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순도 및 샘플 보존을 위해 액체가 아닌 비드를 이동시킵니다.
많은 자동 liquid handling system과 정제 기기는 시약을 well의 안과 밖으로 이동시켜 핵산 분리의 여러 단계를 수행합니다. 반면, Thermo Scientifc KingFisher 샘플 정제 시스템은 용액에서 일회용 tip comb과 함께 영구적인 magnetic rod를 사용하여 비드를 수집한 후에 비드를 연속적인 well에 방출합니다. 각각의 well은 다음의 분리 단계를 위한 시약을 포함합니다. 이 매우 효과적인 비드 수집과 이동 방법으로 추출 과정이 깔끔하고, 효율적인 결과를 얻을 수 있으며, 샘플을 보존할 수 있습니다. 간단한 프로세스(bind, wash, elute)를 사용하는 KingFisher 기기는 까다로운 샘플에서도 비드에 결합될 수 있는 모든 타겟 물질의 추출을 자동화할 수 있습니다.
액체 대신 비드를 움직이므로 비타겟 유기 물질 또는 액체 시약으로부터 오염 물질이 well에서 well로 전달되지 않아서 순도가 높아집니다. 또한 샘플 손실을 최소화하고 더 높은 수율을 얻을 수 있습니다. 왜냐면 프로토콜을 최적화할 수 있기 때문에 비드가 타겟 핵산에 부착된 상태로 용액 내에 남아있지 않기 때문입니다.
수동 샘플 준비 및 샘플 손실은 샘플에 불일치를 초래할 수 있으며, 이는 데이터에 특이치 및 더 넓은 오차로 나타납니다. qPCR, NGS, 디지털 PCR 및 mass spectrometry와 같은 첨단 다운스트림 애플리케이션은 이러한 일관성 없는 결과에 매우 민감할 수 있습니다. KingFisher 장비는 사용자 처리 오류를 줄이는 동시에 결과의 재현성을 높입니다. 당사의 데이터는 KingFisher 기기로 처리된 샘플이 서로 다른 실행 및 사용자에 대해 일관된 결과를 제공하는 것을 보여줍니다.
더 빠른 속도, 더 적은 접촉
다양한 애플리케이션에 활용할 수 있습니다
KingFisher 시스템은 다양한 다운스트림 애플리케이션에서 다양한 샘플 유형에 대해 핵산, 단백질 및 세포를 부드럽고 효율적으로 분리 및 정제할 수 있습니다.
다양한 샘플 유형을 처리하는 다양한 화학 물질. KingFisher 시스템은 혈액, 타액, 점액, 해수, 토양, 분변 물질, 생선 비늘과 기타 샘플 유형 등의 까다로운 샘플도 처리할 수 있는 유연성을 제공합니다. KingFisher 시스템은 매우 넓은 범위의 샘플 준비를 처리할 수 있습니다.
서로 다른 샘플 유형 및 애플리케이션에서는 분석물질 추출을 위해 서로 다른 화학 물질이 필요합니다. 선택을 단순화하고 사용을 용이하게 하기 위해, 당사는 각 애플리케이션과 샘플 유형에 대해 순도와 수율을 극대화할 수 있는 최적화된 비드, 완충액, 프로토콜을 포함하는 키트 및 솔루션을 개발했습니다. 키트, 시약 및 프로토콜 섹션에는 이러한 애플리케이션 및 키트에 대한 세부 정보가 포함되어 있지만 몇 가지 주요 사항이 있습니다.
최적화된 핵산 추출을 위한 MagMAX kit KingFisher 시스템을 사용하여 DNA 및 RNA를 자동으로 추출하는 데 있어 가장 많이 선택하는 시약이 Applied Biosystems MagMAX kit입니다. 예를 들어 MagMAX Viral/Pathogen Nucleic Acid Isolation Kit는 면봉 또는 기타 샘플 유형에서 RNA를 추출하여 정제하는 데 사용할 수 있습니다. 기타 인기있는 MagMAX kit는 다양한 샘플에서 유전체 DNA(gDNA)를 추출하는 데 도움을 주며, 액체 생검 용 circulating cell-free DNA, 임상 암 연구용 formalin-fixed, paraffin embedded (FFPE) 샘플에서 DNA와 RNA, 그리고 유전자 발현 연구를 위한 total RNA 및 miRNA를 추출하는데 도움을 줍니다.
기타 타겟을 위한 Dynabeads 및 SMART Digest 시약. KingFisher 장비는 Invitrogen Dynabeads 마그네틱 비드 또는 Thermo Scientific SMART Digest 키트를 사용하여 다른 핵산, 단백질 및 세포 구조를 캡처 및 분리할 수 있습니다. 예를 들어, SMART Digest 키트를 사용하여 심층 펩타이드 맵핑 및 특성 분석을 위해 ipilimumab 또는 rituximab(Rituxan ®)과 같은 단클론 항체의 단백질 분해를 자동화할 수 있습니다. Flow cytometry 또는 western blot을 사용하는 다운스트림 분석을 위해 Dynabeads 마그네틱 비드와 KingFisher 기기를 페어링하여 CD9+ 종양 유래 엑소좀을 캡처할 수 있습니다.
모든 키트와 많은 시약에는 KingFisher 기기에 최적화되고 변경 가능한 프로토콜이 포함되어 있습니다. 애플리케이션에 맞는 키트 및 시약을 찾으려면 키트, 시약 및 프로토콜 탭을 검색하거나 선택 가이드를 활용하십시오. 시약 맞춤화를 지원하거나 특정 애플리케이션 프로토콜 개발을 위한 도움이 필요한 경우, 현장 애플리케이션 전문가 및 기술 영업 전문가가 도와드립니다.
완전하고 최적화된 Dynabeads 기반 시스템
KingFisher 샘플 전처리 기기는 MagMAX 핵산 정제 키트, Dynabeads 시약 및 KingFisher 플레이트 및 플라스틱 제품에서 사용하는 데 최적화되어 있습니다. 이 제품들은 엄격한 기준에 맞춰 설계 및 제조되었으며 이를 위해 개발된 프로토콜은 테스트, 정제 및 검증을 거쳤습니다. 이들 제품과 프로토콜을 함께 사용하면 기기의 성능과 결과의 순도, 수율 및 샘플의 무결성을 신뢰할 수 있습니다.
KingFisher 시스템은 MagMAX 키트, Dynabeads 시약, KingFisher 플레이트 및 플라스틱 제품과 함께 사용하도록 최적화되어 있습니다.
Dynabeads 마그네틱 비드 시약 최적화(MagMAX 정제 키트에도 포함되어 있음)는 일관성 있는 결합과 신뢰성 있는 결과를 얻기 위한 핵심 요소입니다. Dynabeads는 초상자성 입자입니다. 즉 자기장에 있을 때 자석 성질을 나타내며, 자기장에서 제거되면 더 이상 잔류 자석 성질이 없습니다. 이 물질은 세포 및 분자에 부드럽게 작용하며 컬럼이나 원심분리 없이, 튜브 또는 플레이트에서 생물학적 샘플의 타겟을 직접 캡처합니다.
당사의 합법적인 편집 동영상을 통해 자연적인 세포 프로세스 연구를 위해 나노 크기의 마그네틱 “마이크로 비드” 보다 마이크로 크기의 Dynabeads 마그네틱 비드를 사용하는 것이 더 나은 이유를 알아보십시오. (7:21)
Dynabeads의 엄격한 제조 공정은 균일한 구형 형태, 크기 및 매끄러운 표면을 가진 마그네틱 비드를 생산합니다. 각 실험에서 제공되는 동일한 표면적을 통해 더욱 신뢰성 있고 재현 가능한 결과를 얻을 수 있습니다.
Dynabeads 마그네틱 비드는 불필요한 결합 단백질을 캡처하는 내부 표면 없이, 필요한 결합을 수행하기 위해 정의된 표면을 가지고 있습니다. A Dynabeads 제품은 높은 수준의 재현성이 가능하도록 고도로 제어된 제품 품질로 제조된 가장 균일한 단분산 초상자성 비드입니다. B, C, D 다른 공급업체의 마그네틱 입자는 불순물을 갭처하는 모양과 크기가 다양하므로 재현성이 떨어지고 비특이적 결합이 증가합니다.
KingFisher 시스템은 이러한 최적화 내에서 유연성을 제공하여 실험 또는 프로세스의 요구사항에 맞게 워크플로우를 수정 및 맞춤화할 수 있습니다. 기기 자체에 다음과 같은 기능이 있습니다.
- 처리량 선택: 모델에 따라 실행당 6~96개의 샘플 처리
- 교체 가능한 형식: 20µL~1,000µL의 입력 부피를 처리하기 위해 24 well 또는 96 well standard 또는 deep-well 플레이트 선택 가능
- 교체 가능한 마그네틱 헤드: 선택한 플레이트 형식에 맞게 최적화되어 있음
- 프로토콜 사용자 정의: BindIt 소프트웨어를 사용하여 프로토콜을 쉽게 편집, 수정 또는 새로 생성 가능
다운로드 가능한 맞춤형 프로토콜
Thermo Scientific BindIt BindIx 소프트웨어는 KingFisher 시스템이 변화하는 연구 연구에 적응할 수 있도록 모든 KingFisher 기기에 무료로 포함되어 있습니다.
이 소프트웨어를 사용하면 PC에 프로토콜을 생성, 수정 및 저장하고, KingFisher 기기로 프로토콜을 전송할 수 있으며, 실행 중에 기기 화면에서 해당 프로토콜의 실행을 추적할 수 있습니다. 또한 KingFisher 플레이트 레이아웃에서 프로토콜의 모든 부분, 즉 bind, wash, elution에 대한 단계와 파라미터를 정의하고 편집할 수 있습니다. 이미 수동 프로토콜을 개발한 경우, 몇 분 내에 자동 프로토콜로 변환할 수 있습니다!
MagMAX 및 Dynabeads 핵산 분리 키트와 Dynabeads 및 SMART Digest 단백질 정제 제품에 대한 프로토콜을 사용할 수 있습니다. 기기에 로드되면 프로토콜을 수정하고 저장하여 나중에 다시 사용할 수 있습니다.
Nasopharyngeal swab 샘플에서 SARS-CoV-2 검사를 위한 간소화된 프로토콜은 표준 프로토콜만큼 4개의 바이러스 RNA 타겟을 격리하는 데 효율적이었습니다.
배우기 쉽고, 간편한 사용
KingFisher 시스템은 설치, 학습 및 사용이 간편하도록 설계되었습니다. 대부분의 경우 10분 이내에 실행할 수 있습니다. 또한 이 기기는 실험실 요구 사항에 맞게 맞춤화할 수 있습니다.
워크플로우도 간단합니다. 일단 셋업이 완료되면 기기 화면에서 실행할 프로토콜로 스크롤하여 각 플레이트를 준비하고 로드하는 방법에 대한 단계별 지침을 따르십시오. 그런 다음 Start(시작)를 누르기만 하면 됩니다! (또는 기기가 프로토콜을 자동으로 준수하기 때문에 기기에서 거리가 떨어진 곳에 있어도 됩니다.) 필요한 경우에는 화면에서 바로 단계의 시간 또는 혼합 횟수와 같은 프로토콜을 사용자 정의할 수 있습니다.
KingFisher 샘플 전처리의 단순함을 이해하기 위한 최선의 방법은 작동 중인 기기를 보는 것입니다. 고객의 실험실에서 고객의 샘플을 사용하여 라이브 데모를 예약하거나 고객의 실험실 환경에 맞게 구성할 수 있는 가상 데모를 예약할 것을 권장합니다. 경험할 수 있는 것을 알아보려면, 데모 비디오를 시청하십시오.
이 비디오에서 설명한 대로 라이브 또는 가상 데모는 KingFisher 샘플 전처리의 단순성을 보여 줍니다. (27:28)
실험실에서 KingFisher 데모를 보신 후, 대부분의 고객은 특정 애플리케이션에 맞는 기기를 구입합니다. 일단 실험실에 설치하고 그것이 얼마나 쉬운지 알게 되면, 종종 다른 용도에도 활용할 수 있으므로 이 기기는 진정한 실험실 도구가 됩니다.
다른 샘플 전처리 워크플로우를 사용한 인위적 SARS-CoV-2 양성 nasopharyngeal swab 샘플의 Ct 값. Nasopharyngeal swab 검체는 SARS-COV-2 바이러스 RNA(각각 검출 한계 1배 또는 3배)의 250 copies/mL(왼쪽) 또는 750 copies/mL(오른쪽)로 스파이크되고 Wash 3을 갖추거나(+) 갖추지 않은(–) MagMAX Viral/Pathogen Kit를 사용하여 첨가된 샘플의 200μL 또는 400μL의 스파이크된 샘플에서 RNA를 3회 추출했습니다. 50μL에서 elution 후, 4개의 RNA 타겟(색상 기호)에 대해 qRT-PCR을 통해 샘플을 3회 분석했습니다. 각 대상의 CT 값은 매우 일관적이고(기호들이 면밀히 모임) 샘플 volumes과 wash 조건 사이가 거의 동일합니다. 모든 음성 샘플는 “검출되지 않음”(데이터 표시되지 않음) Ct 값을 가졌습니다.