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고정 세포 이미징을 위한 5 단계
향상된 고정 세포 이미징 결과
최적화된 워크플로우와 함께 사전 포장된 시약 키트와 사용이 편리하고 강력한 현미경을 결합하면 고정 세포 이미징 실험을 극대화할 수 있습니다. 아래에서 고정화 및 투과화, 세포 라벨링(Labeling) 및 이미지 캡처를 위한 제품을 찾아보세요.
고정 세포 이미징 제품 선택 가이드
EVOS DAPI Light Cube (AMEP4650)
Excitation: 357/44 nm;
Emission: 447/60 nm
| 단계 | 애플리케이션 | DAPI 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | ||
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| Nucleus | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antibody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| Streptavidin | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
EVOS GFP Light Cube (AMEP4651)
Excitation: 470/22 nm;
Emission: 510/42 nm
| 단계 | 애플리케이션 | GFP 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | 미토콘드리아 | |
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| Nucleus | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antibody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| 2차 항체 | ||
| Streptavidin | ||
| SuperBoost TSA kits | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
EVOS RFP Light Cube (AMEP4652)
Excitation: 531/40 nm;
Emission: 593/40 nm
| 단계 | 애플리케이션 | RFP 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | 미토콘드리아 | |
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| Nucleus | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antibody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| Streptavidin | ||
| 2차 항체 | ||
| SuperBoost TSA kits | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
EVOS Red Light Cube (AMEP4655)
Excitation: 585/29 nm;
Emission: 624/40 nm
| 단계 | 애플리케이션 | Texas Red 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | ||
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antobody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| Streptavidin | ||
| 2차 항체 | ||
| SuperBoost TSA kits | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
EVOS Cy5 Light Cube (AMEP4656)
Excitation: 628/40 nm;
Emission: 693/40 nm
| 단계 | 애플리케이션 | Cy5 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | 미토콘드리아 | |
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| Nucleus | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antobody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| Streptavidin | ||
| SuperBoost TSA kits | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
EVOS DAPI Light Cube (AMEP4650)
Excitation: 357/44 nm;
Emission: 447/60 nm
| 단계 | 애플리케이션 | DAPI 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | ||
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| Nucleus | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antibody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| Streptavidin | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
EVOS GFP Light Cube (AMEP4651)
Excitation: 470/22 nm;
Emission: 510/42 nm
| 단계 | 애플리케이션 | GFP 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | 미토콘드리아 | |
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| Nucleus | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antibody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| 2차 항체 | ||
| Streptavidin | ||
| SuperBoost TSA kits | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
EVOS RFP Light Cube (AMEP4652)
Excitation: 531/40 nm;
Emission: 593/40 nm
| 단계 | 애플리케이션 | RFP 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | 미토콘드리아 | |
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| Nucleus | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antibody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| Streptavidin | ||
| 2차 항체 | ||
| SuperBoost TSA kits | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
EVOS Red Light Cube (AMEP4655)
Excitation: 585/29 nm;
Emission: 624/40 nm
| 단계 | 애플리케이션 | Texas Red 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | ||
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antobody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| Streptavidin | ||
| 2차 항체 | ||
| SuperBoost TSA kits | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
EVOS Cy5 Light Cube (AMEP4656)
Excitation: 628/40 nm;
Emission: 693/40 nm
| 단계 | 애플리케이션 | Cy5 채널용 주요 도구 |
|---|---|---|
| 1 단계. 고정화, 투과화 및 차단 | 버퍼(Buffers) |
|
| 2 단계. 라벨(Label) | 미토콘드리아 | |
| Cytoskeleton | ||
| Plasma membrane | ||
| Nucleus | ||
| 3 단계. 검출(Detect) | Antobody direct labeling kits | |
| Zenon kits | ||
| Streptavidin | ||
| SuperBoost TSA kits | ||
| 4 단계. Protect and enhance | Signal enhancer | |
| Mountants and antifades | ||
| 5 단계. 이미지(Image) | 이미징 및 분석 |
고정 세포 이미지를 최상의 품질로 캡처하기 위한 5 단계
1 단계. 준비
형광 라벨링(Labeling)을 위해 세포를 준비합니다.
최적의 이미징 품질을 얻기 위해 관심있는 단백질과 세포 구조에 대한 연구를 설정하고 이외의 다른 것들은 이미지에서 배제합니다. 고정화 및 투과화를 통해 세포 구조, 단백질 및 핵산을 제자리에 고정시켜 세포 시료에 라벨링(Labeling)을 하기 위한 준비를 한 다음, 항체 및 형광 염색제를 세포 내부에 스며들게 하여 관심 대상인 표적을 라벨링(Labeling) 할 수 있습니다.
고정화를 통해 세포 구조를 제자리에 고정합니다.
투과화는 세포막의 지질을 제거하여 라벨링(Labeling) 및 검출(Detect) 시약을 세포 내부에 도달할 수 있도록 합니다.
단백질 기반의 차단제는 비특이적 염색을 줄이는 기능을 합니다. 항체는 차단 단백질을 대체하여 해당 표적과의 고친화성 상호작용을 형성하고, 나머지 차단 단백질은 시료 내 다른 곳에서 저친화성 항체 상호작용을 방지합니다.
고정화 및 투과화 후 U2OS 세포를 NucBlue Live Cell Stain 및 ActinGreen 488 ReadyProbes 시약으로 염색했습니다. A에서는 고정을 위해 메탄올 기반 용액을 사용하고, B에서는 포름알데히드 기반 Image-iT Fixation/Permeabilization Kit를 사용했습니다. A의 메탄올 기반 고정은 액틴 세포 골격의 단편화 및 세포의 파괴를 초래합니다. Image-iT Fixation/Permeabilization Kit는 대부분의 세포 유형에 대해 최적의 고정 조건을 제공합니다.
| 주요 제품 | 설명 | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|
| Image-iT Fixation/Permeabilization Kit |
| R37602 |
| BlockAid Blocking Solution |
| B10710 |
1.1 배양 조건 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
좋은 품질의 이미지를 얻기 위한 첫 번째 단계는 조직 준비입니다. 배양 세포의 경우 세포는 건강 상태와 형태가 양호하고, 컨플루언시(confluency)가 우수해야 합니다. 건강한 세포란 건강한 데이터를 의미합니다.
좋은 품질의 이미지를 얻기 위한 첫 번째 단계는 조직 준비입니다. 배양 세포의 경우 세포는 건강 상태와 형태가 양호하고, 컨플루언시(confluency)가 우수해야 합니다. 건강한 세포란 건강한 데이터를 의미합니다.
1.2 고정화-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
조직 준비의 다음 단계는 고정화입니다. 고정화란 특정 생리학적 상태에서 세포를 죽이고 보존하는 화학적 수단을 의미하며 대부분의 경우에서는 형태를 보존하는 방법을 일컫습니다. 올바른 고정화란 대상의 보존을 의미합니다.
1.3 투과화-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
다음 단계는 세포내 구획을 개방하는 데 있어 중요한 세포의 투과화입니다.
1.4 차단-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
투과화 이후의 단계는 차단이며 여기에는 다양한 차단 기술이 있습니다. 단백질 차단은 특정 항체 결합과 같습니다. 염료(dye) 전하 차단은 비특이적 결합을 감소시킵니다.
1.5 자가형광-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
세포 준비의 마지막 단계는 자가형광(autofluorescence)입니다. 세포와 조직은 특정 신호를 혼동하고 신호 대 백그라운드 신호를 낮출 수 있는 특정 수준의 자가형광을 가질 수 있습니다. 자가형광을 극복할 수 있다는 것은 더 높은 감도를 나타냄을 의미합니다.
2 단계. 라벨(Label)
세포 기관 선택적 염료(dye), 염색 및 1차 항체를 포함하여 관심 있는 세포 구조 및 단백질을 표적으로 합니다.
별도의 형광 색으로 다양한 표적을 라벨링(Labeling) 할 수 있어 동일한 시료에서 세포 내 서로 다른 구조나 단백질을 시각화할 수 있습니다. 표적을 표시하는 방법에는 형광 염료(dye), 이뮤노라벨링(immunolabeling) 및 형광 융합 단백질이 있으며, 이 모든 것들은 세포 내에서 구조와 분자를 선택적으로 표시하는 수단으로 이미지를 쉽게 확인할 수 있게 해 줍니다.
세포 생물학에 사용되는 많은 형광 도구는 본질적으로 형광단(fluorophore)이며 이는 다양한 방법으로 수정되거나 다양한 분자에 결합하여 특정 기능을 제공하거나 특정 세포 기관 또는 단백질에 결합할 수 있습니다. 화학적 변형을 통해 단일 형광단(fluorophore)을 다양한 형태와 각각 다른 특이성을 가지도록 생산할 수 있습니다. 예를 들어, 녹색-형광 Invitrogen Alexa Fluor 488 dye 분자는 액틴 필라멘트를 표적으로 하도록 변형할 수 있고, 당사의 라벨링(Labeling) 키트를 사용하여 이뮤노라벨링(immunolabeling)에 사용하기 위해 IgG에 부착하거나, 혹은 전체 세포 염색제로 작용하도록 사용할 수도 있습니다.
제품 특징
Invitrogen 포트폴리오에는 51,000개 이상의 고품질 1차 항체가 있으며 이를 통해 85% 이상의 프로테옴(proteome)에 특이성을 제공합니다. 이러한 항체 중 일부는 Invitrogen Alexa Fluor dye를 비롯한 광범위한 형광 마커와 라벨(Label)에 직접 부착됩니다.
다수의 라벨링(Labeling) 작업을 수행하기 위해 단일 형광단(fluorophore) 수정 가능. 액틴(A), 튜뷸린(B)과 같은 세포 구조 구성요소와 전체 세포 염색을 위한 염 형태(C)와 같이 라벨링(Labeling)을 위해 기능화된 형태 포함.
배양된 세포는 Invitrogen Image-iT Fixation/Permeabilization Kit를 사용하여 염색할 수 있도록 준비되었으며 Invitrogen BlockAid Blocking Solution으로 처리되었습니다. 시료는 미토콘드리아를 인식하는 1차 항체로 라벨링(Labeling)되었고, Alexa Fluor 750 dye–conjugated secondary antibody(purple), Invitrogen NucBlue cell stain(blue), Invitrogen ActinGreen 488 ReadyProbes Reagent (green)으로 처리되었습니다. 이미지는 Invitrogen EVOS FL Auto Imaging System에서 캡처되었습니다.
2.1 1차 항체 선택 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
준비 후, 논문 품질의 이미지를 위한 두 번째 단계는 시료를 라벨링(Labeling)하는 것으로 여기에는 일반적으로 특정 관심 표적에 대한 1차 항체를 포함합니다.
2.2 1차 항체 프로토콜 최적화 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
모든 1차 항체는 별도로 최적화되어야 합니다. 사용 가능한 프로토콜은 여러 가지가 있으며, 모든 항체가 조금씩 다르기 때문에 “한 가지 크기로 모든 것을 맞추려는” 접근 방식으로는 좋은 결과를 가져올 수 없다는 것을 이해하는 것이 중요합니다.
3 단계. 검출(Detect)
형광 신호를 관찰하기 위한 미세 조정
복잡한 생물학적 군집을 검출(Detect)하려면 형광 신호의 선명도를 극대화하고 백그라운드 노이즈로부터 신호를 분리해야 합니다. 표준 면역형광 라벨링(Labeling)으로는 최상의 신호 대 노이즈 가시성을 얻기가 매우 어렵습니다. 논문 품질의 이미지를 좋은 수준, 우수한 수준으로 생성하려면 시료의 신호를 피크 특이성, 선명도 및 증폭에 대해 미세 조정해야 합니다.
Image-iT Fixation/Permeabilization Kit의 시약을 사용하여 처리한 고정화 및 투과화된 HeLa 세포를 anti-tubulin primary antibody 및 Alexa Fluor 488 goat anti–mouse IgG (H+L) secondary antibody와 함께 인큐베이션했습니다. 그런 다음, 세포를 anti–ATP synthase subunit IF1 antibody와 함께 배양하고 Alexa Fluor 594 Tyramide SuperBoost Kit (goat anti–mouse IgG and Alexa Fluor 594 tyramide)의 시약으로 라벨링(Labeling) 했습니다. 핵은 NucBlue Fixed Cell ReadyProbes Reagent로 라벨링(Labeling) 했습니다. 공초점 현미경으로 이미지를 획득했습니다.
중간 내지 높은 존재량의 단백질 표적
2차 항체는 표적 항원을 간접적으로 검출(detect)하는 데 사용됩니다. 1차 항체는 표적에 직접 결합하지만 2차 항체는 1차 항체를 표적 바이오분자에 대한 가교로 사용하여 간접적으로 결합합니다. 여러 개의 2차 항체 분자가 단일 1차 항체 분자에 결합할 수 있으므로 이 방법은 신호를 증폭하고 감도를 높여 검출(detect)을 극대화하는 데 사용됩니다.
2차 항체에 대해 알아보기
2차 검출(detect)의 경우, 1차 항체(주황색 및 노란색)는 각 에피토프와 결합하고, 형광 라벨링(Labeling)된 2차 항체(자주색 및 파란색)는 해당 1차 항체에 대한 특이성을 가지고 결합합니다.
중간 내지 낮은 존재량의 단백질 표적
Streptavidin 콘주게이트는 표적을 라벨링(labeling)하고 신호를 증가시키는 형광단(fluorophore) 수를 늘릴 수 있습니다. Streptavidin 기반 증폭 기술은 1차 및 2차 항체의 검출(detect) 감도를 개선하기 위해 형광 이미징에 광범위하게 사용됩니다.
이미징에 사용되는 Streptavidin 신호 증폭에 대해 자세히 알아보기
fluorophore–streptavidin을 사용하여 라벨링(labeling)된 항체 콘주게이트에 의해 라벨링(labeling)된 항체는 더 많은 형광단(fluorophore)이 각 항체 분자에 결합하여 신호를 증폭시킬 수 있기 때문에 라벨링(labeling) 실험에서 낮은 신호를 증폭할 수 있습니다.
낮은 존재량의 단백질 표적
기존의 방법으로는 검출(detect)할 수 없는 낮은 존재량의 단백질 표적의 경우, 티라미드 신호 증폭(TSA, PerkinElmer)으로 분해능 저하 없이 감도 높은 검출(detect) 성능을 제공할 수 있습니다. TSA 기술은 과산화수소가 존재하는 상태에서 반응성 염료(dye)를 방출하여 표적을 백그라운드에서 선명하고 명확하게 잡아내는 효소를 사용합니다.
TSA를 사용하여 존재량이 낮은 표적을 이미징하는 방법에 대해 자세히 알아보기
확대하려면 이미지를 클릭하십시오.
티라미드 신호 증폭에서는 에피토프를 중심으로 형광 라벨(label)의 고밀도 침적을 국소적으로 발생시켜 감도 높은 검출(detect)이 가능하며 분해능을 손상시키지 않고 우수한 감도를 제공합니다.
제품 특징
당사의 Alexa Fluor Plus secondary antibodies는 특허 받은 plus 염료(dye) 화학 기술을 사용하여 Alexa Fluor 제형에 비해 최대 4.2배 더 높은 신호 대 노이즈 비율을 제공하며, 존재량이 낮은 표적을 높은 감도로 검출(detect)할 수 있습니다.
Invitrogen Tyramide SuperBoost kits는 Invitrogen의 SuperBoost 기술을 사용하여 존재량이 적은 단백질 표적에 대해 가장 감도가 뛰어난 형광 이미징 검출(detect) 방법을 제공합니다. 표준 면역화학(ICC), 면역조직화학(IHC) 및 제자리 부합법(ISH)에 비해 10~200배의 감도를 제공하는 SuperBoost 키트는 고해상도 이미징에 필요한 우수한 신호 증폭, 선명도 및 명확성을 제공하도록 설계되었습니다. Alexa Fluor dye의 밝기와 신뢰할 수 있는 poly-HRP 매개 티라미드 신호 증폭을 결합한 SuperBoost 시약은 기타 공급업체의 시약을 비롯한 표준 처리 시약보다 일반적으로 2~10배 높은 감도를 생성합니다.
3.1 2차 항체 선택 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
논문 품질의 이미지를 만드는 5 단계 중 3 단계는 라벨(label)을 감지하는 것입니다. 즉, 2차 항체로 검출(detect)하는 것으로, 예를 들면 증폭 기술 및 사용할 대조군을 결정하는 것입니다. 사용할 수 있는 옵션에 대해 설명합니다.
3.2 2차 항체 최적화 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
2차 항체 검출(detect) 프로토콜도 사용되는 각 1차 항체에 맞게 최적화되어야 합니다.
3.3 증폭 기술 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
표준 2차 감지 체계를 사용할 때 신호가 충분히 강하지 않으면 증폭 기술을 사용하여 신호를 증가시킬 수 있습니다. 이는 저발현 항원 또는 시료의 희귀 세포 검출(detect)에 특히 중요합니다.
3.4 대조군-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
연구자들은 비특이적 결합 또는 비특이적 신호의 가능성을 배제하기 위해 필요한 모든 대조군을 수행해야 합니다. 대조군 유형에 대해 설명합니다. 적절한 대조군을 통해 최종 결과에 대한 확신을 높일 수 있습니다.
3.5 염료(dye) 선택 및 특수한 문제 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
가시광선, 원적외선 및 적외선 파장에 걸쳐 다양한 염료(dye)가 존재합니다. 실험에 적합한 염료(dye)를 선택하기 위한 고려 사항을 설명합니다.
4 단계. 보호
광표백으로부터 형광 신호를 보호하고 최적의 분해능으로 이미지 품질을 개선하세요.
형광단(fluorophore)은 고품질의 세포 이미징에 적합하지만 광표백, 광화학적 저하 및 형광 신호의 페이딩 현상이 불가피하게 발생합니다. 광민감성이 감소하면 데이터가 왜곡되어 잘못된 결과가 발생할 수 있습니다. Antifade mountants는 형광단(fluorophore)의 광안정성을 보호하고 수 주에서 수 개월 동안 이미지를 온전한 상태로 유지하도록 설계되었습니다.
제품 특징
Invitrogen ProLong Glass antifade mountants는 전체 가시광선 및 근적외선 스펙트럼에 걸쳐 매우 우수한 광퇴색 방지 기능을 제공하도록 설계되었습니다. 굴절률 1.52의 ProLong Glass mountant는 밝은 고해상도 Z-스택, 3D 및 2D 이미지를 위해 0.1µm~150µm 범위의 세포 또는 조직 시료에서 여러가지 형광 염료(dye)와 함께 사용할 수 있습니다. 또한 이미지 왜곡 감소로 인해 oil-immersion 렌즈 및 공초점 현미경에서도 특히 잘 작동합니다.
고정 세포에 사용되는 ProLong antifade mountants의 주요 이점은 다음과 같습니다.
- 장기간 보관한 후에도 스펙트럼 전반에 걸쳐 photobleaching 억제
- 스펙트럼 전체에 걸쳐 낮은 백그라운드
- Hard-setting mountants
- DAPI의 유무에 관계없이 사용 가능
- 바로 사용 가능한 벤치탑 제형
- 필요에 따른 굴절률 선택: ProLong Glass 시약의 경우 굴절률 1.52, ProLong Diamond 및 ProLong Gold 시약의 경우 굴절률 1.47
ProLong antifade mountant를 사용하여 향상된 광표백 저항성을 보여주는 60초 타임랩스. 고정 HeLa 세포는 fluorescein phalloidin으로 라벨링(labeling) 되고 ProLong Glass 시약, ProLong Diamond 시약, ProLong Gold 시약 또는 50% PBS/glycerol으로 봉입되었습니다. 표준 100-watt Hg-arc 램프의 연속 조명과 함께 20x 대물렌즈를 사용하여 12초 간격으로 이미지를 획득하였습니다.
4.1 봉입제 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
올바른 mountant를 사용하면 실험에 영향을 미칠 수 있습니다. 실험 설정에 적합한 mountant 유형을 선택해야 합니다.
4.2 Photobleaching and antifades –고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
광표백(photobleaching)이란 무엇이며 이로 인해 시료가 손상되지 않도록 어떻게 방지할 수 있습니까? antifades 옵션에 대해 설명합니다.
5 단계. 이미지
명확성 및 선명도를 최대화하여 이미징 결과를 캡처합니다
이 단계를 최적화하여 연구 결과를 최대한 명확하고 선명하게 캡처할 수 있습니다. 오늘날과 같이 경쟁이 심한 과학 분야에서 논문 품질의 이미지 생성은 여러분의 성공에 필수적입니다. 최고 품질의 이미지를 캡처하려면 다음을 포함한 최고급 이미징 구성 요소를 갖춘 이미징 플랫폼이 필요합니다.
- 고해상도 이미지를 캡쳐하기 위한 고품질의 카메라 및 광학 장치
- 뛰어난 신호 대 노이즈 비율 생성을 위한 LED 조명
- 논문 품질의 이미지를 위한 사용이 쉬운 이미지 캡쳐 및 처리 소프트웨어
- 광범위한 정량 및 통계 분석을 위한 이미지 분석 기능
제품 특징
실험 요구에 따라 조정할 수 있는 사용이 간편한 모듈식 시스템을 선택하십시오. 당사는 다양한 LED 라이트 큐브, vessel holders 및 대물렌즈를 통해 맞춤 구성이 가능한 이미징 시스템을 제공합니다. 14개 이상의 Invitrogen EVOS LED 라이트 큐브 중에서 선택할 수 있으며, 광범위한 형광 excitation 및 emission을 지원합니다.
시료 처리량이 증가하면서 더 많은 정량 데이터를 획득할 필요가 있습니까? CellInsight CX5 High Content Analysis 플랫폼은 동시 데이터 분석을 통한 자동 이미지 캡처 기능을 제공하여 5분 이내에 최대 50만개의 표현형 세포 측정값을 분석할 수 있습니다.
아래 이미징 시스템을 비교하여 가장 적합한 시스템을 찾아 보십시오.
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신속한 형광 시각화에 적합
| 기본 투과광 - 디지털 도립 시스템 | 고급 투과광 디지털 도립 시스템 | 기본 형광 시스템 | 고급 형광 시스템 | 완전 자동 형광 시스템 |
|---|---|---|---|---|
 EVOS XL Core 세포 배양 및 일상적인 세포 유지 관리에 적합함 |  EVOS XL 더 고급 colormetric 어세이에 적합함 |  EVOS FLoid 신속한 형광 시각화에 적합함 |
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High-Content 분석 세포 이미징 시스템 전체 제품군에 대해 알아보기
| 5채널 LED 시스템 | 7채널 LED 공초점 시스템 | 7채널 레이저 공초점 시스템 |
|---|---|---|
 CellInsight CX5 스케일을 증가시키기 위해, 소형 및 경제적인 이미징 촬영 및 분석 시스템을 찾고 있는 실험실에 적합함 시약 보기 |  CellInsight CX7 추가적인 이미징 모드를 찾고 있는 실험실에 적합함 시약 보기 |  CellInsight CX7 LZR 감도와 속도에서 고급 성능을 필요로 하는 실험실에 적합함 시약 보기 |
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|---|---|---|---|---|
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5.1 이미징 플랫폼-하드웨어–고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
프로세스의 다섯 번째 단계는 실제 이미징입니다. 최고 품질의 이미지를 캡처하려면 최고 품질의 이미징 기능이 있는 이미징 플랫폼이 필요합니다. 여기에서는 최상의 이미지를 얻기 위해 고려할 사항에 대해 검토합니다.
5.2 이미징 플랫폼-소프트웨어–고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
현미경에서 이미지를 획득하려면 일반적으로 이미지를 획득하고 서로 다른 색상을 하나로 결합하는 데 도움이 되는 몇 가지 유형의 이미징 소프트웨어가 필요합니다. 논문 품질의 이미지를 얻기 위해서는 몇 가지 고려해야 할 중요한 측면이 있습니다.
5.3 EVOS FL Auto 2.0을 사용한 이미지 캡처–고정 세포 이미징 사용: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
여기에서 EVOS FL Auto 2.0 이미징 시스템을 사용하여 이미지를 캡처할 수 있는 이점에 대해 설명합니다.
5.4 Celleste 소프트웨어를 사용한 이미지 분석–고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
Celleste 소프트웨어의 기능을 검토하고 다양한 소프트웨어 프로그램에서 이미지 처리를 하기 위한 고려 사항을 설명합니다.
5.5 윤리적 고려 사항–고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
윤리적 이미징이란 신뢰할 수 있는 데이터와 출판 가능한 수준의 데이터를 의미합니다. 데이터 무결성을 유지하기 위해 시료과 데이터를 처리하는 방법에 대해 설명합니다.
1 단계. 준비
형광 라벨링(Labeling)을 위해 세포를 준비합니다.
최적의 이미징 품질을 얻기 위해 관심있는 단백질과 세포 구조에 대한 연구를 설정하고 이외의 다른 것들은 이미지에서 배제합니다. 고정화 및 투과화를 통해 세포 구조, 단백질 및 핵산을 제자리에 고정시켜 세포 시료에 라벨링(Labeling)을 하기 위한 준비를 한 다음, 항체 및 형광 염색제를 세포 내부에 스며들게 하여 관심 대상인 표적을 라벨링(Labeling) 할 수 있습니다.
고정화를 통해 세포 구조를 제자리에 고정합니다.
투과화는 세포막의 지질을 제거하여 라벨링(Labeling) 및 검출(Detect) 시약을 세포 내부에 도달할 수 있도록 합니다.
단백질 기반의 차단제는 비특이적 염색을 줄이는 기능을 합니다. 항체는 차단 단백질을 대체하여 해당 표적과의 고친화성 상호작용을 형성하고, 나머지 차단 단백질은 시료 내 다른 곳에서 저친화성 항체 상호작용을 방지합니다.
고정화 및 투과화 후 U2OS 세포를 NucBlue Live Cell Stain 및 ActinGreen 488 ReadyProbes 시약으로 염색했습니다. A에서는 고정을 위해 메탄올 기반 용액을 사용하고, B에서는 포름알데히드 기반 Image-iT Fixation/Permeabilization Kit를 사용했습니다. A의 메탄올 기반 고정은 액틴 세포 골격의 단편화 및 세포의 파괴를 초래합니다. Image-iT Fixation/Permeabilization Kit는 대부분의 세포 유형에 대해 최적의 고정 조건을 제공합니다.
| 주요 제품 | 설명 | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|
| Image-iT Fixation/Permeabilization Kit |
| R37602 |
| BlockAid Blocking Solution |
| B10710 |
1.1 배양 조건 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
좋은 품질의 이미지를 얻기 위한 첫 번째 단계는 조직 준비입니다. 배양 세포의 경우 세포는 건강 상태와 형태가 양호하고, 컨플루언시(confluency)가 우수해야 합니다. 건강한 세포란 건강한 데이터를 의미합니다.
좋은 품질의 이미지를 얻기 위한 첫 번째 단계는 조직 준비입니다. 배양 세포의 경우 세포는 건강 상태와 형태가 양호하고, 컨플루언시(confluency)가 우수해야 합니다. 건강한 세포란 건강한 데이터를 의미합니다.
1.2 고정화-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
조직 준비의 다음 단계는 고정화입니다. 고정화란 특정 생리학적 상태에서 세포를 죽이고 보존하는 화학적 수단을 의미하며 대부분의 경우에서는 형태를 보존하는 방법을 일컫습니다. 올바른 고정화란 대상의 보존을 의미합니다.
1.3 투과화-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
다음 단계는 세포내 구획을 개방하는 데 있어 중요한 세포의 투과화입니다.
1.4 차단-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
투과화 이후의 단계는 차단이며 여기에는 다양한 차단 기술이 있습니다. 단백질 차단은 특정 항체 결합과 같습니다. 염료(dye) 전하 차단은 비특이적 결합을 감소시킵니다.
1.5 자가형광-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
세포 준비의 마지막 단계는 자가형광(autofluorescence)입니다. 세포와 조직은 특정 신호를 혼동하고 신호 대 백그라운드 신호를 낮출 수 있는 특정 수준의 자가형광을 가질 수 있습니다. 자가형광을 극복할 수 있다는 것은 더 높은 감도를 나타냄을 의미합니다.
2 단계. 라벨(Label)
세포 기관 선택적 염료(dye), 염색 및 1차 항체를 포함하여 관심 있는 세포 구조 및 단백질을 표적으로 합니다.
별도의 형광 색으로 다양한 표적을 라벨링(Labeling) 할 수 있어 동일한 시료에서 세포 내 서로 다른 구조나 단백질을 시각화할 수 있습니다. 표적을 표시하는 방법에는 형광 염료(dye), 이뮤노라벨링(immunolabeling) 및 형광 융합 단백질이 있으며, 이 모든 것들은 세포 내에서 구조와 분자를 선택적으로 표시하는 수단으로 이미지를 쉽게 확인할 수 있게 해 줍니다.
세포 생물학에 사용되는 많은 형광 도구는 본질적으로 형광단(fluorophore)이며 이는 다양한 방법으로 수정되거나 다양한 분자에 결합하여 특정 기능을 제공하거나 특정 세포 기관 또는 단백질에 결합할 수 있습니다. 화학적 변형을 통해 단일 형광단(fluorophore)을 다양한 형태와 각각 다른 특이성을 가지도록 생산할 수 있습니다. 예를 들어, 녹색-형광 Invitrogen Alexa Fluor 488 dye 분자는 액틴 필라멘트를 표적으로 하도록 변형할 수 있고, 당사의 라벨링(Labeling) 키트를 사용하여 이뮤노라벨링(immunolabeling)에 사용하기 위해 IgG에 부착하거나, 혹은 전체 세포 염색제로 작용하도록 사용할 수도 있습니다.
제품 특징
Invitrogen 포트폴리오에는 51,000개 이상의 고품질 1차 항체가 있으며 이를 통해 85% 이상의 프로테옴(proteome)에 특이성을 제공합니다. 이러한 항체 중 일부는 Invitrogen Alexa Fluor dye를 비롯한 광범위한 형광 마커와 라벨(Label)에 직접 부착됩니다.
다수의 라벨링(Labeling) 작업을 수행하기 위해 단일 형광단(fluorophore) 수정 가능. 액틴(A), 튜뷸린(B)과 같은 세포 구조 구성요소와 전체 세포 염색을 위한 염 형태(C)와 같이 라벨링(Labeling)을 위해 기능화된 형태 포함.
배양된 세포는 Invitrogen Image-iT Fixation/Permeabilization Kit를 사용하여 염색할 수 있도록 준비되었으며 Invitrogen BlockAid Blocking Solution으로 처리되었습니다. 시료는 미토콘드리아를 인식하는 1차 항체로 라벨링(Labeling)되었고, Alexa Fluor 750 dye–conjugated secondary antibody(purple), Invitrogen NucBlue cell stain(blue), Invitrogen ActinGreen 488 ReadyProbes Reagent (green)으로 처리되었습니다. 이미지는 Invitrogen EVOS FL Auto Imaging System에서 캡처되었습니다.
2.1 1차 항체 선택 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
준비 후, 논문 품질의 이미지를 위한 두 번째 단계는 시료를 라벨링(Labeling)하는 것으로 여기에는 일반적으로 특정 관심 표적에 대한 1차 항체를 포함합니다.
2.2 1차 항체 프로토콜 최적화 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
모든 1차 항체는 별도로 최적화되어야 합니다. 사용 가능한 프로토콜은 여러 가지가 있으며, 모든 항체가 조금씩 다르기 때문에 “한 가지 크기로 모든 것을 맞추려는” 접근 방식으로는 좋은 결과를 가져올 수 없다는 것을 이해하는 것이 중요합니다.
3 단계. 검출(Detect)
형광 신호를 관찰하기 위한 미세 조정
복잡한 생물학적 군집을 검출(Detect)하려면 형광 신호의 선명도를 극대화하고 백그라운드 노이즈로부터 신호를 분리해야 합니다. 표준 면역형광 라벨링(Labeling)으로는 최상의 신호 대 노이즈 가시성을 얻기가 매우 어렵습니다. 논문 품질의 이미지를 좋은 수준, 우수한 수준으로 생성하려면 시료의 신호를 피크 특이성, 선명도 및 증폭에 대해 미세 조정해야 합니다.
Image-iT Fixation/Permeabilization Kit의 시약을 사용하여 처리한 고정화 및 투과화된 HeLa 세포를 anti-tubulin primary antibody 및 Alexa Fluor 488 goat anti–mouse IgG (H+L) secondary antibody와 함께 인큐베이션했습니다. 그런 다음, 세포를 anti–ATP synthase subunit IF1 antibody와 함께 배양하고 Alexa Fluor 594 Tyramide SuperBoost Kit (goat anti–mouse IgG and Alexa Fluor 594 tyramide)의 시약으로 라벨링(Labeling) 했습니다. 핵은 NucBlue Fixed Cell ReadyProbes Reagent로 라벨링(Labeling) 했습니다. 공초점 현미경으로 이미지를 획득했습니다.
중간 내지 높은 존재량의 단백질 표적
2차 항체는 표적 항원을 간접적으로 검출(detect)하는 데 사용됩니다. 1차 항체는 표적에 직접 결합하지만 2차 항체는 1차 항체를 표적 바이오분자에 대한 가교로 사용하여 간접적으로 결합합니다. 여러 개의 2차 항체 분자가 단일 1차 항체 분자에 결합할 수 있으므로 이 방법은 신호를 증폭하고 감도를 높여 검출(detect)을 극대화하는 데 사용됩니다.
2차 항체에 대해 알아보기
2차 검출(detect)의 경우, 1차 항체(주황색 및 노란색)는 각 에피토프와 결합하고, 형광 라벨링(Labeling)된 2차 항체(자주색 및 파란색)는 해당 1차 항체에 대한 특이성을 가지고 결합합니다.
중간 내지 낮은 존재량의 단백질 표적
Streptavidin 콘주게이트는 표적을 라벨링(labeling)하고 신호를 증가시키는 형광단(fluorophore) 수를 늘릴 수 있습니다. Streptavidin 기반 증폭 기술은 1차 및 2차 항체의 검출(detect) 감도를 개선하기 위해 형광 이미징에 광범위하게 사용됩니다.
이미징에 사용되는 Streptavidin 신호 증폭에 대해 자세히 알아보기
fluorophore–streptavidin을 사용하여 라벨링(labeling)된 항체 콘주게이트에 의해 라벨링(labeling)된 항체는 더 많은 형광단(fluorophore)이 각 항체 분자에 결합하여 신호를 증폭시킬 수 있기 때문에 라벨링(labeling) 실험에서 낮은 신호를 증폭할 수 있습니다.
낮은 존재량의 단백질 표적
기존의 방법으로는 검출(detect)할 수 없는 낮은 존재량의 단백질 표적의 경우, 티라미드 신호 증폭(TSA, PerkinElmer)으로 분해능 저하 없이 감도 높은 검출(detect) 성능을 제공할 수 있습니다. TSA 기술은 과산화수소가 존재하는 상태에서 반응성 염료(dye)를 방출하여 표적을 백그라운드에서 선명하고 명확하게 잡아내는 효소를 사용합니다.
TSA를 사용하여 존재량이 낮은 표적을 이미징하는 방법에 대해 자세히 알아보기
확대하려면 이미지를 클릭하십시오.
티라미드 신호 증폭에서는 에피토프를 중심으로 형광 라벨(label)의 고밀도 침적을 국소적으로 발생시켜 감도 높은 검출(detect)이 가능하며 분해능을 손상시키지 않고 우수한 감도를 제공합니다.
제품 특징
당사의 Alexa Fluor Plus secondary antibodies는 특허 받은 plus 염료(dye) 화학 기술을 사용하여 Alexa Fluor 제형에 비해 최대 4.2배 더 높은 신호 대 노이즈 비율을 제공하며, 존재량이 낮은 표적을 높은 감도로 검출(detect)할 수 있습니다.
Invitrogen Tyramide SuperBoost kits는 Invitrogen의 SuperBoost 기술을 사용하여 존재량이 적은 단백질 표적에 대해 가장 감도가 뛰어난 형광 이미징 검출(detect) 방법을 제공합니다. 표준 면역화학(ICC), 면역조직화학(IHC) 및 제자리 부합법(ISH)에 비해 10~200배의 감도를 제공하는 SuperBoost 키트는 고해상도 이미징에 필요한 우수한 신호 증폭, 선명도 및 명확성을 제공하도록 설계되었습니다. Alexa Fluor dye의 밝기와 신뢰할 수 있는 poly-HRP 매개 티라미드 신호 증폭을 결합한 SuperBoost 시약은 기타 공급업체의 시약을 비롯한 표준 처리 시약보다 일반적으로 2~10배 높은 감도를 생성합니다.
3.1 2차 항체 선택 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
논문 품질의 이미지를 만드는 5 단계 중 3 단계는 라벨(label)을 감지하는 것입니다. 즉, 2차 항체로 검출(detect)하는 것으로, 예를 들면 증폭 기술 및 사용할 대조군을 결정하는 것입니다. 사용할 수 있는 옵션에 대해 설명합니다.
3.2 2차 항체 최적화 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
2차 항체 검출(detect) 프로토콜도 사용되는 각 1차 항체에 맞게 최적화되어야 합니다.
3.3 증폭 기술 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
표준 2차 감지 체계를 사용할 때 신호가 충분히 강하지 않으면 증폭 기술을 사용하여 신호를 증가시킬 수 있습니다. 이는 저발현 항원 또는 시료의 희귀 세포 검출(detect)에 특히 중요합니다.
3.4 대조군-고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
연구자들은 비특이적 결합 또는 비특이적 신호의 가능성을 배제하기 위해 필요한 모든 대조군을 수행해야 합니다. 대조군 유형에 대해 설명합니다. 적절한 대조군을 통해 최종 결과에 대한 확신을 높일 수 있습니다.
3.5 염료(dye) 선택 및 특수한 문제 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
가시광선, 원적외선 및 적외선 파장에 걸쳐 다양한 염료(dye)가 존재합니다. 실험에 적합한 염료(dye)를 선택하기 위한 고려 사항을 설명합니다.
4 단계. 보호
광표백으로부터 형광 신호를 보호하고 최적의 분해능으로 이미지 품질을 개선하세요.
형광단(fluorophore)은 고품질의 세포 이미징에 적합하지만 광표백, 광화학적 저하 및 형광 신호의 페이딩 현상이 불가피하게 발생합니다. 광민감성이 감소하면 데이터가 왜곡되어 잘못된 결과가 발생할 수 있습니다. Antifade mountants는 형광단(fluorophore)의 광안정성을 보호하고 수 주에서 수 개월 동안 이미지를 온전한 상태로 유지하도록 설계되었습니다.
제품 특징
Invitrogen ProLong Glass antifade mountants는 전체 가시광선 및 근적외선 스펙트럼에 걸쳐 매우 우수한 광퇴색 방지 기능을 제공하도록 설계되었습니다. 굴절률 1.52의 ProLong Glass mountant는 밝은 고해상도 Z-스택, 3D 및 2D 이미지를 위해 0.1µm~150µm 범위의 세포 또는 조직 시료에서 여러가지 형광 염료(dye)와 함께 사용할 수 있습니다. 또한 이미지 왜곡 감소로 인해 oil-immersion 렌즈 및 공초점 현미경에서도 특히 잘 작동합니다.
고정 세포에 사용되는 ProLong antifade mountants의 주요 이점은 다음과 같습니다.
- 장기간 보관한 후에도 스펙트럼 전반에 걸쳐 photobleaching 억제
- 스펙트럼 전체에 걸쳐 낮은 백그라운드
- Hard-setting mountants
- DAPI의 유무에 관계없이 사용 가능
- 바로 사용 가능한 벤치탑 제형
- 필요에 따른 굴절률 선택: ProLong Glass 시약의 경우 굴절률 1.52, ProLong Diamond 및 ProLong Gold 시약의 경우 굴절률 1.47
ProLong antifade mountant를 사용하여 향상된 광표백 저항성을 보여주는 60초 타임랩스. 고정 HeLa 세포는 fluorescein phalloidin으로 라벨링(labeling) 되고 ProLong Glass 시약, ProLong Diamond 시약, ProLong Gold 시약 또는 50% PBS/glycerol으로 봉입되었습니다. 표준 100-watt Hg-arc 램프의 연속 조명과 함께 20x 대물렌즈를 사용하여 12초 간격으로 이미지를 획득하였습니다.
4.1 봉입제 – 고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
올바른 mountant를 사용하면 실험에 영향을 미칠 수 있습니다. 실험 설정에 적합한 mountant 유형을 선택해야 합니다.
4.2 Photobleaching and antifades –고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
광표백(photobleaching)이란 무엇이며 이로 인해 시료가 손상되지 않도록 어떻게 방지할 수 있습니까? antifades 옵션에 대해 설명합니다.
5 단계. 이미지
명확성 및 선명도를 최대화하여 이미징 결과를 캡처합니다
이 단계를 최적화하여 연구 결과를 최대한 명확하고 선명하게 캡처할 수 있습니다. 오늘날과 같이 경쟁이 심한 과학 분야에서 논문 품질의 이미지 생성은 여러분의 성공에 필수적입니다. 최고 품질의 이미지를 캡처하려면 다음을 포함한 최고급 이미징 구성 요소를 갖춘 이미징 플랫폼이 필요합니다.
- 고해상도 이미지를 캡쳐하기 위한 고품질의 카메라 및 광학 장치
- 뛰어난 신호 대 노이즈 비율 생성을 위한 LED 조명
- 논문 품질의 이미지를 위한 사용이 쉬운 이미지 캡쳐 및 처리 소프트웨어
- 광범위한 정량 및 통계 분석을 위한 이미지 분석 기능
제품 특징
실험 요구에 따라 조정할 수 있는 사용이 간편한 모듈식 시스템을 선택하십시오. 당사는 다양한 LED 라이트 큐브, vessel holders 및 대물렌즈를 통해 맞춤 구성이 가능한 이미징 시스템을 제공합니다. 14개 이상의 Invitrogen EVOS LED 라이트 큐브 중에서 선택할 수 있으며, 광범위한 형광 excitation 및 emission을 지원합니다.
시료 처리량이 증가하면서 더 많은 정량 데이터를 획득할 필요가 있습니까? CellInsight CX5 High Content Analysis 플랫폼은 동시 데이터 분석을 통한 자동 이미지 캡처 기능을 제공하여 5분 이내에 최대 50만개의 표현형 세포 측정값을 분석할 수 있습니다.
아래 이미징 시스템을 비교하여 가장 적합한 시스템을 찾아 보십시오.
현미경 세포 이미징 시스템 전체 제품군에 대해 알아보기
신속한 형광 시각화에 적합
| 기본 투과광 - 디지털 도립 시스템 | 고급 투과광 디지털 도립 시스템 | 기본 형광 시스템 | 고급 형광 시스템 | 완전 자동 형광 시스템 |
|---|---|---|---|---|
EVOS XL Core 세포 배양 및 일상적인 세포 유지 관리에 적합함 | EVOS XL 더 고급 colormetric 어세이에 적합함 | EVOS FLoid 신속한 형광 시각화에 적합함 |
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| 5채널 LED 시스템 | 7채널 LED 공초점 시스템 | 7채널 레이저 공초점 시스템 |
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EVOS XL Core 세포 배양 및 일상적인 세포 유지 관리에 적합함 | EVOS XL 더 고급 colormetric 어세이에 적합함 | EVOS FLoid 신속한 형광 시각화에 적합함 |
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| 5채널 LED 시스템 | 7채널 LED 공초점 시스템 | 7채널 레이저 공초점 시스템 |
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5.1 이미징 플랫폼-하드웨어–고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
프로세스의 다섯 번째 단계는 실제 이미징입니다. 최고 품질의 이미지를 캡처하려면 최고 품질의 이미징 기능이 있는 이미징 플랫폼이 필요합니다. 여기에서는 최상의 이미지를 얻기 위해 고려할 사항에 대해 검토합니다.
5.2 이미징 플랫폼-소프트웨어–고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
현미경에서 이미지를 획득하려면 일반적으로 이미지를 획득하고 서로 다른 색상을 하나로 결합하는 데 도움이 되는 몇 가지 유형의 이미징 소프트웨어가 필요합니다. 논문 품질의 이미지를 얻기 위해서는 몇 가지 고려해야 할 중요한 측면이 있습니다.
5.3 EVOS FL Auto 2.0을 사용한 이미지 캡처–고정 세포 이미징 사용: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
여기에서 EVOS FL Auto 2.0 이미징 시스템을 사용하여 이미지를 캡처할 수 있는 이점에 대해 설명합니다.
5.4 Celleste 소프트웨어를 사용한 이미지 분석–고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
Celleste 소프트웨어의 기능을 검토하고 다양한 소프트웨어 프로그램에서 이미지 처리를 하기 위한 고려 사항을 설명합니다.
5.5 윤리적 고려 사항–고정 세포 이미징: 논문 품질의 이미지를 위한 5 단계
윤리적 이미징이란 신뢰할 수 있는 데이터와 출판 가능한 수준의 데이터를 의미합니다. 데이터 무결성을 유지하기 위해 시료과 데이터를 처리하는 방법에 대해 설명합니다.
전 세계 연구자들이 제공한 실제 세포 이미지에서 영감을 받은 30가지의 환상적인 일러스트를 통해 원하는 색상을 연출할 수 있습니다. 기다리지 마십시오! 창의적 과학 표현에 영감을 주는 무료 컬러링북을 다운로드하세요.
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