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图 1: Super Bright 436 染料性能比较。 经Anti-Ly-6A/E(克隆号 D7)APC染色的小鼠骨髓细胞以及分别与(左图)Super Bright 436染料、(中图)eFluor 450 染料或(右图)Brilliant Violet™ 421染料偶联的抗CD117(克隆号 2B8)染色的小鼠骨髓细胞。
图 2. Super Bright 436抗体与Brilliant Violet™ 421抗体的荧光强度比较。 (A)使用与Super Bright 436(紫色,目录 编号 62-0199-42)、eFluor 450染料(蓝色,目录 编号48-0199-42)或 Brilliant Violet™ 421 染料(橙色)偶联的CD19抗体对人外周血细胞进行染色。 (B) 使用与 Super Bright 436(紫色,目录 编号 62-0279-42) 或 Brilliant Violet™421 染料(橙色)偶联的CD27抗体对人外周血细胞进行染色。
多色检测兼容性 | 缓冲液 | 多色检测考虑事项 |
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采用1种Super Bright荧光抗体的多色检测 | 适用标准缓冲液 | 如果在流式多色方案中只使用1种Super Bright荧光抗体,则无需使用专用染色缓冲液 |
采用2种或更多Super Bright荧光抗体的多色检测 | Super Bright染色缓冲液 | 在添加Super Bright荧光抗体之前需使用专用染色缓冲液来减少多聚染料间非特异性相互作用 |
采用1种或更多Brilliant Violet™荧光抗体的多色检测 | Super Bright染色缓冲液 | 需使用专用染色缓冲液来减少非特异性染料间相互作用 建议使用Super Bright染色缓冲液,但是也可以用类似的Brilliant染色缓冲液代替。 |
图 3. 10色ILC2分型方案。 在所示表面标记物的最佳浓度下使用Super Bright染色缓冲液(目录 编号 Sb-4400-42)对人)对正常人类 PBMC进行表面染色。(A) 对肝细胞圈选门之后,该图显示了用作 FITC dump通道(CD3 [克隆 UCHT1]、CD4 [克隆 SK3]、CD8a [克隆 RPA-T8]、CD11b [克隆 ICRF44] 和 CD19 [克隆 HIB19])的谱系标记物与 CD127 (IL-7RA)(克隆 eBioRDR5)Super Bright 436(目录 编号 62-1278-42)染色的细胞。 由于ILC2子集缺失这五种标记物,在进一步的分析中可以排除所有CD127和谱系阳性细胞。 (B-G)展示所有谱系目标的圈选门策略,以突出显示ILC2种群。 (H, I)识别出CD294 (CRTH2) 种群。
细胞活性染色选项 | 产品 | 多重检测考虑事项 |
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可固定 | LIVE/DEAD可固定死亡细胞染色试剂盒 | 不兼容LIVE/DEAD可固定紫色死亡细胞染色剂或可固定细胞活性染料eFluor 450 |
不可固定 | SYTOX不可固定死亡细胞染色剂 Ready Flow即用型细胞活性试剂 | 不兼容SYTOX蓝色染色剂 兼容所有Ready Flow细胞活性试剂 |
产品 | 多重检测考虑事项 |
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UltraComp eBeads微球 | UltraComp eBeads微球兼容紫色激光,但 OneComp eBeads不兼容紫色激光;AbC总抗体补偿微珠试剂盒也兼容Super Bright抗体偶联物。 |
染色目标 | 产品 | 多重检测考虑事项 |
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细胞质染色 (细胞因子) | 细胞内固定与透化缓冲液套装 | 无兼容性问题 |
细胞核染色 (转录因子) | Foxp3 /转录因子染色缓冲液套装 | 无兼容性问题 |