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用于蓝色激光的一抗
用蓝色激光进行流式细胞术分析
蓝光可激发荧光染料在标准多参数流式细胞术中发挥着重要作用。 随着配备紫外、紫色、绿色、黄色、红色和蓝色激光流式细胞仪的日益普及，蓝色激光仍然是大部分流式细胞仪的基本组成部分；另外，通常使用蓝色激光可激发荧光染料，因其可与红色荧光染料区分同时使用。 广泛的Alexa Fluor染料和eFluor染料组合支持通过流式细胞术进行的多色免疫表型分析，并且包含与蓝色激光器的488 nm光谱相容的各种染料。
查找荧光一抗
第 1 步： 搜索感兴趣的标记物（如“CD4”或“CD45”）。
第 2 步： 使用筛选器，通过荧光染料、目标物种和其他标准进一步缩小搜索结果。
蓝色激光荧光染料的特性
下表列出了蓝色激光最常用染料的特性。
| 荧光染料 | 荧光染料类型 | Ex/Em (nm) | 相对强度* （1 =最低，5 =最高） | 建议的带通滤波器 (nm) | 用途 |
|---|---|---|---|---|---|
| Alexa Fluor 488 | 有机染料 | 490/519 | 3 | 530/30 | FITC亮度更高的替代品，光稳定性更高，pH为4至 10时产生非pH依赖性荧光，荧光光谱几乎完全相同 |
| Fluorescein (FITC) | 有机染料 | 490/525 | 3 | 530/ 30 | 广泛使用的染料，易于光漂白，在pH 5-8之间显示 pH敏感性荧光染料 |
| PerCP | 蛋白质 | 482/678 | 3 | 695/40 | 多甲藻素叶绿素蛋白复合物(PerCP)是斯托克斯位移很大的一种蛋白，是多重荧光检测的理想选择 |
| PerCP-Cyanine 5.5 | 偶联 | 482/695 | 3 | 695/40 | 偶联染料，将共振能量从PerCP分子传递到Cyanine 5.5染料 |
| PerCP-eFluor 710 | 偶联 | 482/710 | 4 | 710/50 | 偶联染料，将共振能量从PerCP分子传递到eFluor 710染料；比PerCP-Cyanine 5.5偶联染料亮2-3倍 |
| R-Phycoerythrin (R-PE, PE) | 蛋白质 | 496, 565/575 | 5 | 575/26 | 广泛使用、量子产率高的荧光团，是检测低密度抗原的理想选择 |
| PE-Texas Red | 偶联 | 496, 565/615 | 3 | 590/40 | 偶联染料，将共振能量从PE分子传递到Texas Red染料 |
| PE-Alexa Fluor 610 | 偶联 | 496, 565/628 | 3 | 590/40 | 偶联染料，将共振能量从PE分子传递到Alexa Fluor 610染料 |
| PE-eFluor 610 | 偶联 | 496,565/607 | 3 | 610/20 | 串联染料，将共振能量从PE分子传递到eFluor 610 染料；PE-Texas Red染料的替代品 |
| PE-Cyanine 5 (TRI-COLOR) | 串联 | 496, 565/667 | 3 | 670/14 | 偶联染料，将共振能量从PE分子传递到Cyanine 5染料 |
| PE-Cyanine 5.5 | 偶联 | 496, 565/694 | 4 | 695/40 | 偶联染料，传递 Cyanine 5.5染料共振能量 |
| PE-Alexa Fluor 700 | 偶联 | 496, 565/723 | 3 | 695/40 | 偶联染料，将共振能量从PE分子传递到Alexa Fluor 700染料 |
| PE-Cyanine 7 | 偶联 | 496, 565/767 | 4 | 780/60 | 偶联染料，将共振能量从PE分子传递到Cyanine 7 染料 |
| * 任何荧光团的相对强度取决于所研究的细胞类型、使用的试剂、仪器和仪器配置。 上述相对强度可用作参考；观察到的强度可能不同。 | |||||