腺相关病毒 (AAV) 病毒载体分析

Thermo Scientific ProPac 3R SAX 3 μm 色谱柱 采用线性盐梯度和线性盐梯度，可出色地分离完整和空 AAV 衣壳和其他杂质，如应用说明盐 梯度分离和腺相关病毒样品分析所示 μm 3 μ m 单分散强阴离子交换色谱柱。其独特的色谱柱设计具有 AAV 分析所需的高分辨率，稳健性能和批间重现性。

除了含有所需基因材料的完整 AAV 衣壳，最终产品还可能含有多种不同类型的工艺以及产品相关杂质。在需要监测，表征 AAV 衣壳蛋白的氨基酸序列以及任何相关的翻译后修饰 (PTM) 的质量属性中，应执行。此全面表征还应包括过程相关杂质，如来源于生产细胞的残留宿主细胞蛋白 (HCP) ，以降低免疫原性并确保 AAV 产品的安全性，质量和有效性。基于 LC-MS 的肽图分析通常用于重组蛋白分析，可提供序列覆盖， PTM 信息以及 HCP 的鉴定，以改进相关生产工艺的产品开发和部署。

如应用说明 腺相关病毒衣壳蛋白表征和使用微流 UHPLC-Orbitrap MS 进行宿主细胞蛋白谱图分析，通过使用用于 AAV 衣壳消化的 Thermo Scientific SMART Digest 胃蛋白试剂盒可以实现高达 100% 的序列覆盖。此外， Thermo Scientific Hypersil GOLD C18 色谱柱是肽图分析的出色之处，因为色谱柱包含二次相互作用，可防止超纯硅胶，具有独特的孔径，有利于肽峰形。