 중성 pH에서는 비형광성이며 산성 환경에서는 내재화되면서 밝은 형광성을 띠게 됩니다.
| pHrodo Antibody Labeling Kits | SiteClick pHrodo Antibody Labeling Kits | Zenon pHrodo Antibody Labeling Reagents | |
|---|---|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 20 µg-1 mg | 100 µg-5 mg | 1-20 µg |
| 라벨링 표적/방법 | 유리 라이신/공유결합 아민-반응성 화학 | IgG의 Fc 부분/항체 친화성 | IgG의 Fc 부분/항체 친화성 |
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 예 | 예 | 아니요 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 예 | 예 | 아니요 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 아니요 | 예 | 아니요 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 아니요 | 예 | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 예 - 포함 | 예 - 포함 | 아니요 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 60분 | 밤새 인큐베이션 | 5분 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | |||
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | |||
이 키트에는 15분 이내에 준비되는 빠른 프로토콜과 컨주게이트가 포함되어 있습니다.
| Zip Rapid Antibody Labeling Kits | Zenon Antibody Labeling Kits | |
|---|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 100 µg | 1-20 µg |
| 라벨링 표적/방법 | 유리 라이신/공유결합 아민-반응성 화학 | IgG의 Fc 부분/항체 친화성 |
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 아니요 | 아니요 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 예 | 아니요 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 아니요 | 아니요 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 아니요 | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 아니요 | 아니요 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 15분 | 5분 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | ||
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | ||
이 키트는 항체의 일차 아민을 공유결합하여 라벨링하는 기존의 아민-반응성 염료를 사용합니다.
| Standard Amine Reactive Antibody Labeling Kits | Zip Rapid Antibody Labeling Kits | Large Scale Antibody Labeling Kits | ReadyLabel Antibody Labeling Kits | |
|---|---|---|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 100 µg | 100 µg | 1 mg | 20 또는 100 µg |
| 라벨링 표적/방법 | 유리 라이신/공유결합 아민-반응성 화학 | |||
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 예 | 아니요 | 예 | 예 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 예 | 예 | 예 | 예 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 아니요 | 아니요 | 아니요 | 아니요 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 아니요 | 아니요 | 아니요 | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 예 - 포함 | 아니요 | 예 - 포함 | 예 - 포함 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 60분 | 15분 | 60분 | 60분 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | ||||
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | ||||
이 방법은 항원 결합 부위의 라벨링을 방지합니다.
| SiteClick Antibody Labeling Kits | |
|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 100 µg-5 mg |
| 라벨링 표적/방법 | IgG 중쇄 상의 탄수화물/공유결합, 구리가 없는(copper-free) 클릭 화학 |
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 예 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 예 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 예 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 예 - 포함 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 밤새 인큐베이션 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | |
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | |
치료용 항체의 결합을 신속하게 스크리닝하기 위한 항체 라벨링 키트
| Zenon Antibody Labeling Kits | ReadyLabel Antibody Labeling Kits | |
|---|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 1–20 µg (96회 라벨링) | 20 또는 100 µg (5회 라벨링) |
| 라벨링 표적/방법 | IgG의 Fc 부분/항체 친화성 | 유리 라이신/공유결합 아민-반응성 화학 |
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 아니요 | 예 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 아니요 | 예 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 아니요 | 아니요 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 예 | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 아니요 | 예 - 포함 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 5분 | 60분 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | ||
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | ||
pHrodo dye는 중성 pH에서는 비형광성이며 산성 환경에서는 내재화되면서 밝은 형광성을 띠게 됩니다.
| pHrodo Antibody Labeling Kits | SiteClick pHrodo Antibody Labeling Kits | Zenon pHrodo Antibody Labeling Reagents | |
|---|---|---|---|
| 라벨링된 IgG 양/반응* | 20 µg-1 mg | 100 µg-5 mg | 1-20 µg |
| 라벨링 표적/방법 | 유리 라이신/공유결합 아민-반응성 화학 | IgG의 Fc 부분/항체 친화성 | IgG의 Fc 부분/항체 친화성 |
| 라벨링 정도를 측정할 수 있습니까? | 예 | 예 | 아니요 |
| 컨주게이트를 24시간 이상 저장할 수 있습니까? | 예 | 예 | 아니요 |
| 위치-특이적 라벨링입니까? | 아니요 | 예 | 아니요 |
| BSA 또는 시료 버퍼 내 기타 안정제와 호환됩니까? | 아니요 | 예 | 예 |
| 라벨링 후 정제가 필요합니까? | 예 - 포함 | 예 - 포함 | 아니요 |
| 프로토콜에 필요한 시간 | 60분 | 밤새 인큐베이션 | 5분 |
| 최적의 응용 분야** | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA | FC, IF, WB, HCA |
| * 키트는 달리 명시되지 않는 한, 분자량 150 kDa의 전체 IgG 단백질에 최적화되어 있습니다. 해당 키트의 경우, 최적의 염료:단백질 비율을 위해 단백질 농도를 조정하는 방법에 대한 지침을 참조하십시오. | |||
| **FC=flow cytometry, IF=immunofluorescence, WB=western blot analysis, HCA=high content analysis | |||
키트를 찾고 있거나 다른 염료가 필요하십니까?
유세포 분석 항체 컨주게이션의 경우, 좁은 방출(emission) 스펙트럼과 최소한의 교차-레이저 여기(excitation)로 더 높은 분해능을 제공하도록 설계된 면역표현형 분석용 NovaFluor Dye를 참조하십시오.
스펙트럼 전체에 걸쳐 1 mg 또는 100 μg의 항체를 DyLight 형광단(fluorophore)으로 라벨링할 수 있는 DyLight antibody labeling kit를 찾아보십시오.
독립형 아민-반응성 염료와 아민-반응성 화학에 대한 자세한 내용은 Fluorophores and Their Amine-Reactive Derivatives—Chapter 1, The Molecular Probes Handbook에서 찾아볼 수 있습니다.
또한 독립형 시약으로 제공되는 티올-반응성 염료도 있으며, 이에 대한 자세한 내용은 Thiol-Reactive Probes—Chapter 2, The Molecular Probes Handbook에서 확인할 수 있습니다.
아민-반응성 항체 라벨링 키트
Zip Rapid Antibody Labeling Kits
Zip Alexa Fluor Rapid Antibody Labeling Kit를 사용하면 중요한 항체에 형광 염료(fluorescent dye)를 효율적으로 라벨링하여 15분 이내에 바로 사용할 수 있는 항체 컨주게이트를 만들 수 있습니다.
- 100 μg의 IgG 항체 라벨링
- 키트당 3회의 라벨링 반응
- 매우 신속하고 사용하기 간편함
- 100% 항체 회수—정제 단계 없음
- 화학 또는 컨주게이션 경험이 필요하지 않음
이 키트에는 3회의 개별 라벨링 반응을 수행하는 데 필요한 모든 것이 포함되어 있습니다. 공유결합 라벨링된 컨주게이트는 유세포 분석, 형광 현미경, 면역조직화학, 1차 항체 검출, ELISA, 면역세포화학 및 간접 FISH를 포함한 여러 응용 분야에서 탁월합니다. Zip 버퍼가 포함된 구성 요소 A에 물 1 mL를 추가하고 항체 1 mg을 추가한 후 15분 동안 인큐베이션하면 항체를 사용할 준비가 완료됩니다(그림 1).
확대하려면 이미지를 클릭하십시오.
그림 1. Zip Rapid Antibody Labeling Kit 개요
Zip Rapid Antibody Labeling Kit 선택 가이드
Ex/Em = 형광 여기 및 방출 최대값(nm 단위).
형광단(Fluorophore) 선택 가이드에서 Alexa Fluor dye 및 기타 형광단에 대한 자세한 정보를 확인하십시오.
Standard Amine-Reactive Antibody Labeling Kits
Thermo Fisher Scientific Standard Amine-Reactive Antibody Labeling Kit는 100 µg IgG 다클론 및 단클론 항체를 당사의 탁월한 Alexa Fluor, Pacific Blue 또는 Pacific Orange dyes로 라벨링합니다.
- 100 µg 라벨링
- 키트당 5회의 라벨링 반응
- 90분 내에 라벨링된 항체 준비
- 실제 수작업 시간 약 15분
- 라벨링 반응 전에 BSA 및 기타 단백질 안정제를 제거해야 함
항체 라벨링 키트는 아민-반응성 Alexa Fluor, Pacific Blue 또는 Pacific Orange 형광단(fluorophore)을 활용하여 관심 IgG 항체에 라벨을 공유결합하여 부착합니다. 일단 형성된 라벨과 단백질 사이의 공유 결합은 매우 안정적이며, 당사에서 1차 및 2차 컨주게이트를 준비하는 데 사용하는 것과 동일한 화학 기술이 사용됩니다.
이 키트는 반응당 100 µg의 항체를 라벨링하는 데 최적화되어 있습니다. 제공된 버퍼에서 단백질 농도를 약 1 mg/mL로 조정한 다음, 아민-반응성 염료 바이알에 추가하기만 하면 됩니다. 모든 안정화 단백질(예: BSA)은 라벨링 반응 전에 제거해야 합니다.
정제는 ≥40 kDa 단백질에 최적화된 크기 배제 스핀 컬럼에서 수행됩니다(그림 2). 전체 라벨링 및 정제 절차는 90분 이내에 짧게 완료할 수 있으며 5회의 컨주게이션 작업을 수행하는 데 필요한 모든 것이 제공됩니다.
그림 2. 항체 라벨링 키트 프로세스 개요. 제공된 버퍼에서 단백질 농도를 약 1 mg/mL로 조정한 다음, 아민-반응성 염료 바이알에 추가하기만 하면 됩니다. 정제는 ≥40 kDa 단백질에 최적화된 크기 배제 스핀 컬럼에서 수행됩니다.
항체 라벨링 키트 선택 가이드
| 라벨 | Ex/Em | Cat. No. |
|---|---|---|
| Alexa Fluor 350 | 346/442 | A20180 |
| Alexa Fluor 488 | 495/519 | A20181 |
| Alexa Fluor 532 | 532/553 | A20182 |
| Alexa Fluor 546 | 556/573 | A20183 |
| Alexa Fluor 555 | 555/565 | A20187 |
| Alexa Fluor 568 | 578/603 | A20184 |
| Alexa Fluor 594 | 590/617 | A20185 |
| Alexa Fluor 647 | 650/665 | A20186 |
| Alexa Fluor 680 | 684/707 | A20188 |
| Alexa Fluor 790 | 784/814 | A20189 |
| Pacific Blue dye | 410/455 | P30013 |
| Pacific Orange dye | 405/551 | P30014 |
Ex/Em = 형광 여기 및 방출 최대값(nm 단위).
형광단(Fluorophore) 선택 가이드에서 Alexa Fluor dye 및 기타 형광단에 대한 자세한 정보를 확인하십시오.
ReadyLabel Antibody Labeling Kits
Invitrogen ReadyLabel Antibody Labeling Kit는 BSA 및 기타 단백질 안정제와 같은 불순물이 있는 상태에서도 항체를 라벨링할 수 있도록 사용하기 쉬운 컨주게이션 키트를 제공하여 "컨주게이션 준비"의 의미를 재정의합니다.
- 20 μg 또는 100 μg의 IgG 항체 라벨링
- 키트당 5회의 라벨링 반응
- 60분 내에 라벨링된 항체 준비
- 실제 수작업 시간 약 20분
- 항체 정제 단계가 필요하지 않음
- 단일 또는 멀티플렉스 염색
ReadyLabel Antibody Labeling Kit를 사용하면 항체 용액의 사전 정제 없이도 기성품 항체와 세포 배양 상청액으로 빠르고 편리하게 항체 컨주게이션을 수행할 수 있습니다. 이는 제공된 ReadyLabel 스핀 컬럼에 항체 용액에 존재하는 오염물인 안정제 단백질을 걸러내는 레진이 포함되어 있기 때문에 가능합니다(그림 3). 이렇게 생성된 공유결합 항체 컨주게이트는 유세포 분석, 웨스턴 블롯팅, ELISA 및 간접 FISH와 함께 사용할 수 있습니다.
ReadyLabel Kit에는 가장 인기 있는 염료(Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647, 비오틴)가 들어 있으며 높은 수율의 밝고 용해성 있는 컨주게이트를 생산할 수 있습니다. 다른 염료가 필요하십니까? 염료를 제외한 모든 구성품이 포함된 ReadyLabel Flex Kit를 고려해보세요. 그리고 원하는 염료를 함께 사용해보세요. 당사의 모든 ReadyLabel 키트는 반응당 20 μg 및 100 μg의 IgG 라벨링을 위해 설계된 두 가지 팩 크기로 제공되며, 5회 라벨링 반응에 필요한 모든 구성 요소가 포함되어 있습니다.
그림 3. 항체는 품질 저하를 방지하기 위해 BSA 또는 기타 단백질 안정제와 함께 보관하는 경우가 많습니다. ReadyLabel Kit에는 이러한 오염물을 포착하는 레진 함유 스핀 컬럼이 장착되어 있어 항체 용액의 정제 단계를 생략할 수 있습니다. 약 20분의 수작업 시간과 실온에서 30분의 인큐베이션만으로 공유 결합된 항체 컨주게이트를 사용할 준비가 완료됩니다.
ReadyLabel 멀티플렉싱 기능:
ReadyLabel Antibody Labeling Kit는 멀티플렉싱 실험을 위한 고유한 이점을 제공합니다. 사용 가능한 IgG 종의 수에 제약을 받는 2차 검출 방법과 달리, 당사 키트를 사용하면 1차 항체를 직접 컨주게이트 할 수 있습니다. 이는 더욱 높은 유연성으로 더 높은 수준의 멀티플렉싱을 달성할 수 있음을 의미합니다.
고품질의 밝은 염료와 백그라운드 노이즈를 최소화하는 데 중점을 두고 설계된 이 키트를 통해 실험에서 선명하고 정밀한 신호를 얻을 수 있습니다. 이러한 선명도는 결과의 신뢰성과 정확성을 높이므로 ReadyLabel Antibody Labeling Kit는 멀티플렉싱 응용 분야에 매우 적합합니다.
그림 4. ReadyLabel Kit를 사용하여 컨주게이트된 3개의 1차 항체로 염색한 FFPE Human Tonsil Tissue: CD45RB-Alexa Fluor 488 ReadyLabelTM 컨주게이트, CD68-Alexa Fluor 594 ReadyLabelTM 컨주게이트(ReadyLabelTM Flex Antibody Labeling Kit와 함께 Alexa Fluor 594 NHS Ester 사용), PCNA-Alexa Fluor 647 ReadyLabelTM 컨주게이트.
ReadyLabel 주문 정보
Invitrogen ReadyLabel Antibody Labeling Kit
Large-Scale Antibody Labeling Kits
Thermo Fisher Scientific Large-Scale Antibody 또는 Protein Labeling Kit는 형광 염료(Alexa Fluor dye 포함) 또는 비오틴으로 1 mg의 IgG 항체를 매우 손쉽게 공유 결합 라벨링할 수 있는 방법을 제공합니다.
- 1 mg 항체 라벨링
- 키트당 3회의 라벨링 반응
- 라벨링 전에 BSA 및 기타 안정제를 제거해야 함
- 아민-함유 버퍼(예: Tris)와 호환되지 않음
- 2시간 내에 준비 완료
- 실제 수작업 시간 약 30분
Large-Scale Antibody 또는 Protein Labeling Kit는 아민-반응성 형광단 또는 합텐(hapten)을 사용하여 IgG 항체에 라벨을 공유 결합 부착합니다. 일단 형성된 라벨과 단백질 사이의 공유 결합은 매우 안정적이며, 당사에서 1차 및 2차 컨주게이트를 준비하는 데 사용하는 것과 동일한 화학 기술이 사용됩니다.
미리 측정된 양의 아민-반응성 염료와 마그네틱 교반 막대가 들어 있는 바이알 중 하나에 약 1mg의 정제된 IgG (약 500 μL 내, Tris와 같은 아민-함유 버퍼 없음)를 추가하기만 하면 됩니다. 정제는 키트와 함께 제공된 사전 포장된 스핀 컬럼으로 이루어지며 높은 항체 회수율(일반적으로 >85%)을 제공합니다. 전체 라벨링 및 정제 절차는 90분(수작업 시간 약 15분) 이내에 짧게 완료할 수 있습니다. 라벨링 정도(DOL, degree of labeling)를 측정하려면 유리 염료 제거가 필수적입니다. 3회의 컨주게이션을 수행하는 데 필요한 모든 것이 제공됩니다.
확대하려면 이미지를 클릭하십시오.
그림 5. Large-Scale Antibody Labeling Kit 프로세스 개요. 단백질 농도를 약 2 mg/mL로 조정하고, 제공된 bicarbonate를 추가한 후, 반응성 염료 바이알에 용액을 추가합니다. 정제는 ≥20 kDa의 단백질과 호환되는 사전 포장된 스핀 컬럼을 사용하여 수행됩니다.
Large-Scale Antibody 또는 Protein Labeling Kit 선택 가이드
| 라벨 | Ex/Em | Cat. No. |
|---|---|---|
| Alexa Fluor 350 | 346/442 | A10170 |
| Alexa Fluor 488 | 495/519 | A10235 |
| Alexa Fluor 532 | 532/553 | A10236 |
| Alexa Fluor 546 | 556/573 | A10237 |
| Alexa Fluor 555 | 555/565 | A20174 |
| Alexa Fluor 568 | 578/603 | A10238 |
| Alexa Fluor 594 | 590/617 | A10239 |
| Alexa Fluor 633 | 621/639 | A20170 |
| Alexa Fluor 647 | 650/665 | A20173 |
| Alexa Fluor 660 | 663/690 | A20171 |
| Alexa Fluor 680 | 679/702 | A20172 |
| Fluorescein | 494/518 | F10240 |
| Oregon Green 488 | 496/524 | O10241 |
| Pacific Blue dye | 410/455 | P30012 |
| Pacific Orange dye | 400/551 | P30016 |
| Texas Red dye | 595/615 | T10244 |
| Biotin | NA | D20655 |
Ex/Em = 형광 여기 및 방출 최대값(nm 단위).
형광단(Fluorophore) 선택 가이드에서 Alexa Fluor dye 및 기타 형광단에 대한 자세한 정보를 확인하십시오.
친화성 항체 라벨링 키트
Zenon Antibody Labeling Kits
Invitrogen Zenon 라벨링 기술은 하이브리도마 배양 상청액과 같이 정제되지 않은 최소한의 소스에서도 다양한 형광색소에 항체를 빠르게 컨주게이트합니다. 1차 항체의 Fc 부분에 결합하도록 설계된 Zenon 단편은 항체 기능을 손상시키지 않고 소량의 항체를 특이적이고 비공유결합 방식으로 라벨링할 수 있습니다. Zenon Alexa Fluor Plus 라벨링 시약은 Zenon 기술의 속도와 확장성을 Alexa Fluor Plus dye의 뛰어난 성능과 결합하여 치료용 항체 개발에서 항체 결합을 스크리닝하는 데 최적의 시스템을 제공합니다.
- 인큐베이션 시간 5분
- 라벨링당 1–20 µg 1차 항체
- BSA 및 기타 안정화 단백질과 호환
- 정제 단계 없음
- 항체 결합의 신속한 스크리닝 가능
- 1차 항체 기능 보존
Invitrogen Zenon 라벨링 시약은 다양한 형광단으로 human, mouse 및 rabbit IgG 항체를 비공유결합 방식으로 라벨링하는 빠르고 사용하기 쉬운 시스템을 제공합니다. 사전 라벨링된 Zenon Fab 단편은 IgG 항체의 Fc 부분에 빠르게 결합하여 항체 기능을 보존하도록 설계되었습니다. Zenon Fab-항체 컨주게이션은 5분 이내에 발생하며 소량의 시작 물질만 필요하고 정제 단계가 필요하지 않습니다.
그림 6. 실온에서 Zenon 라벨링 시약으로 라벨링한 mouse 또는 human IgG 세포는 표면 항원을 검출하기 위해서는 30분 정도로 짧게, 항체 내재화를 확인하기 위해서는 최대 24시간 동안 라벨링된 IgG로 처리됩니다. 그런 다음, 유세포 분석기, high content imaging 또는 live cell 인큐베이터로 이미징 및 정량을 실시하여 검출하고 분석할 수 있습니다.
항체 결합의 신속한 스크리닝을 위한 Zenon 라벨링 시약 사용
항체 결합을 스크리닝하는 데 최적화된 새로운 Invitrogen Zenon Alexa Fluor Plus 라벨링 시약은 항체 결합을 밝은 형광 기반 표시로 제공합니다. 이 시약은 빠르고 확장 가능한 Zenon 기술과 우수한 Alexa Fluor Plus fluorophore를 결합하여 더 높은 신호 대 잡음비를 제공하고 스크리닝 결과에 대한 신뢰도를 높입니다.
치료용 항체 결합 스크리닝에 대해 자세히 알고 싶으십니까?
치료용 항체 스크리닝을 위한 항체 라벨링 시약에 대한 과학 포스터 보기
그림 7. Zenon Goat Anti-Human Alexa Fluor Plus Labeling Reagent로 처리한 다양한 mouse 및 human IgG. 5분간 인큐베이션한 후, SKBR3 세포를 60분간 항체로 처리한 다음 CellInsight CX7 LED Pro에서 양성 결합을 스크리닝했습니다. 이 스크리닝에서 Trastuzumab은 SKBR3 세포의 세포 표면에 결합하는 것으로 확인된 유일한 항체였습니다.
항체 결합용 Zenon 항체 라벨링 키트
항체 내재화 스크리닝에 관심이 있으십니까?
Zenon pHrodo Labeling Reagent 보기
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멀티플렉스 면역형광을 위한 Zenon 항체 라벨링 키트
위치-특이적 항체 라벨링 키트
SiteClick Antibody Labeling Kit를 이용한 클릭 화학 라벨링
Thermo Fisher Scientific SiteClick Labeling Kit를 사용하면 항원 결합 도메인에서 멀리 떨어진 중쇄 N-연결 글리칸에 검출 분자를 간단하고 부드럽게 부위별로 부착할 수 있어 라벨링 간, 항체 간 우수한 재현성을 제공합니다. 피코빌리프로테인(예: R-PE), QDot probe, Alexa Fluor dye, pHrodo dye, 금속-킬레이팅 화합물, 비오틴과 같은 기타 저분자 등 다양한 검출 분자를 중쇄 글리칸에 위치-선택적으로 부착할 수 있으므로 동일한 종의 항체를 사용한 멀티플렉스 분석이 가능합니다. 특징:
- 100 μg에서 최대 5 mg의 항체 라벨링
- 따라하기 쉬운 단계별 프로토콜
- 고효율, 위치-특이적, 재현 가능한 라벨링 화학 기술
- 멀티컬러 실험을 쉽게 설계할 수 있는 유연한 형식의 키트와 염료 이용 가능
Nobel Prize™를 수상한 클릭 화학: 그 기원과 미래 영향력
2022년 Nobel Prize™ 화학상은 다양한 과학 및 의학 분야에 큰 영향을 미친 혁신적인 기술인 클릭 화학의 선구적인 업적을 인정받은 세 명의 과학자에게 수여되었습니다. 클릭 화학 및 그 의미에 대한 자세한 내용은 New England Journal of Medicine의 이 기사를 참조하십시오.
일반적으로, IgG 항체는 항체 중쇄 Fc 도메인에 위치한 특이적으로 보존된 아스파라긴 잔기에 부착된 2개의 N-연결 글리칸을 포함합니다. 이 당 사슬은 주로 두 개의 말단 분지가 있는 복잡한 바이안테너리(biantennary) 글리칸으로 구조적으로 매우 균질하며, 글리칸 분지의 말단 시퀀스는 매우 일관적입니다. 대부분의 항체 글리칸 분지는 galactose-N-acetylglucosamine (Gal-GlcNAc-) 또는 N-acetylglucosamine (GlcNAc-)으로 종결됩니다. β-갈락토시다제로 말단 Gal 잔기를 제거하면 후속 효소 β-galactosyl transferase(GalT) 반응을 위한 대부분의 말단 GlcNAc 라벨링 부위가 드러납니다(그림 8). β-갈락토시다제에 의해 말단 Gal 잔기가 절단된 후, 각 N-연결 글리칸은 평균적으로 중쇄당 2개의 말단 GlcNAc 잔기(항체당 4개의 말단 GlcNAc)를 포함하게 됩니다. 이제 구리가 없는(copper-free) 클릭 화학을 사용하여 아지드-활성화 항체를 dibenzocyclooctyne(DIBO)-기능화 프로브로 라벨링할 수 있습니다(그림 9).
SiteClick 기술을 사용하여 위치-특이적으로 항체를 라벨링하는 방법
이 동영상에서는 효소 및 클릭 화학 접근법을 사용하여 항체를 쉽고 위치 특이적으로 라벨링하는 방법을 설명합니다. 이 방법은 모든 원형(intact) IgG 항체에 적용할 수 있으며 항체 엔지니어링이나 복잡한 방법론이 필요하지 않습니다.
확대하려면 이미지를 클릭하십시오.
그림 8. SiteClick Antibody Labeling Kit 개요. SiteClick 항체 라벨링 프로세스의 첫 번째 단계는 β-갈락토시다아제를 사용하여 항체의 중쇄 N-연결 글리칸에서 말단 갈락토스 잔기를 제거하여 가능한 모든 변형 가능한 GlcNAc 잔기를 노출시키는 것입니다. 둘째, GalT(Y289L) 효소를 사용하여 GalNAz를 말단 GlcNAc 잔기에 효소적으로 부착함으로써 유리 말단 GlcNAc 잔기가 아지드 태그로 활성화됩니다. 세 번째 단계에서는 아지드 잔기를 원하는 dibenzocyclooctyne(DIBO)-기능화 프로브(예: Alexa Fluor 488 sDIBO alkyne)와 반응시킵니다(이 반응은 그림 10 참조). 평균 라벨링 정도는 항체당 3–3.5개 라벨입니다.
그림 9. 구리가 없는(Copper-less) 클릭 화학 azide/DIBO 반응. azide와 alkyne 부분을 서로 바꿔 사용할 수 있습니다. 이 분자를 DIBO로 라벨링하고 형광단(fluorophore) 또는 hapten-azide와 반응시킬 수 있습니다.
SiteClick 방법은 인간, 토끼, 마우스, 쥐, 염소, 햄스터, 닭 등을 포함하되 이에 국한되지 않는 다양한 종의 항체와 호환됩니다. 또한 SiteClick 라벨링은 IgG, IgM 및 IgY와 같은 여러 항체 클래스에 효과적이며, chicken IgY 항체는 중쇄 글리칸이 2개가 아닌 6개이므로 더 높은 범위로 라벨링될 수 있습니다.
SiteClick 항체 라벨링 시스템 유연성 제공
SiteClick 항체 라벨링 시스템은 두 가지 형식으로 제공됩니다.
- 항체 준비를 위한 아지도(azido) 변형 성분과 항체 라벨링을 위한 sDIBO alkyne이 모두 포함된 키트(그림 8A 및 B에 표시된 전체 반응).
- 아지도(azido) 변형 성분만 포함된 키트(그림 8A에 표시된 반응의 처음 두 단계).
- 변형 항체를 라벨링하는 데 사용할 수 있는 다양한 독립형 sDIBO alkyne 시약(그림 8B의 단계).
이러한 형식의 유연성은 동일한 항체의 라벨링 정도에 영향을 주지 않으면서 사용되는 형광 염료를 쉽게 변경할 수 있고, 대량의 변형 항체를 준비하고 필요에 따라 소량만 라벨링하여 라벨링 정도와 기능의 일관성을 유지할 수 있는 등 여러 가지 이점을 제공합니다.
잘 보존되는 항체 기능
항체 중쇄 Fc 도메인의 N-연결 글리칸에 염료가 공유 결합 및 위치-특이적으로 부착되어 항원 결합 부위의 면역원성이 보존되므로 아민-반응성 염료로 무작위로 라벨링된 항체에 비해 항원에 더 효율적으로 결합됩니다. SiteClick-라벨링된 anti-troponin 1 항체와 아민-반응성 라벨링 anti-troponin 1 항체를 나란히 비교한 결과, SiteClick 라벨링 항체의 감도가 아민-반응성 라벨링 항체보다 더 높았습니다(그림 10).
그림 10. 비드(bead) 기반 샌드위치 분석에서 SiteClick 항체 라벨링과 아민-반응성 항체 라벨링의 비교. Anti-Troponin(Trpl) 항체 포획 비드를 사용하고 SiteClick 시스템 또는 아민-반응성 시스템으로 라벨링된 비오티닐화 anti-Trpl 항체를 사용하여 트로포닌 항원 검출을 수행했습니다. 스트렙타비딘-매개 화학발광 분석법을 사용하여 결합을 검출했습니다.
항체 라벨링 정도 연구에서 로트 간(lot-to-lot) 일관성 유지
SiteClick 항체 라벨링 시스템으로 항체를 라벨링하면 반응 최적화에 시간을 소요할 필요가 없고 매번 동일한 방식으로 항체를 라벨링할 수 있습니다. 이는 각 분자에 부착된 염료의 수가 동일하고 항원 결합 부위가 동일하게 보존되어 매번 동일한 결과를 제공한다는 것을 의미합니다. 서로 다른 항체 간 라벨링의 일관성을 보여주는 예가 그림 11에 나와 있습니다.
그림 11. 로트 간, 항체 간 일관성 β-갈락토시다아제로 절단된 아지드-활성화 항체와 SiteClick Alexa Fluor 488 sDIBO Alkyne dye를 사용하여 3년 동안 여러 사용자가 서로 다른 종에서 얻은 28가지 1차 항체를 정확히 동일한 조건에서 라벨링했습니다. 라벨링 정도는 평균 3.4±0.39로 SiteClick 라벨링 시스템의 일관성을 보여주었습니다. 이러한 항체의 유형, 종 및 항원성은 표 1을 참조하십시오.
표 1. 라벨링 정도 연구에서 라벨링된 1차 항체의 항원성(그림 11).
| Human IgG1 | Human IgG3 | Mouse IgG1 | Mouse IgG2a | Goat Polyclonal |
|---|---|---|---|---|
| EGFR | Lymphoma cell | GD2 | CD4 | Apolipoprotein-A2 |
| HER2/neu | GD3 | β-tubulin | CD3 | |
| sLea | sLea | CD8a | CD8 | |
| GD2 | f-GM1 | CD45 | CD56 | |
| GM2 | Tn | C3b, iC3b | C3b, iC3b, C3dg | |
| J591 | Interferon-γ |
SiteClick Antibody Labeling Kit 선택 가이드
| 제품명 | 라벨링된 항체 양 | Ex/Em* | Cat. No. |
|---|---|---|---|
| 항체 변형만을 위한 전용 키트 | |||
| SiteClick Azido Modification Kit | 100 μg | 해당 없음 | S20026 |
| 1 mg | S10900 | ||
| 5 mg | S10901 | ||
| 독립형 라벨링 시약 | |||
| SiteClick Alexa Fluor 488 sDIBO Alkyne | 100 μg | 495/519 | C20027 |
| 1 mg | S10904 | ||
| 5 mg | S10909 | ||
| SiteClick Alexa Fluor 555 sDIBO Alkyne | 100 μg | 555/565 | C20028 |
| SiteClick Alexa Fluor 647 sDIBO Alkyne | 100 μg | 650/665 | C20029 |
| 1 mg | S10906 | ||
| 5 mg | S10911 | ||
| SiteClick iFL pHrodo Red sDIBO Alkyne | 100 μg | 560/585 | C20034 |
| 1 mg | S10903 | ||
| 5 mg | S10908 | ||
| SiteClick iFL pHrodo Deep Red sDIBO Alkyne | 100 μg | 640/655 | S10914 |
| 1 mg | S10915 | ||
| SiteClick Biotin sDIBO Alkyne | 100 μg | 해당 없음 | C20030 |
| 1 mg | S10902 | ||
| 5 mg | S10907 | ||
| SiteClick Amine sDIBO Alkyne | 100 μg | 해당 없음 | C20031 |
| 항체 변형 + 라벨링 시약이 포함된 키트 | |||
| SiteClick R-PE Antibody Labeling kit | 100 μg | 565/578 | S10467 |
| SiteClick Qdot 525 Antibody Labeling kit | 100 μg | 405/525 | S10449 |
| SiteClick Qdot 565 Antibody Labeling kit | 100 μg | 405/565 | S10450 |
| SiteClick Qdot 585 Antibody Labeling kit | 100 μg | 405/585 | S10451 |
| SiteClick Qdot 605 Antibody Labeling kit | 100 μg | 405/605 | S10469 |
| SiteClick Qdot 625 Antibody Labeling kit | 100 μg | 405/625 | S10452 |
| SiteClick Qdot 655 Antibody Labeling kit | 100 μg | 405/655 | S10453 |
| SiteClick Qdot 705 Antibody Labeling kit | 100 μg | 405/705 | S10454 |
| SiteClick Qdot 800 Antibody Labeling kit | 100 μg | 405/800 | S10455 |
| SiteClick Biotin Antibody Labeling Kit | 100 μg | 해당 없음 | S20033 |
*Ex/Em = 형광 여기 및 방출 최대값(nm 단위).
형광단(Fluorophore) 선택 가이드에서 Alexa Fluor dye 및 기타 형광단에 대한 자세한 정보를 확인하십시오.
리소스
메서드(Method) 관련 문헌
지원
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.