今天将为大家介绍临床研究中常见的9种激素类化合物在赛默飞全新一代三重四极杆TSQ Altis上建立的高通量液质联用检测方法。

科普引言

类固醇激素是一类结构上具有环戊烷多氢菲结构的脂溶性激素，可以分为皮质激素和性激素。作为由内分泌细胞分泌的内源性生物活性物质，激素在体内通过调节各种组织细胞的代谢从而影响人体的生理活动，其指标含量对人体健康有重要诊断依据，缺乏或过量都会引发各种疾病。

本文针对9种激素类化合物在全新的TSQ Altis三重四极杆液质联用平台上建立了一种灵敏度高、专属性强的定量检测方法。实验方法经过验证后取得了良好的线性关系， 灵敏度能满足临床研究对于激素类化合物的检测要求，准确度与精密度的结果显示该方法和飞飞一样稳定可靠！

实验部分

仪器

化合物信息及溶液配制

取适量激素类化合物标准品混合储备液，稀释成浓度在0.01 ng/ml – 20 ng/mL范围的标准溶液，上样分析。

实验方法

色谱条件

  • 色谱柱：Thermo Accucore™ RP-MS（2.6 µm, 100 x 2.1 mm）；
  • 柱温：40℃；
  • 进样量：5 µL；
  • 流动相：A为含0.05% NH4OH的水，B为甲醇，梯度洗脱程序见表2；

质谱条件

  • 可加热电喷雾电离源（HESI），正、负离子切换扫描模式；
  • 扫描方式SRM；
  • 喷雾电压 (+/-) 3500/3200V；
  • 离子传输管温度350℃；
  • 鞘气压力25 arb；辅助气压力 8 arb；
  • 离子源温度380℃；碰撞气压力2 mTorr；选择反应监测离子对信息见表3；  

实验结果与讨论

专属性

采用上述仪器分析方法，9种激素类化合物及其内标物在7分钟内均可获得良好的色谱峰，各化合物保留时间见图1。

图1 9种化合物及其内标物的色谱图

线性范围及灵敏度测试

所有化合物在0.01-20 ng/mL的浓度范围内，采用加权（1/x）计算线性相关系数r2均大于等于0.999，结果显示线性关系良好。

精密度测试

在低浓度水平下进行日内精密度测试（n=6）。结果证明，各化合物相对标准偏差RSD%均≤ 7.72%。

结尾

本文在赛默飞全新三重四极杆液质联用仪TSQ Altis平台上建立了同时定量检测9种激素类化合物的液质联用方法。由实验结果可以看出，该检测方法不仅具有优异的专属性、灵敏度和线性范围，而且通过对日内精密度的测试也反映了仪器及方法的稳定性良好，使用本方法进行激素类化合物的分析可以保证数据的可靠性，对激素类化合物的临床研究具有指导和参考意义。

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