细胞核绿色标记、轴突橙色标记的斑马鱼脑

细胞示踪剂是无毒探针,可以跟踪毛细管中的流动并可视化神经元细胞连接性和易位,以监测单个细胞、整个细胞群或完整有机体的移动和定位。这些荧光示踪剂可通过离子电渗透、显微注射或胞饮作用进入细胞。此外,转运可以是逆行,顺行或双向的。虽然大多数的这种荧光探针在涉及新鲜组织切片和体外培养细胞的实验中是有效的,但对于固定组织和活体成像来说,有特殊要求。

请参阅细胞示踪剂选择指南

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相关内容:

细胞示踪剂的特性

 霍乱毒素亚基 BDiI 及衍生物酰肼和生物胞素
结果直接荧光细胞成像,对神经节苷脂 GM1 具有选择性通过细胞膜中的侧向扩散标记细胞膜并均匀标记神经元直接荧光细胞成像
组织切片
活体神经元
固定组织切片
体外培养的细胞
染料进入细胞的方法显微注射,离子电渗透显微注射或离子电渗透;对于组织切片,可选晶体和糊剂形式显微注射或胞饮作用
染色模式外源性的外源性的内源性的
最适用于细胞群细胞群单细胞
可固定
转运逆行双向双向
耐光漂白
间隙连接传输

细胞示踪剂选择指南

这些偶联物可用于组织切片和体外培养细胞。它们是通过显微注射或离子电渗透导入细胞、可固定且光稳定的逆行示踪剂。

了解更多有关霍乱毒素亚基 B 的信息

 载体标准滤光片荧光基团激发/发射波长 (nm)数量货号
霍乱毒素亚基 B
霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 488 偶联物霍乱毒素亚基 B(重组)FITCAlexa Fluor 488495/519100 µgC34775
霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 555 偶联物TRITCAlexa Fluor 555555/565100 µgC34776
霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 594 偶联物Texas RedAlexa Fluor 594590/617100 µgC34777
霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 647 偶联物Cy5Alexa Fluor 647650/668100 µgC34778
霍乱毒素亚基 B - 生物素-XX 偶联物不适用Biotin-XX不适用100 µgC34779
霍乱毒素亚基 B - 辣根过氧化物酶偶联物不适用辣根过氧化物酶不适用100 µgC34780
脂筏试剂盒
Vybrant Alexa Fluor 488 脂筏标记试剂盒霍乱毒素亚基 B(重组)和抗霍乱毒素亚单位 B 抗体(抗 CT-B)FITCAlexa Fluor 488495/5191 个试剂盒V34403
Vybrant Alexa Fluor 555 脂筏标记试剂盒TRITCAlexa Fluor 555555/5651 个试剂盒V34404
Vybrant Alexa Fluor 594 脂筏标记试剂盒Texas RedAlexa Fluor 594590/6171 个试剂盒V34405

这些细胞示踪剂也称为亲脂性示踪剂,可用于组织切片、活体神经元,固定组织切片和体外培养细胞。它们是用于长期研究的顺行和逆行示踪剂。

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 标准滤光片激发/发射波长 (nm)产品形式可固定数量货号
DiI 及衍生物
DiI 染色剂 – DiIC18(3)罗丹明549/565固体100 mgD282
DiI 染色剂 – DiIC18(3),结晶晶体25 mgD3911
DiD – DiIC18(5)Cy5644/663固体10 mgD7757
DiR – DiIC18(7)Cy5.5750/780固体10 mgD12731
CellTracker DiI
CellTracker CM-DiI 染料,溶液罗丹明549/565溶液20 x 50 µgC7000
CellTracker CM-DiI 染料固体1 mgC7001
Neurotrace DiI
NeuroTrace DiI 组织标记糊剂罗丹明549/565糊剂500 mgN22880
NeuroTrace CM-DiI 组织标记糊剂糊剂100 mgN22883
Vybrant DiI 及衍生物
Vybrant DiO 细胞标记溶液GFP484/501溶液1 mLV22886
Vybrant DiI 细胞标记溶液罗丹明549/565溶液1 mLV22885
Vybrant CM-DiI 细胞标记溶液溶液1 mLV22888
Vybrant DiD 细胞标记溶液Cy5644/663溶液1 mLV22887
Vybrant 多色细胞标记试剂盒各种溶液每种 1 mLV22889

这些细胞示踪剂也称为极性示踪剂,可用于组织切片、活体神经元和体外培养细胞。它们是用于追踪神经元投射和研究间隙连接的顺行和逆行示踪剂。

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 载体标准滤光片荧光基团激发/发射波长 (nm)数量货号
酰肼
Alexa Fluor 350 酰肼酰肼,钠盐DAPIAlexa Fluor 350346/4425 mgA10439
Alexa Fluor 488 酰肼FITCAlexa Fluor 488495/519A10436
Alexa Fluor 568 酰肼罗丹明Alexa Fluor 568578/603A10437
Alexa Fluor 594 酰肼Texas RedAlexa Fluor 594590/617A10438
Alexa Fluor 555 酰肼酰肼,Tris(三乙基铵)
TRITCAlexa Fluor 555555/5651 mgA20501MP
Alexa Fluor 633 酰肼Texas RedAlexa Fluor 633632/647A30634
Alexa Fluor 647 酰肼Cy5Alexa Fluor 647650/668A20502
生物胞素
Alexa Fluor 488 生物胞素

生物胞素,钠盐

FITCAlexa Fluor 488495/519250 mgA12924
Alexa Fluor 594 生物胞素Texas RedAlexa Fluor 594590/617A12922

这些偶联物可用于组织切片和体外培养细胞。它们是通过显微注射或离子电渗透导入细胞、可固定且光稳定的逆行示踪剂。

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霍乱毒素亚基 B
霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 488 偶联物霍乱毒素亚基 B(重组)FITCAlexa Fluor 488495/519100 µgC34775
霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 555 偶联物TRITCAlexa Fluor 555555/565100 µgC34776
霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 594 偶联物Texas RedAlexa Fluor 594590/617100 µgC34777
霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 647 偶联物Cy5Alexa Fluor 647650/668100 µgC34778
霍乱毒素亚基 B - 生物素-XX 偶联物不适用Biotin-XX不适用100 µgC34779
霍乱毒素亚基 B - 辣根过氧化物酶偶联物不适用辣根过氧化物酶不适用100 µgC34780
脂筏试剂盒
Vybrant Alexa Fluor 488 脂筏标记试剂盒霍乱毒素亚基 B(重组)和抗霍乱毒素亚单位 B 抗体(抗 CT-B)FITCAlexa Fluor 488495/5191 个试剂盒V34403
Vybrant Alexa Fluor 555 脂筏标记试剂盒TRITCAlexa Fluor 555555/5651 个试剂盒V34404
Vybrant Alexa Fluor 594 脂筏标记试剂盒Texas RedAlexa Fluor 594590/6171 个试剂盒V34405

这些细胞示踪剂也称为亲脂性示踪剂,可用于组织切片、活体神经元,固定组织切片和体外培养细胞。它们是用于长期研究的顺行和逆行示踪剂。

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 标准滤光片激发/发射波长 (nm)产品形式可固定数量货号
DiI 及衍生物
DiI 染色剂 – DiIC18(3)罗丹明549/565固体100 mgD282
DiI 染色剂 – DiIC18(3),结晶晶体25 mgD3911
DiD – DiIC18(5)Cy5644/663固体10 mgD7757
DiR – DiIC18(7)Cy5.5750/780固体10 mgD12731
CellTracker DiI
CellTracker CM-DiI 染料,溶液罗丹明549/565溶液20 x 50 µgC7000
CellTracker CM-DiI 染料固体1 mgC7001
Neurotrace DiI
NeuroTrace DiI 组织标记糊剂罗丹明549/565糊剂500 mgN22880
NeuroTrace CM-DiI 组织标记糊剂糊剂100 mgN22883
Vybrant DiI 及衍生物
Vybrant DiO 细胞标记溶液GFP484/501溶液1 mLV22886
Vybrant DiI 细胞标记溶液罗丹明549/565溶液1 mLV22885
Vybrant CM-DiI 细胞标记溶液溶液1 mLV22888
Vybrant DiD 细胞标记溶液Cy5644/663溶液1 mLV22887
Vybrant 多色细胞标记试剂盒各种溶液每种 1 mLV22889

这些细胞示踪剂也称为极性示踪剂,可用于组织切片、活体神经元和体外培养细胞。它们是用于追踪神经元投射和研究间隙连接的顺行和逆行示踪剂。

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酰肼
Alexa Fluor 350 酰肼酰肼,钠盐DAPIAlexa Fluor 350346/4425 mgA10439
Alexa Fluor 488 酰肼FITCAlexa Fluor 488495/519A10436
Alexa Fluor 568 酰肼罗丹明Alexa Fluor 568578/603A10437
Alexa Fluor 594 酰肼Texas RedAlexa Fluor 594590/617A10438
Alexa Fluor 555 酰肼酰肼,Tris(三乙基铵)
TRITCAlexa Fluor 555555/5651 mgA20501MP
Alexa Fluor 633 酰肼Texas RedAlexa Fluor 633632/647A30634
Alexa Fluor 647 酰肼Cy5Alexa Fluor 647650/668A20502
生物胞素
Alexa Fluor 488 生物胞素

生物胞素,钠盐

FITCAlexa Fluor 488495/519250 mgA12924
Alexa Fluor 594 生物胞素Texas RedAlexa Fluor 594590/617A12922

霍乱毒素亚基 B

霍乱毒素源自霍乱弧菌,由亚基 A 和 B 组成。亚基 A 是一种破坏蛋白质信号转导的 ADP-核糖基转移酶,会导致细胞脱水。而亚基 B 是无毒的,参与神经节苷脂 GM1,可用于标记脂筏的结合图 1)。在神经元中,霍乱毒素亚基 B 与轴突膜中的鞘糖脂结合。通过显微注射或离子电渗透导入细胞后,霍乱毒素亚基 B 是可固定且光稳定的逆行示踪剂。

霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 偶联物可以灵敏、选择性结合神经元,进而实现示踪,而霍乱霍乱毒素亚基 B - 生物素-XX 和辣根过氧化物酶偶联物可与酪胺信号放大 (TSA) 配合使用。

了解更多有关霍乱毒素 b 和其他蛋白偶联物的信息

经霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 555 偶联物染色的 J774 小鼠巨噬细胞
图 1.经霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 555 偶联物染色的 J774 小鼠巨噬细胞。BODIPY FL 神经节苷脂 GM1霍乱毒素亚基 B - Alexa Fluor 555 偶联物(Vybrant Alexa Fluor 555 脂筏标记试剂盒也含有该染料)依次对 J774 小鼠巨噬细胞进行染色。然后用抗 CT-B 抗体(Vybrant Alexa Fluor 555 脂筏标记试剂盒的一种组分)处理细胞,以诱导交联。Alexa Fluor 555 染料荧光(左图,红色)和 BODIPY FL 染料荧光(中心图,绿色)单独成像并叠加,以强调同时染色(右图,黄色)。细胞核以蓝色荧光素 Hoechst 33258 染色。


DiI 及衍生物

DiI 及其衍生物是亲脂性示踪剂或碳氰染料,可标记细胞膜且不显著影响细胞活性。这些染料在水中发弱荧光,但染料在质膜上扩散时会发出强荧光。亲脂性示踪剂可用于组织切片、活体神经元(图 2)和体外培养细胞中的活细胞染色。此外,它们可在固定组织切片中来追踪神经元突出(图 3)。DiI 及其衍生物也可用于长期研究。

这些亲脂性示踪剂可通过显微注射或离子电渗透进入细胞,并用于顺行和逆行转运研究。它们有晶体和糊剂形式,是组织染色的理想选择。

了解更多有关膜标记用亲脂性染料的信息

斑马鱼大脑的二维图像
图 2.DiI 示踪剂可用来评估 5 日龄嵌合体斑马鱼脑中的视网膜和顶盖模式。DiI 标记并用 SYTOX Green 核酸染料复染细胞核的斑马鱼胚胎多生视网膜中的轴突。此图像发布在“Development 125 (13) (1999)”的封面上,是由海德堡大学神经生物学部门的 Alexander Picker 和 Michael Brand 拍摄的。该图像经 The Company of Biologists, Ltd. 许可使用。
来自新生小鼠丘脑的神经元示踪
图 3.新生小鼠丘脑腹基底细胞核中逆行标记神经元的共聚焦显微镜图像。DiI(DiI18(3);伪彩色绿色)和 DiD(DiIC18(5);伪彩色红色)配对染料注射入多聚甲醛固定的 500 µm 厚的切片中,在 37°C 下培养两周进行染色。图像由西弗吉尼亚州大学的 Ariel Agmon 提供。

酰肼和生物胞素

酰肼和生物胞素是一种可固定且光稳定的极性示踪剂。它们分子量低 (<1,000 Da) 和明亮的荧光信号。酰肼和生物胞素可用于研究细胞间以及细胞和脂质体间的融合。这些细胞不可透过的极性示踪剂也可用于追踪神经元突出和研究间隙连接(图 4、5)。由于生物胞素和酰肼可以跨越间隙连接,因此它们通常与滞留在细胞内的标记葡聚糖一起用于研究神经元通讯(图 6)。还可以使用荧光链霉亲和素缀合物进行信号放大,例如 TSAELF 技术来检测生物胞素。

这些极性示踪剂可以使用显微注射、胞饮作用或其他暂时透化细胞膜的技术进行上样。此外,可以使用电穿孔法将示踪剂转运到细胞中。

了解更多有关可固定极性示踪剂的信息

视网膜神经节细胞
图 4.Alexa Fluor 488 酰肼和 Alexa Fluor 568 酰肼染色的兔视网膜神经节细胞。红色荧光 Alexa Fluor 568 酰肼(顶部细胞)、绿色荧光 Alexa Fluor 488 酰肼(中间细胞)或 Alexa Fluor 488 和 Alexa Fluor 568 酰肼两者(底部细胞)(其中黄色荧光表示两种染料共定位)染色的三种兔视网膜神经节细胞。图像由澳大利亚昆士兰大学的 Michiel van Wyk 提供。
Alexa Fluor 488 酰肼和 Alexa Fluor 568 酰肼染色的神经细胞
图 5.Alexa Fluor 488 酰肼和 Alexa Fluor 568 酰肼染色的神经细胞。在水蛭神经节中,通过离子电渗透在 Leydig 神经元中d导入绿色荧光 Alexa Fluor 488 酰肼 以及在巨胶质细胞的细胞体中导入红色荧光 Alexa Fluor 568 酰肼 的过程;图像由德国凯泽斯劳滕大学的 F. Britz、C. Lohr、J. Schmidt 和 J.W.Deitmer 提供。
葡聚糖和酰肼对神经元共染色
图 6.葡聚糖和酰肼对神经元共染色。小脑矢状切片中 10,000 MW 钙绿葡聚糖标记的攀缘纤维的共聚焦图像,显示传入轴突和末端树枝化(黄色)。受此纤维支配的浦肯野细胞由 Alexa Fluor 568 酰肼标记。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。