Ready Flow即用型流式细胞分析试剂

最简单的流式细胞分析方法

Invitrogen Ready Flow试剂是即用型溶液,专为用于流式细胞分析的细胞染色而设计,具有如下特性:

  • 无需计算
  • 无需稀释
  • 无需移液

Ready Flow试剂简化了最常用的流式细胞分析

使用方便的滴瓶,向每毫升浓度为1 x 106 细胞/mL的单细胞混悬液中加入 2 滴试剂,然后进行孵育和分析。 Ready Flow试剂能够满足您最常见的流式细胞分析需求,包括死细胞鉴定和细胞周期(图 1)分析。 为流式细胞术分析制备样品很容易。

FxCycle Violet Ready Flow 试剂

图1: 使用 FxCycle Violet Ready Flow试剂和 InvitrogenClick-iT EdU Alexa Fluor 647 流式细胞分析试剂盒进行细胞周期分析。 使用 10 µM EdU 刺激Jurkat细胞(一种人T细胞白血病细胞株) 2小时,然后使用 Alexa Fluor 647叠氮化物检测。 随后,加入2滴FxCycle Violet Ready Flow试剂并在 25°C 孵育30分钟,完成细胞染色。 利用Invitrogen Attune NxT流式细胞仪的405激光器和440/50 nm发射滤光器采集数据。群体分析显示如下分布:凋亡 sub-G1期细胞为3.4%;G0/G1期为49.1%;S 期为33.0%;G2M 期为14.0%。

Ready Flow 试剂

 SYTOX Green Ready Flow 试剂Ready Flow 碘化丙啶试剂SYTOX AADvanced Ready Flow 试剂TO-PRO 3 Ready Flow 试剂
读取死细胞在使用试剂标记后发出强荧光,易于与活细胞区分;无需计算,无需稀释,无需移液。
标记原理
细胞膜不完整,试剂能够进入细胞并与核酸结合。
靶标核酸核酸核酸dsDNA
荧光与核酸结合后,荧光增强超过100倍试剂本身无荧光;与核酸结合后,荧光增强 20-30倍与核酸结合后,荧光增强超过500倍试剂本身无荧光;与DNA结合后,荧光增强
储存
室温室温室温室温
染色模式可固定?
可渗透活细胞?
试剂的 Ex/Em (nm)504⁄523535/617546⁄647642/661
推荐激发光源
  • 488 nm(蓝色)
  • 488 nm(蓝色)
  • 532 nm(绿色)
  • 561 nm(黄色)
  • 488 nm(蓝色)
  • 532 nm(绿色)
  • 561 nm(黄色)
  • 633 nm 或 635 nm(红色)
推荐带通滤波器
  • 530/30
  • 574/26
  • 585/16
  • 590/40
  • 620/15
  • 695/40
  • 695/40
  • 670/10
货 号R37168R37169R37173R37170
 Hoechst 33342 Ready Flow 试剂FxCycle Violet Ready Flow试剂Vybrant DyeCycle Violet Ready Flow 试剂
读取

试剂与活细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期分析;无需计算,无需稀释,无需移液。

试剂与固定细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期分析;无需计算,无需稀释,无需移液。

试剂与活细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期和DNA含量分析;无需计算,无需稀释,无需移液。

靶标dsDNAdsDNAdsDNA
标记原理该染色剂是一种DNA小沟结合剂,优先与 DNA 的腺嘌呤-胸腺嘧啶区域结合。染色剂具有细胞渗透性,与双链DNA结合后发出的荧光信号与DNA质量成比例。
荧光试剂本身无荧光。试剂与靶标结合后,荧光大大增强,但对染料结构无修改。
储存室温室温室温
支持活细胞检测?
染色模式可固定?
支持固定细胞检测?
试剂的 Ex/Em (nm)361/497358/461369/437
推荐激发光源UV (350 nm) 或 405 nmUV (350 nm) 或 405 nmUV (350 nm) 或 405 nm
推荐带通滤波器440/50450/50440/40
货 号R37165R37166R37172
 Annexin V
Pacific Blue
Ready Flow试剂
Annexin V
Alexa Fluor 488
Ready Flow试剂
Annexin V
Alexa Fluor 647
Ready Flow试剂
Annexin V
APC
Ready Flow 试剂
CellEvent
Caspase-3/7
Green Ready
Flow试剂盒
读取试剂与凋亡细胞的磷脂酰丝氨酸结合,产生荧光信号;无需计算,无需稀释,无需移液。 荧光底物可检测凋亡细胞的活化型 caspases 3和 7;无需计算,无需稀释,无需移液。 试剂盒包含的 SYTOX AADvanced 死细胞染色剂用于检测死细胞。
标记原理当存在Ca2+ 时,annexin V 偶联物与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸(PS)以高亲和力结合。 annexin V 偶联物还能通过死细胞的破损细胞膜并与细胞内部的PS结合。  建议使用一种非细胞通透性死细胞染色剂与annexin V偶联物共同染色,以便区分死细胞和凋亡细胞。CellEvent试剂是一种与核酸结合染料相连的四个氨基酸多肽 (DEVD)。 细胞凋亡期间,caspase-3 和 caspase-7 蛋白激活,可切割 DEVD 多肽之中的编码 caspase 3/7 识别序列。
靶标与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合Caspase 3/7蛋白,死细胞
荧光是;识别序列被切割后,试剂与DNA结合,使凋亡细胞发出明亮的信号
储存室温室温室温室温
染色模式可固定
可渗透活细胞
试剂的 Ex/Em (nm)410/455495/519650/665650/660CellEvent Caspase-3/7: ~511/533;
SYTOX AADvanced: 546/647
推荐激发光源405 nm488 nm633 或 635 nm633 或 635 nmCellEvent Caspase-3/7: 488 nm;
SYTOX AADvanced: 488 nm(蓝色),532 nm(绿色)或 561 nm(黄色)
推荐带通滤波器450/50530/30661/8661/8CellEvent Caspase-3/7: 530/30;
SYTOX AADvanced: 695/40
货 号R37177R37174R37175R37176R37167
 SYTOX Green Ready Flow 试剂Ready Flow 碘化丙啶试剂SYTOX AADvanced Ready Flow 试剂TO-PRO 3 Ready Flow 试剂
读取死细胞在使用试剂标记后发出强荧光,易于与活细胞区分;无需计算,无需稀释,无需移液。
标记原理
细胞膜不完整,试剂能够进入细胞并与核酸结合。
靶标核酸核酸核酸dsDNA
荧光与核酸结合后,荧光增强超过100倍试剂本身无荧光;与核酸结合后,荧光增强 20-30倍与核酸结合后,荧光增强超过500倍试剂本身无荧光;与DNA结合后,荧光增强
储存
室温室温室温室温
染色模式可固定?
可渗透活细胞?
试剂的 Ex/Em (nm)504⁄523535/617546⁄647642/661
推荐激发光源
  • 488 nm(蓝色)
  • 488 nm(蓝色)
  • 532 nm(绿色)
  • 561 nm(黄色)
  • 488 nm(蓝色)
  • 532 nm(绿色)
  • 561 nm(黄色)
  • 633 nm 或 635 nm(红色)
推荐带通滤波器
  • 530/30
  • 574/26
  • 585/16
  • 590/40
  • 620/15
  • 695/40
  • 695/40
  • 670/10
货 号R37168R37169R37173R37170
 Hoechst 33342 Ready Flow 试剂FxCycle Violet Ready Flow试剂Vybrant DyeCycle Violet Ready Flow 试剂
读取

试剂与活细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期分析;无需计算,无需稀释,无需移液。

试剂与固定细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期分析;无需计算,无需稀释,无需移液。

试剂与活细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期和DNA含量分析;无需计算,无需稀释,无需移液。

靶标dsDNAdsDNAdsDNA
标记原理该染色剂是一种DNA小沟结合剂,优先与 DNA 的腺嘌呤-胸腺嘧啶区域结合。染色剂具有细胞渗透性,与双链DNA结合后发出的荧光信号与DNA质量成比例。
荧光试剂本身无荧光。试剂与靶标结合后,荧光大大增强,但对染料结构无修改。
储存室温室温室温
支持活细胞检测?
染色模式可固定?
支持固定细胞检测?
试剂的 Ex/Em (nm)361/497358/461369/437
推荐激发光源UV (350 nm) 或 405 nmUV (350 nm) 或 405 nmUV (350 nm) 或 405 nm
推荐带通滤波器440/50450/50440/40
货 号R37165R37166R37172
 Annexin V
Pacific Blue
Ready Flow试剂
Annexin V
Alexa Fluor 488
Ready Flow试剂
Annexin V
Alexa Fluor 647
Ready Flow试剂
Annexin V
APC
Ready Flow 试剂
CellEvent
Caspase-3/7
Green Ready
Flow试剂盒
读取试剂与凋亡细胞的磷脂酰丝氨酸结合,产生荧光信号;无需计算,无需稀释,无需移液。 荧光底物可检测凋亡细胞的活化型 caspases 3和 7;无需计算,无需稀释,无需移液。 试剂盒包含的 SYTOX AADvanced 死细胞染色剂用于检测死细胞。
标记原理当存在Ca2+ 时,annexin V 偶联物与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸(PS)以高亲和力结合。 annexin V 偶联物还能通过死细胞的破损细胞膜并与细胞内部的PS结合。  建议使用一种非细胞通透性死细胞染色剂与annexin V偶联物共同染色,以便区分死细胞和凋亡细胞。CellEvent试剂是一种与核酸结合染料相连的四个氨基酸多肽 (DEVD)。 细胞凋亡期间,caspase-3 和 caspase-7 蛋白激活,可切割 DEVD 多肽之中的编码 caspase 3/7 识别序列。
靶标与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合Caspase 3/7蛋白,死细胞
荧光是;识别序列被切割后,试剂与DNA结合,使凋亡细胞发出明亮的信号
储存室温室温室温室温
染色模式可固定
可渗透活细胞
试剂的 Ex/Em (nm)410/455495/519650/665650/660CellEvent Caspase-3/7: ~511/533;
SYTOX AADvanced: 546/647
推荐激发光源405 nm488 nm633 或 635 nm633 或 635 nmCellEvent Caspase-3/7: 488 nm;
SYTOX AADvanced: 488 nm(蓝色),532 nm(绿色)或 561 nm(黄色)
推荐带通滤波器450/50530/30661/8661/8CellEvent Caspase-3/7: 530/30;
SYTOX AADvanced: 695/40
货 号R37177R37174R37175R37176R37167

资源

流式细胞分析实验方案

光谱流式基础知识

流式胞内染色示意小视频—细胞因子和核内靶点检测

流式细胞术学习中心—获取流式细胞术学习资源,以轻松计划、顺利开展流式实验。

Panel Builder流式配色工具—这款简单、定制化的在线工具可助您轻松解决多色流式实验的配色难题。

5步法实验资源

支持

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流式配色设计支持—联系赛默飞科学家,讨论您的实验需求、解决您遇到的实验问题。

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