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多色检测兼容性 | 缓冲液 | 多色检测考虑事项 |
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采用1种Super Bright荧光抗体的多色检测 | 适用标准缓冲液 | 如果在多色方案中只使用1种Super Bright荧光抗体,则无需使用专用缓冲液 |
采用2种或更多Super Bright荧光抗体的多色检测 | Super Bright染色缓冲液 | 在添加Super Bright抗体之前需使用专用染色缓冲液来减少染料间非特异性相互作用 |
采用1种或更多Brilliant Violet™荧光抗体的多色检测 | Super Bright染色缓冲液 | 需使用特配染色缓冲液来减少染料间非特异性相互作用 建议使用Super Bright染色缓冲液,但是也可以用类似的Brilliant染色缓冲液代替。 |
图 2. 10色ILC2分型方案。 在所示表面标记物的最佳浓度下使用Super Bright染色缓冲液(目录 编号 Sb-4400-42)对人)对正常人类 PBMC进行表面染色。(A) 对肝细胞圈选门之后,该图显示了用作FITC dump通道(CD3 [克隆 UCHT1]、CD4 [克隆 SK3]、CD8a [克隆 RPA-T8]、CD11b [克隆 ICRF44] 和 CD19 [克隆 HIB19])的谱系标记物与 CD127 (IL-7RA)(克隆 eBioRDR5)Super Bright 436(目录 编号 62-1278-42)染色的细胞。 由于ILC2子集缺失这五种标记物,在进一步的分析中可以排除所有CD127和谱系阳性细胞。 (B-G) 展示所有谱系目标的圈门策略,以突出显示ILC2种群。 (H, I) 识别出CD294 (CRTH2)种群。
细胞活性染色选项 | 产品 | 多色检测考虑事项 |
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可固定 | LIVE/DEAD可固定死亡细胞染色试剂盒 | 无兼容性问题 |
不可固定 | SYTOX不可固定死亡细胞染色剂 Ready Flow即用型细胞活性试剂 | 无兼容性问题 兼容所有Ready Flow细胞活性试剂 |
产品 | 多色检测考虑事项 |
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UltraComp eBeads 微球 | UltraComp eBeads 微球兼容紫色激光,但 OneComp eBeads 不兼容紫色激光;AbC 总抗体补偿微球试剂盒也兼容 Super Bright 荧光抗体。 |
染色目标 | 产品 | 多色检测考虑事项 |
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细胞质染色 (细胞因子) | 细胞内固定与破膜缓冲液套装 | 无兼容性问题 |
细胞核染色 (转录因子) | Foxp3 /转录因子染色缓冲液套装 | 无兼容性问题 |