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有效分析具有生物相关性的信号转导通路。 

我们的 CellSensor 细胞系可用于:

  • 筛选信号通路中的激动剂/拮抗剂
  • 识别信号通路中特定蛋白靶标的抑制剂
  • 复筛和分析化合物选择性

查看我们的 CellSensor 细胞系验证表,找到您的目标,使用最大的经全面验证的通路细胞系系列进行初级和次级筛选。 

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CellSensor 细胞系采用 GeneBLAzer® β-内酰胺酶报告基因技术为您提供了一种快速且灵敏的方法,用于对暴露于候选药物或其他刺激物的信号转导通路进行分析。 这些细胞系可测量化合物的效力和选择性,并能够以高通量方式分析化合物激活或下调的关键通路。

许多细胞内信号转导通路在转录水平收敛,在此情况下,转录因子与调控下游转录的 DNA 增强子元件结合。 我们已经利用慢病毒载体生产了一系列稳定的细胞系,这些细胞系中包含 β-内酰胺酶报告基因上游的各种反应元件。

当产生特定增强子元件的通路在这些细胞系中活化时,会产生 β-内酰胺酶,从而可利用我们可透过细胞的比率式荧光 LiveBLAzer-FRET B/G 底物以均相检测形式进行检测(图1)

CellSensor 报告基因检测示意图
图1.CellSensor 报告基因检测示意图。 CellSensor 细胞系经过稳定的工程改造,可在通路特异性反应元件的控制下表达 β-内酰胺酶报告基因。这种检测形式的原理和方法非常简单。1) 在未处理的细胞或经通路特异性抑制剂处理的细胞中表达极少量 β-内酰胺酶。用配体刺激通路或通路中组分的组成型有效突变会引起下游转录因子的活化,从而导致 β-内酰胺酶报告基因表达;2) 向细胞中添加可透过细胞的基于 FRET 的 β-内酰胺酶底物。 为检测 β-内酰胺酶报告基因活性,使用底部读数的荧光板读数仪进行测量。低 460 nm(蓝色)/530 nm(绿色)比代表未处理或经抑制剂处理细胞中的 β-内酰胺酶活性低,高 460 nm(蓝色)/530 nm(绿色)比代表配体刺激细胞或表达组成型有效通路的细胞中的 β-内酰胺酶活性高。

进行 CellSensor 读数需要两个关键的仪器功能—底部读数能力和兼容滤光片设置。 Invitrogen 已校验了多款适合与我们的 CellSensor 细胞系以及 LiveBLAzer-FRET B/G 底物一起使用的仪器。

有关仪器设置帮助或已校验仪器列表,请发送电子邮件至 drugdiscoverytech@invitrogen.com 联系我们。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。

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