Microscopic image of cells labeled with green mitochondria fusion protein, red talin cytoskeletal fusion protein, and blue nucleus stain

CellLight 형광 단백질은 살아있는 세포(live cells)에서 특정 구조를 쉽게 라벨링할 수 있는 방법을 제공합니다. 바로 사용할 수 있는 이 구성체를 세포에 추가하여 하룻밤 동안 인큐베이션한 후 아침에 이미징이 가능합니다. 이 구성체는 특정 세포내 구조를 표적으로 하는 형광 융합 단백질을 발현합니다. 분자 생물학 기술이 필요 없는 간단한 트랜스펙션 단계, BacMam 기술을 사용하여 형광 단백질이 유입됩니다. 이 방법으로 세포 염색과 동일한 효과를 얻을 수 있습니다.

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CellLight 형광 단백질을 사용한 라벨링의 장점

  • 실험 요구사항에 이상적인 특정 세포내 표적
  • 각 세포 구조를 위한 추가-배양-이미지의 간단한 프로토콜
  • 다른 CellLight 단백질, 항체 또는 유기 염료(dye)와 함께 멀티플렉싱

CellLight 형광 단백질 선택 가이드

 GFPRFPCFP
Excitation 파장 범위488-510555-584435-485
크기1mL1mL1mL
액틴(Actin)C10582C10583
세포질(Cytoplasm)B10383
소포체(Endoplasmic reticulum)C10590C10591
초기 엔도솜(Early endosomes)C10586C10587
후기 엔도솜(Late endosomes)C10588C10589
골지체(Golgi)C10592C10593
히스톤(Histone 2B)C10594C10595
리소좀(Lysosomes)C10596C10597
미토콘드리아(Mitochondria)C10600C10601
세포핵(Nucleus)C10602C10603
퍼옥시좀(Peroxisome)C10604
원형질 막(Plasma membrane)C10607C10608C10606
탈린(Talin)C10611
튜뷸린(Tubulin)C10613C10614
BacMam 2.0 transduction controlB10383
비결합(unconjugated)
Null virus (control)C10615

CellLight 워크플로우

Schematic of adding CellLight fluorescent proteins to your cells

BacMam 2.0 기반 CellLight 형광 융합 단백질을 사용하여 유전자를 발현하는 작업은 매우 간단합니다.

  1. 전체 배지 내 세포에 바이러스를 추가합니다.
  2. 하룻밤 동안 배양합니다.
  3. 나중에 사용할 수 있도록 이미징하거나 고정화합니다.

플레이팅 직전에 CellLight 형광 융합 단백질과 세포를 혼합함으로써 세포에 형질도입을 할 수 있습니다. 또는, 이미 접시 또는 플레이트에 있는 세포에 바이러스를 추가함으로써 부착 세포에 형질도입을 할 수 있습니다. 일반적으로, 최적의 형질도입은 70% confluence에서 BacMam 입자 대 세포 비율이 20:1 일때 얻어집니다.

BacMam 전달 기술

BacMam 기술은 효율적인 형질도입 시스템을 제공하여 어세이를 실행하기 위한 관련 세포 모델을 만들 수 있습니다. BacMam 기술을 사용하여 표적 형광 단백질로 소기관을 라벨링할 수 있고, 이온 채널 또는 수용체와 같은 약물 표적을 발현하거나 형광 단백질 인디케이터를 사용하여 세포 프로세스를 모니터링할 수 있습니다. Invitrogen ViraPower BacMam Expression System을 사용하여 맞춤형 구성체를 만들 수도 있습니다.

CellLight 형광 융합 단백질 사용 지침

CellLight 형광 융합 단백질을 사용하는 경우:

  • 독성 또는 화학적 파괴를 최소화하면서 살아있는 세포(live cells)에서 소기관 또는 세포내 구조를 표적화하려는 경우
  • 더 높은 분해능을 요구하는 기능을 식별하려는 경우
  • 개별 세포의 행동을 추적하고, 살아있는 세포에서 또는 고정 후 분석하기 위해, 다른 CellLight 형광 단백질 또는 유기 염료(dye)와 함께 멀티플렉싱하려는 경우
  • 막 전위에 관계없이 미토콘드리아를 라벨링하고 pH에 관계없이 리소좀을 라벨링하려는 경우

CellLight 형광 융합 단백질을 사용하지 않는 경우:

  • CellLight 형광 융합 단백질이 100% 트랜스펙션을 나타내지는 않으므로 세포 집단 연구 또는 자동 이미징/카운팅 중인 경우(트랜스펙션 속도 및 조건은 세포 유형에 따라 다를 수 있으므로 용도에 대한 광범위한 참조 목록이 제공됩니다)

CellLight 이미지 갤러리

  • Mitochondria and cytoskeleton staining in live HeLa cells
  • Cytoskeleton staining in live HEKn cells
  • Oxidative stress detection in human osteosarcoma (U2OS) cells
  • Peroxisome and golgi staining in live HEKn cells
  • Cytoskeleton staining and autophagy detection in live U2OS cells
  • Monitoring autophagy, tubulin, and mitochondria in live U2OS cells
  • Cytoskeleton staining in live HEKn cells
  • Nucleus and mitochondria staining in live HeLa cells
  • Cytoskeleton staining in live HEKn cells

CellLight 시약 비디오

신경세포 성장 콘(neuronal growth cone) 변화의 실시간 시각화


U2OS 세포 분열의 타임 랩스 동영상

Stylesheet for Classic Wide Template adjustments

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.