키트, 시약 및 프로토콜

MagMAX viral/pathogen kit는 높은 핵산 회수가 가능하도록 설계되었으며 low-titer 샘플과 호환됩니다. 적은 볼륨에서 큰 볼륨까지 입력 범위에는 단지 두 개 프로토콜만 있습니다. 캐리어가 필요하지 않으므로 다운스트림 NGS와의 간섭을 줄임으로써 필요한 단계를 줄일 수 있습니다.

MagMAX Viral/Pathogen Nucleic Acid Isolation Kit I 및 II(MVP I 및 II)는 연구 실험실에서 사용하는 것이 좋습니다. 두 키트 모두 추출 시약의 절반의 양인 200µL(표준 400µL 대비) 샘플 입력 부피를 허용하는 새롭게 개발된 간소화된 프로토콜로 입증되었습니다.

두 개의 MagMAX 키트는 기능적으로 동일하며, 이는 RNA를 비드로 유도하는 화학물질과 전체 워크플로우가 포함됩니다. 두 가지 차이점은 다음과 같습니다. (a) 전례 없는 SARS-COV-2 수요로 인한 비드 구성요소 원재료 변화, 그리고 (b) MVP II 키트는 대량 추출 형식으로만 사용할 수 있습니다.

SARS-COV-2 검사 및 분리를 위한 KingFisher 기기 및 MagMAX 또는 Dynabeads 키트 사용에 대한 애플리케이션 노트 및 지원 자료는 리소스 탭을 참조하십시오.

이러한 키트에 대한 성능 데이터, 애플리케이션 노트 및 자세한 프로토콜 정보는 위의 자세히 알아보기 또는 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

KingFisher 기기를 사용하여 MagMAX Viral/Pathogen Nucleic Acid Isolation Kit에 대한 워크플로우 비디오를 보려면 위의 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

KingFisher 기기와 함께 사용하기 위한 플라스틱 제품 및 플레이트 셋업 제품에 대한 정보는 액세서리 탭을 참조하십시오.

MagMAX DNA Multi-Sample Ultra 2.0 Kit를 사용하여 작은 볼륨 및 큰 볼륨 샘플량에서 모두 고순도 gDNA를 회수합니다. 이 키트는 proteinase K(PK) 및 P-enhancer로 샘플을 처리하고, 이어서 혁신적인 lysis/binding 용액을 사용하여 세포 용해, 단백질 변성, 높은 결합의 마그네틱 비드에서 gDNA를 동시에 캡처하여 최대의 수율을 생성합니다. 유연성을 위해 설계된 이 키트를 사용하면 문제 없는 처리를 위해 샘플과 완충액 부피 표준화 단계를 건너뛸 수 있습니다. 예를 들어, 동일한 플레이트에서 50µL 및 400µL 샘플을 동시에 실행할 수 있습니다.

MagMAX DNA Multi-Sample Ultra 2.0 Kit용 시약은 벌크로 이용할 수 있으므로 2,000개의 50~200µL 샘플, 또는 1,000개의 200~400µL 샘플을 처리할 수 있습니다.

KingFisher Ready DNA Ultra 2.0 Prefilled Plate는 MagMAX DNA Multi-Sample Ultra 2.0 Kit와 동일한 시약이 포함되어 있으며 MagMAX DNA Multi-Sample Ultra Kit와 동일한 고품질 결과를 생성하지만, 이 플레이트는 이미 편리하게 시약으로 채워져 있습니다. 이로써 세포 용해, 세척 용액 및 마그네틱 비드를 분주할 필요가 없습니다. 프로토콜은 간단합니다. 호일을 벗겨내고, 샘플을 첨가하고, enhancer/Proteinase K 용액을 추가한 다음, 기기에 삽입하면 됩니다.

KingFisher 기기와 함께 MagMAX gDNA Saliva Kit를 사용하여 타액 샘플에서 고순도 gDNA를 회수하십시오. 이 키트는 high-binding 마그네틱 비드에서 세포 용해, 변성 단백질 및 gDNA 포착을 동시에 하기 위한 혁신적인 lysis/binding 용액으로 샘플을 처리합니다. 유연성을 위해 설계된 이 키트를 사용하면 문제 없는 처리를 위해 샘플과 완충제 부피 정규화 단계를 건너뛸 수 있습니다. 예를 들어, 동일한 플레이트에서 50µL 및 400µL 샘플을 동시에 실행할 수 있습니다. 워크플로우는 Genotek의 Oragene™, IsoHelix의 GeneFiX™, Biomatrica의 SalivaGard™와 같은 타액 수집 장치와 호환됩니다.

이러한 MagMAX 키트에 대한 성능 데이터 및 프로토콜 정보는 위의 자세히 알아보기 링크를 참조하십시오.

KingFisher 기기와 함께 사용하기 위한 플라스틱 제품 및 플레이트 설정 제품에 대한 정보는 액세서리 탭을 참조하십시오.

액체 생검은 대부분 정상 세포와 암성 세포에서 유래한 cell-free DNA(cfDNA)를 사용합니다. 혈류 중 tumor-only supply DNA는 일반적으로 순환 종양 DNA(ctDNA)라고 불리며, 여기에는 접근하기 어려운 종양에 관한 정보가 로드되어 있습니다. 이 키트에서는 마그네틱 비드와 최적화된 화학 물질이 더욱 효율적인 핵산 분리를 위해 결합되어 더 큰 DNA 분자는 남겨 놓고 특별히 분리된 cfDNA를 회수합니다. 전체 핵산 중에서 cfDNA 부분에 대한 이와 같은 농축으로 더 짧은 ctDNA가 농축되어 qPCR, 디지털 PCR(dPCR) 또는 차세대 염기서열분석(NGS)을 사용한 다운스트림 분석을 가능하게 합니다.

cfDNA의 중요성이 점점 커지고 있지만, 그것이 전체를 이야기 해 주는 것은 아닙니다. cfRNA 서열은 microRNA와 유전자 융합 형태로 중요한 바이오마커 역할을 합니다. Total Nucleic Acid Kit에 cfDNA와 cfRNA를 포함시키면 연구자들이 연구를 확장하고 인간 건강을 증진할 수 있는 기회를 얻을 수 있습니다.

KingFisher 장비와 MagMAX Cell-Free DNA Isolation Kit, Oncomine 어세이 및 기타 다운스트림 애플리케이션을 사용하여 추출 및 정제에서부터 분석까지 액체 생검 워크플로우를 최적화할 수 있습니다.

MagMAX Cell-Free Total Nucleic Acid Isolation Kit를 사용하면 액체 생검 워크플로우를 확장하여 동일한 샘플에서 cell-free DNA 및 RNA(cfRNA)를 모두 포함시키도록 할 수 있습니다.

이러한 MagMAX 키트 중 하나에 대한 성능 데이터, 애플리케이션 노트 및 자세한 프로토콜 정보는 위의 자세히 알아보기 링크를 참조하십시오.

KingFisher 기기와 함께 MagMAX Cell-Free DNA Isolation Kit의 워크플로우 동영상을 보려면 위의 해당 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

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MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit를 사용하면 FFPE 샘플에서 빠르고 신뢰성 있는 핵산 분리가 가능합니다. 또한 단일 워크플로우로 동일한 샘플에서 DNA와 RNA를 순차적으로 추출하고 귀중한 샘플에서 더 풍부한 데이터를 얻을 수 있습니다. 예를 들어, hotspot 돌연변이, CNV, 유전자 융합 및 삽입 결실 등의 중요한 바이오마커를 조사할 수 있습니다.

이 키트는 고형 종양 생검, 핵침 생검 및 미세침 흡입 샘플을 포함한 여러 가지 연구 샘플 유형에 대한 검증을 거쳤습니다. 또한 CitriSolv™ clearing agent와 호환되므로, 탈파라핀화를 위한 자일렌 대안 제품으로 독성이 적으며 화학 가스 후드 없이 사용할 수 있습니다.

탈파라핀화 공정의 속도를 높이려면 FFPE DNA/RNA Ultra Kit 를 Applied Biosystems™ AutoLys™ 시스템과 함께 사용하십시오. 이 시스템은 피펫팅 단계를 줄이기 위해 준비된 튜브와 랙으로 구성되어 있으며, AutoLys 및 액세서리로 위험한 화학 물질의 필요성을 제거하고 조직 샘플의 손실을 최소화합니다.

이 MagMAX 키트에 대한 성능 데이터, 애플리케이션 노트 및 자세한 프로토콜 정보는 위의 자세히 알아보기 링크를 참조하십시오.

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MagMAX mirVana Total RNA Isolation Kit를 사용하면 microRNA(miRNA)와 같은 small RNA에서 non-coding RNA, messenger RNA 및 리보솜 RNA에 이르기까지 세포에 존재하는 모든 유형의 RNA를 포괄하는 실제 total RNA의 저처리량 또는 고처리량 분리를 수행할 수 있습니다. 이 키트는 고농도 RNA를 20µL 만큼 소량의 nuclease-free water에 용출하며, 그 화학물질이 시간이 지남에 따라 RNA를 안정화하고 보존합니다.

추출한 RNA는 miRNA-Seq 및 qRT-PCR과 같은 다양한 다운스트림 유전자 발현 애플리케이션에 적합합니다. 워크플로우는 TaqMan™ Advanced miRNA cDNA Synthesis Kit 및 기타 TaqMan Advanced miRNA Assays에 대한 검증을 거쳤습니다.

이 MagMAX 키트에 대한 성능 데이터는 위의 자세히 알아보기 링크를 참조하십시오.

이 MagMAX 키트에 대한 프로토콜 정보 및 애플리케이션 노트 또는 이 키트에 대한 워크플로우 동영상(매뉴얼 분리만 해당)을 보려면 위의 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

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이러한 Dynabeads 키트에 대한 프로토콜은 위의 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

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MagMAX 바이러스/병원체 키트는 높은 핵산 회수가 가능하도록 설계되었으며 low-titer 샘플과 호환됩니다. 적은 볼륨에서 큰 볼륨까지의 입력 범위를 위해 단지 두 개의 프로토콜만 있습니다. 캐리어가 필요하지 않으므로 다운스트림 NGS와의 간섭을 줄임으로써 필요한 단계를 줄일 수 있습니다.

MagMAX Viral/Pathogen Nucleic Acid Isolation Kit는 바이러스 및 그램 음성 박테리아를 포함한 샘플에서 RNA 및 DNA를 추출하는 데 있어 높은 감도의 간단한 방법을 제공하며, 여러 샘플 유형에서 50 copies 정도의 적은 수의 입력을 성공적으로 검출함으로써 이를 입증합니다.

MagMAX Viral/Pathogen Ultra Nucleic Acid Isolation Kit(A42356)는 표준 바이러스/병원균 핵산 분리 키트와 동일한 시약과 함께 그램 양성 박테리아, 효모 및 곰팡이와 같은 까다로운 병원균에서 핵산을 용해하고 회수하는 데 필요한 추가 효소 혼합물을 포함하고 있습니다. 기도 미생물상(respiratory tract microbiota)을 비롯하여 검출하기 어려운 미지의 병원균을 광범위하게 검출 및 식별하는 데 사용할 수 있습니다. 바이러스 RNA 분리에는 여분의 효소가 필요하지 않으므로 이 키트는 SARS-COV-2 검사에는 권장되지 않습니다.

참고: SARS-COV-2 RNA를 분리해야 하는 경우, MagMAX Viral/Pathogen II(MVPII) Nucleic Acid Isolation Kit(카탈로그 번호 A48383R), MagMAX Viral/Nucleic Acid Isolation Kit(카탈로그 번호 A42356)를 주문하십시오. Ultra 버전에는 SARS-CoV-2 RNA 분리에 필요하지 않은 그램 양성 박테리아와 곰팡이를 용해하는 데 필요한 여분의 효소 믹스가 포함되어 있습니다.

이러한 MagMAX 키트에 대한 성능 데이터, 애플리케이션 노트 및 자세한 프로토콜 정보는 위의 자세히 알아보기 또는 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

KingFisher 기기를 사용하여 MagMAX Viral/Pathogen Nucleic Acid Isolation Kit에 대한 워크플로우 비디오를 보려면 위의 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

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인간 미생물은 복잡하고 다면적이며, 각 신체 내 서식지에 따라 서로 다른 종류가 우세하게 존재합니다. 소화관은 인체와 관련된 많은 미생물상을 포함하고 있으며 가장 철저하게 조사된 생태계 중 하나입니다. 배설물 샘플은 다량의 바이오매스를 쉽게 구할 수 있기 때문에 이러한 분석에 흔히 사용됩니다. 타액 및 소변과 같은 체액은 덜 연구되지만 각각 고유의 세균 공동체가 포함되어 있습니다.

MagMAX Microbiome Ultra Nucleic Acid Isolation Kit를 사용하면 총 핵산을 대변, 소변, 타액 및 기타 샘플에서 분리할 수 있습니다. 또한, 고수율, 고순도, 고품질, 억제제가 없는 DNA와 RNA를 추출해 낼 수 있으며, 이 추출물은 metagenomics 연구 및 기타 다운스트림 애플리케이션에 이상적입니다. 효소 기반 분해를 사용하여 추가 처리 단계 없이 광범위한 미생물에서 핵산을 회수할 수 있습니다.

이 키트는 바이러스성 및 세균 핵산을 모두 분리할 수 있으며 포유류, 파충류, 어류 및 조류 샘플, VTM, 피부, 우유 샘플, 이스트 및 세균 배양에 대해 테스트를 거쳤습니다. 자체적인 미생물군 검사를 개발하고 있으며 총 핵산 분리를 위한 저처리량 및/또는 고처리량 솔루션이 필요한 연구 실험실에 권장됩니다.

이 MagMAX 키트에 대한 성능 데이터 및 애플리케이션 노트는 위의 자세히 알아보기 링크를 참조하십시오.

이 MagMAX 키트에 대한 프로토콜 정보는 위의 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

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식물 세포벽은 분리가 매우 어려울 수 있으며, 용해물에는 탄닌산, 페놀류, 복합 다당류와 같이 핵산의 품질에 영향을 미치며 후속 반응을 저해하는 화합물이 상당량 함유되는 경우가 많습니다. 이러한 문제에도 불구하고 MagMAX 키트는 Arabidopsis thaliana, 피망 잎, 유채/유채씨 잎, 옥수수 잎, 파, 레몬 잎, 귀리 잎, 오렌지, 솔잎, 시금치 잎, 토마토 잎과 밀싹 잎 등의 다양한 식물 샘플에서 DNA 또는 RNA를 효과적으로 분리할 수 있습니다.

식물 진균을 포함하여 다양한 식물 종 및 조직 유형에서 DNA 및 RNA를 자동 정제하기 위한 KingFisher 기기와 함께 MagMAX Plant DNA and RNA Kit 를 사용하십시오. 정제된 DNA 또는 RNA에는 단백질, 뉴클레아제 및 기타 오염 물질, 억제제 및 핵산이 없습니다. PCR, qPCR 및 NGS와 같은 광범위한 다운스트림 애플리케이션에 사용할 수 있습니다. 이 키트는 식물 샘플 10~100 mg에서 DNA 및 RNA를 분리하는데 최적화되어 있습니다.

이러한 MagMAX 키트 중 하나에 대한 성능 데이터 및 프로토콜을 보려면 위의 해당 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

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IP 프로세스에는 두 가지 변형이 있습니다. 타겟 단백질이 풍부한 경우, 직접 방법을 사용하여 1차 항체(Ab)를 Dynabeads 마그네틱 비드로 먼저 인큐베이션한 다음 세척하여 결합되지 않은 항체를 제거할 수 있습니다. 그런 다음 Ab-결합 비드는 캡쳐를 위해 샘플과 함께 인큐베이션한 다음 Wash와 elution을 거칩니다.

타겟 단백질이 풍부하지 않을 경우, 간접 방법을 사용할 수 있습니다. 이 때 1차 Ab는 세포 용해물과 함께 먼저 인큐에이션되어 Ab-항원 복합체를 형성합니다. 그런 다음 Dynabeads 비드를 샘플에 첨가하여 캡쳐하고, wash와 elution을 거칩니다.

IP는 매뉴얼 방식으로 수행할 수 있지만 wash 단계의 횟수와 핸즈온 시간은 샘플 수에 비례하여 증가합니다. KingFisher 기기를 사용하여 공정을 자동화하면 피펫팅 및 기타 매뉴얼 방식에서 발생하는 불일치를 제거할 수 있습니다. 자동 프로토콜로 수동 프로토콜을 복제하여 동일한 수준의 높은 표적 단백질 수율과 동일한 낮은 비특이적 결합 및 높은 재현성을 얻을 수 있습니다. 10개 또는 96개의 샘플 작업 시 IP 프로토콜은 40분 미만이 소요됩니다. 플레이트에 시약을 로드하고 Start 버튼을 누르기만 하면 다운스트림 분석을 준비하기 전에 IP가 완료됩니다. 인큐베이션 시간과 같은 최적화가 Ab와 타겟 단백질의 존재량 및/또는 특이성에 따라 필요할 수 있습니다.

키트 중에서 어떤 키트를 선택할 지는 분리해야 하는 표적 단백질에 따라 달라집니다. 단백질에 대한 1차 항체가 있는 경우, Dynabeads Protein A 또는 G 또는 관련 키트를 사용하는 것이 좋습니다. 2차 항체가 있는 경우, Dynabeads M-280 IgG 제품 중 하나를 사용하십시오. 마지막으로 바이오티닐화 항체(biotinylated antibody) 또는 리간드가 있는 경우, Dynabeads M-280 Streptavidin을 사용하십시오.

이러한 Dynabeads 제품에 대한 성능 데이터, 애플리케이션 노트 및 프로토콜 정보는 위의 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

KingFisher 기기와 함께 사용하기 위한 플라스틱 제품 및 플레이트 셋업 제품에 대한 정보는 액세서리 탭을 참조하십시오.

KingFisher 기기와 Thermo Scientific SMART Digest Kit를 함께 사용하여 펩타이드 맵핑 및 정량 분석 애플리케이션을 위한 자동 단백질 분해에서 최신의 기능을 제공합니다. 이 키트를 사용하면 단백질 분해를 빠르고 간단하며 재현성 있고 쉽게 자동화할 수 있습니다.

단백질 분해 키트는 마그네틱 비드에 최적화된 열 안정성 효소를 사용하여 전사 후 변형의 가능성을 최소화합니다. 이 공정을 자동화하여 매뉴얼 처리를 최소화하고 반응 시간을 최적화하며 고온 노출을 줄임으로써 재현성이 향상됩니다.^[1]

Immunoaffinity (IA) 키트는 높은 감도를 위해 하나의 비드에 IA 캡처와 효소 분해를 결합한 것입니다. 이러한 혁신은 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)와 액체 크로마토그래피/질량분석법(LC/MS) 결과물에서 높은 신뢰성을 제공합니다. SMART Digest Kit는 특히 바이오마커, 바이오제약 특성 분석 및 정량 분석 애플리케이션에 유용합니다.

펩타이드 맵핑 애플리케이션의 경우, 최적화된 열 안정성 트립신, 키모트립신(chymotrypsin) 또는 proteinase K 효소 분해로 단백질의 염기서열 특이적 분할에 사용할 수 있습니다. 마그네틱 비드에 있는 이 효소는 단백질 변성 조건에서 분해를 가속화하기 위해 상승된 온도에서 활성화됩니다.

• 트립신은 라이신과 아르기닌 아미노산 잔기의 C-말단 부분을 분해합니다
• 키모트립신은 티로신, 페닐알라닌 및 트립토판과 같은 방향족 잔기에 의해 형성된 펩타이드 결합을 분해합니다
• Proteinase K는 차단된 알파 아미노기로 지방족 및 방향족 아미노산의 카르복실기에 인접한 펩티드 결합을 분해합니다

펩타이드 정량 분석 애플리케이션의 경우, SMART Digest IA Kit는 하나의 웰에서 면역친화성 캡처로 트립신 분해를 수행합니다. 면역친화성 모이어티(streptavidin, protein A 또는 protein G)는 일반적으로 복잡한 생물학적 매트릭스에서 낮은 수준으로 존재하는 단백질을 정제함으로써 감도를 높입니다.

이러한 SMART Digest 제품에 대한 성능 데이터 및 애플리케이션 노트를 보려면 위의 카탈로그 번호 링크를 참조하십시오.

KingFisher 기기와 함께 사용하기 위한 플라스틱 제품 및 플레이트 셋업 제품에 대한 정보는 액세서리 탭을 참조하십시오.

세포 분리 프로세스에는 세 가지 변형이 있습니다. positive cell isolation의 경우, Dynabeads 시약이 타겟 세포에 결합하고 비드/세포 복합체가 KingFisher 마그네틱 팁으로 당겨집니다. 상등액을 폐기한 후에는 순수한 타겟 세포만 남습니다.

negative cell isolation의 경우 Dynabeads Untouched™ 키트를 원치 않는 세포를 제거하는 데 사용하며, 비드가 포함되지 않은 untouched 타겟 세포가 샘플에 남습니다. 예를 들어 Dynabeads Untouched Human T Cells Kit에는 모든 T cell(및 T cell만)를 추후 사용할 수 있도록 남겨두고 B cell, natural killer(NK) cell, 단핵구, 혈소판, 수지상 세포, 과립구 및 적혈구 등을 제거하는 항체 혼합물이 포함되어 있습니다. 기타 Dynabeads Untouched kit는 CD4 또는 CD8 T cell subset을 제외한 모든 것을 제거할 수 있습니다.

여러 세포 유형을 처리하는 경우, 세포 특이적 depletion Dynabeads 시약을 사용하여 >99% 효율로 불균질 샘플에서 원치 않는 모든 세포 유형을 제거할 수 있습니다. 관심 세포만 depletion된 상층액에 남습니다.

이러한 Dynabeads 제품에 대한 성능 데이터, 애플리케이션 노트 및 프로토콜 정보는 위의 자세히 알아보기 링크를 참조하십시오.

KingFisher 기기와 함께 사용하기 위한 플라스틱 제품 및 플레이트 셋업 제품에 대한 정보는 액세서리탭을 참조하십시오.