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Thermo Scientific Selectris 和 Selectris X 成像过滤器为镜筒后成像过滤器,可在Thermo Scientific Krios和Glacios Cryo-TEM上使用,可提高 TEM 图像的对比度,从而生成高达原子分辨率的高分辨率结构。Selectris 过滤器的零损失过滤消除了由非弹性散射电子引起的噪声,从而提高了信噪比 (SNR) ,获得了更好的对比度。Selectris 过滤器的零损耗峰值位置专为高稳定性而设计,最大限度地降低了对环境温度变化的敏感度,无需频繁调整。
借助 Selectris 过滤器,由于软件和硬件的完全集成以及广泛的自动化和出色的稳定性,零损失能量过滤变得简单。每个机械和电子光学元件的设计都具有稳定性和数据可重复性,能够在无人值守的情况下可靠地采集具有窄能量狭缝宽度(10 eV)的大型数据集。使用这些窄狭缝宽度的能力为单颗粒冷冻电子显微术(冷冻电镜)提供了额外的对比度提升,增强了信号强度,提高了分辨率和通量。
与最新一代Thermo Scientific Falcon 4i 直接电子探测器搭配使用,Selectris 过滤器可让您快速获得高分辨率结构,揭示新的生物学见解。结合Falcon 4i摄像头和电子事件表示(EER)功能,可实现高效的文件大小压缩、超分辨率功能,并最大限度地提高所有使用案例的灵敏度。为了进一步提高用于单颗粒分析和冷冻电子断层扫描的冷冻电镜工作流程的生产力和易用性,这些过滤器已完全集成到Thermo Scientific EPU 软件、Thermo Scientific 断层扫描软件和我们的仪器操作软件中。
Selectris X 专为寻求行业领先光学性能的研究人员而设计,而 Selectris 则是那些需要最高效率和高通量的研究人员的理想选择。Selectris X 成像过滤器扩展了 Selectris 平台的稳定性、易用性和性能,提供了更复杂的电子光学系统,用于进一步的像差校正。这使得图像和能量域的失真度都极低,为真正的原子分辨率结构开辟了道路。
在与样品相互作用时,电子可以发生弹性或非弹性的散射。Selectris 成像过滤器允许弹性散射的电子通过,从而增强了图像的对比度。其内在机制是通过消除非弹性散射电子引起的噪声,提高信噪比(SNR)和对比度。
使用非常稳定的窄缝宽度 (10 eV) 的能力为单颗粒冷冻电子显微术(冷冻电镜)和冷冻断层扫描 (cryo-EM) 提供了额外的对比,同时也提高了了分辨率和通量。
例如,让我们比较一下具有相同数量粒子的蛋白酶体 20S 的重建(见表)。与较大的狭缝宽度(20 keV)相比,较窄的能量狭缝(即较低的能量)可获得更高的分辨率,并且与未过滤的图像相比甚至更优化。这是因为 B 因子已降低,这意味着获得一定分辨率所需的粒子更少。
此外,与使用更宽的能量狭缝相比,更窄的能量狭缝宽度 (10 eV) 意味着获得等效分辨率(370k) 所需的粒子数量更少(见图和图表)。因此,使用 Selectris X 成像过滤器,您可以基于更少的数据更快地获得结果,或者最大限度地提高分辨率。
实验 | # 粒子 | 分辨率 (Å) | B因子 |
10 eV | 102,200 | 2.14 | 89.3 |
20 eV | 102,200 | 2.26 | 99.5 |
未过滤 | 102,200 | 2.34 | 106.1 |
要获得较低的能量狭缝宽度,例如 5 或 10 eV,需要一个非常稳定的过滤器,以避免由于调整过滤器造成的中断。
“硬件和软件的稳定性给我们留下了深刻的印象。由于增强了性能和稳定性,我们所有的有关 COVID-19 工作现在都在配置了 Selectris X 成像过滤器的仪器上完成。我们定期收集 5 eV 断层图,这在以前是不可能的。”
Alistair Siebert,英国国家同步加速器科学设施钻石光源电子生物成像中心 (eBIC) 首席电子显微镜专家。
Selectris X 成像过滤器因其稳定性和鲁棒性而受到我们的青睐,尤其是在延长的时间内执行的冷冻电镜和冷冻电子断层扫描数据收集方面。经调整后的过滤器可以稳定运行超过一个月的时间。零损失峰值仅在一周甚至两周后移动 1 eV!”
德国马丁斯里德 马克斯·普朗克研究所-生物化学研究所 Juergen Plitzko 博士
Selectris 和 Selectris X 成像过滤器与 Glacios Cryo-TEM 完全兼容,配备 200 kV XFEG 光学元件。Glacios冷冻透射电镜将所有这些集成于一台小型仪器上,并简化了安装过程。
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位置 | 底部安装 |
稳定性 | 狭缝漂移± 1.5eV/24hr |
零损失对中 | 自动 |
过滤器调整 | 自动 |
TEM工作电压 | 200 kV、300 kV |
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传感器 | 4096 × 4096 像素,~ 5.7 x 5.7 cm |
像素尺寸 | 14 x 14 um2像素尺寸 |
文件格式 |
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检测模式 |
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自动化 |
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使用Selectris X在Glacios Cryo TEM上进行10 eV过滤,解析脱铁铁蛋白,分辨率为 1.7 Å。
GABA-A 受体人膜蛋白解析分辨率为 2.4 Å (~200 kDa),需求颗粒数为 94k,相比之下,使用配备 Selectris X 的 Glacios Cryo-TEM 解析未过滤样品的分辨率为 2.8 Å,需求颗粒数为 127k。样品由 MRC-LMB Cambridge 提供。
使用配备 Selectris X 的 Glacios Cryo-TEM 解析人血红蛋白(小分子蛋白,64 kDa),分辨率为 3.4 Å。
注册以查看包含Selectris功能的演示、RD过滤器开发的幕后工作,以及使用Selectris过滤器进行单粒子分析和细胞冷冻层析成像的破纪录结构分辨率结果。了解小蛋白质(100kDa)的高分辨率、适当的模型构建和相关化学成分的潜在应用。
使用Selectris X在Glacios Cryo TEM上进行10 eV过滤,解析脱铁铁蛋白,分辨率为 1.7 Å。
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使用配备 Selectris X 的 Glacios Cryo-TEM 解析人血红蛋白(小分子蛋白,64 kDa),分辨率为 3.4 Å。
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