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用于红色激光的抗体
用红色激光进行流式细胞术分析
红光可激发荧光染料在标准多色流式细胞术中发挥着重要作用。 随着配备紫外、紫色、绿色、黄色、蓝色和红色激光器的流式细胞仪的日益普及，红色激光仍然是许多流式细胞仪的基本组成部分；另外，通常使用红色激光可激发荧光染料，因其可与绿色荧光蛋白相容而用于活细胞分析。 广泛的Alexa Fluor染料和eFluor染料组合支持通过流式细胞术进行的多色免疫表型分析，并且包含与红色激光器的633 nm谱线相容的各种染料。
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红色激光荧光染料的特性
下表列出了红色激光最常用荧光团的特性。
| 荧光染料 | 荧光基团类型 | Ex/Em (nm) | 相对强度* （1 =最低，5 =最高） | 建议的带通滤波器 (nm) | 用途 |
|---|---|---|---|---|---|
| APC | 蛋白质 | 645/660 | 5 | 660/20 | 广泛使用的荧光染料别藻蓝素 (APC) 是一种分离自红藻的非常明亮的i藻胆蛋白,可高量子发远红外荧光；可采用Alexa Fluor 647、Cyanine 5和eFluor 660染料替代 |
| APC-Alexa Fluor 750 | 偶联 | 645/775 | 4 | 780/60 | 偶联染料，将共振能量从APC分子传递到Alexa Fluor 750；APC-Cy 7；APC-Alexa Fluor 750和 APC-eFluor 780可互换使用 |
| APC-Cyanine 5.5 | 偶联 | 645/694 | 3 | 695/40 | 偶联染料，将共振能量从APC分子传递到Cyanine 5.5染料 |
| APC-Cyanine 7 | 偶联 | 645/767 | 4 | 780/60 | 偶联染料，将共振能量从APC分子传递到Cyanine 7 染料； APC-Cyanine 7、APC-Alexa Fluor 750和APC-eFluor 780可互换使用 |
| APC-eFluor 780 | 偶联 | 645/767 | 2 | 780/60 | 偶联染料，将共振能量从APC分子传递到eFluor 780；比 APC-Cyanine 7光稳定性更强；APC-Cy 7； APC-Alexa Fluor 750和APC-eFluor 780可互换使用 |
| Alexa Fluor 647 | 有机染料 | 650/668 | 5 | 660/20 | APC广泛使用的替代品；光稳定，除流式细胞仪外，还是显微镜应用的最佳选择 |
| Alexa Fluor 700 | 有机染料 | 696/719 | 2 | 720/30 | 尽管红色激光并没有最佳的激发效果，但其发出的明亮信号可作为剥离此激光的第三种染料；请注意，发射波长需要另一套滤光片 |
| Cyanine 5 | 有机染料 | 649/666 | 3 | 660/20 | 细胞内标记和显微应用的良好选择；APC和Alexa Fluor 647染料替代品 |
| eFluor 660 | 有机染料 | 633/668 | 5 | 660/20 | 光稳定，因而除了流式细胞术之外，还是显微镜应用的良好选择；APC或Alexa Fluor 647染料替代品 |
| *任何荧光染料的相对强度取决于所研究的细胞类型、使用的试剂、仪器和仪器配置。 上述相对强度可用作参考；观察到的强度视情况可能不同。 | |||||