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Invitrogen Ready Flow试剂是即用型溶液,专为用于流式细胞分析的细胞染色而设计,具有如下特性:
使用方便的滴瓶,向每毫升浓度为1 x 106 细胞/mL的单细胞混悬液中加入 2 滴试剂,然后进行孵育和分析。 Ready Flow试剂能够满足您最常见的流式细胞分析需求,包括死细胞鉴定和细胞周期(图 1)分析。 为流式细胞术分析制备样品很容易。
图1: 使用 FxCycle Violet Ready Flow试剂和 InvitrogenClick-iT EdU Alexa Fluor 647 流式细胞分析试剂盒进行细胞周期分析。 使用 10 µM EdU 刺激Jurkat细胞(一种人T细胞白血病细胞株) 2小时,然后使用 Alexa Fluor 647叠氮化物检测。 随后,加入2滴FxCycle Violet Ready Flow试剂并在 25°C 孵育30分钟,完成细胞染色。 利用Invitrogen Attune NxT流式细胞仪的405激光器和440/50 nm发射滤光器采集数据。群体分析显示如下分布:凋亡 sub-G1期细胞为3.4%;G0/G1期为49.1%;S 期为33.0%;G2M 期为14.0%。
SYTOX Green Ready Flow 试剂 | Ready Flow 碘化丙啶试剂 | SYTOX AADvanced Ready Flow 试剂 | TO-PRO 3 Ready Flow 试剂 | |
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读取 | 死细胞在使用试剂标记后发出强荧光,易于与活细胞区分;无需计算,无需稀释,无需移液。 | |||
标记原理 | 细胞膜不完整,试剂能够进入细胞并与核酸结合。 | |||
靶标 | 核酸 | 核酸 | 核酸 | dsDNA |
荧光 | 与核酸结合后,荧光增强超过100倍 | 试剂本身无荧光;与核酸结合后,荧光增强 20-30倍 | 与核酸结合后,荧光增强超过500倍 | 试剂本身无荧光;与DNA结合后,荧光增强 |
储存 | 室温 | 室温 | 室温 | 室温 |
染色模式可固定? | 否 | 否 | 否 | 否 |
可渗透活细胞? | 否 | 否 | 否 | 否 |
试剂的 Ex/Em (nm) | 504⁄523 | 535/617 | 546⁄647 | 642/661 |
推荐激发光源 |
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推荐带通滤波器 |
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货 号 | R37168 | R37169 | R37173 | R37170 |
Hoechst 33342 Ready Flow 试剂 | FxCycle Violet Ready Flow试剂 | Vybrant DyeCycle Violet Ready Flow 试剂 | |
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读取 | 试剂与活细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期分析;无需计算,无需稀释,无需移液。 | 试剂与固定细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期分析;无需计算,无需稀释,无需移液。 | 试剂与活细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期和DNA含量分析;无需计算,无需稀释,无需移液。 |
靶标 | dsDNA | dsDNA | dsDNA |
标记原理 | 该染色剂是一种DNA小沟结合剂,优先与 DNA 的腺嘌呤-胸腺嘧啶区域结合。 | 染色剂具有细胞渗透性,与双链DNA结合后发出的荧光信号与DNA质量成比例。 | |
荧光 | 试剂本身无荧光。试剂与靶标结合后,荧光大大增强,但对染料结构无修改。 | ||
储存 | 室温 | 室温 | 室温 |
支持活细胞检测? | 是 | 否 | 是 |
染色模式可固定? | 否 | 否 | 否 |
支持固定细胞检测? | 是 | 是 | 否 |
试剂的 Ex/Em (nm) | 361/497 | 358/461 | 369/437 |
推荐激发光源 | UV (350 nm) 或 405 nm | UV (350 nm) 或 405 nm | UV (350 nm) 或 405 nm |
推荐带通滤波器 | 440/50 | 450/50 | 440/40 |
货 号 | R37165 | R37166 | R37172 |
Annexin V Pacific Blue Ready Flow试剂 | Annexin V Alexa Fluor 488 Ready Flow试剂 | Annexin V Alexa Fluor 647 Ready Flow试剂 | Annexin V APC Ready Flow 试剂 | CellEvent Caspase-3/7 Green Ready Flow试剂盒 | |
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读取 | 试剂与凋亡细胞的磷脂酰丝氨酸结合,产生荧光信号;无需计算,无需稀释,无需移液。 | 荧光底物可检测凋亡细胞的活化型 caspases 3和 7;无需计算,无需稀释,无需移液。 试剂盒包含的 SYTOX AADvanced 死细胞染色剂用于检测死细胞。 | |||
标记原理 | 当存在Ca2+ 时,annexin V 偶联物与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸(PS)以高亲和力结合。 annexin V 偶联物还能通过死细胞的破损细胞膜并与细胞内部的PS结合。 建议使用一种非细胞通透性死细胞染色剂与annexin V偶联物共同染色,以便区分死细胞和凋亡细胞。 | CellEvent试剂是一种与核酸结合染料相连的四个氨基酸多肽 (DEVD)。 细胞凋亡期间,caspase-3 和 caspase-7 蛋白激活,可切割 DEVD 多肽之中的编码 caspase 3/7 识别序列。 | |||
靶标 | 与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合 | Caspase 3/7蛋白,死细胞 | |||
荧光 | 否 | 否 | 否 | 否 | 是;识别序列被切割后,试剂与DNA结合,使凋亡细胞发出明亮的信号 |
储存 | 室温 | 室温 | 室温 | 室温 | 室 温 |
染色模式可固定 | 否 | 否 | 否 | 否 | 否 |
可渗透活细胞 | 否 | 否 | 否 | 否 | 是 |
试剂的 Ex/Em (nm) | 410/455 | 495/519 | 650/665 | 650/660 | CellEvent Caspase-3/7: ~511/533; SYTOX AADvanced: 546/647 |
推荐激发光源 | 405 nm | 488 nm | 633 或 635 nm | 633 或 635 nm | CellEvent Caspase-3/7: 488 nm; SYTOX AADvanced: 488 nm(蓝色),532 nm(绿色)或 561 nm(黄色) |
推荐带通滤波器 | 450/50 | 530/30 | 661/8 | 661/8 | CellEvent Caspase-3/7: 530/30; SYTOX AADvanced: 695/40 |
货 号 | R37177 | R37174 | R37175 | R37176 | R37167 |
SYTOX Green Ready Flow 试剂 | Ready Flow 碘化丙啶试剂 | SYTOX AADvanced Ready Flow 试剂 | TO-PRO 3 Ready Flow 试剂 | |
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读取 | 死细胞在使用试剂标记后发出强荧光,易于与活细胞区分;无需计算,无需稀释,无需移液。 | |||
标记原理 | 细胞膜不完整,试剂能够进入细胞并与核酸结合。 | |||
靶标 | 核酸 | 核酸 | 核酸 | dsDNA |
荧光 | 与核酸结合后,荧光增强超过100倍 | 试剂本身无荧光;与核酸结合后,荧光增强 20-30倍 | 与核酸结合后,荧光增强超过500倍 | 试剂本身无荧光;与DNA结合后,荧光增强 |
储存 | 室温 | 室温 | 室温 | 室温 |
染色模式可固定? | 否 | 否 | 否 | 否 |
可渗透活细胞? | 否 | 否 | 否 | 否 |
试剂的 Ex/Em (nm) | 504⁄523 | 535/617 | 546⁄647 | 642/661 |
推荐激发光源 |
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推荐带通滤波器 |
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货 号 | R37168 | R37169 | R37173 | R37170 |
Hoechst 33342 Ready Flow 试剂 | FxCycle Violet Ready Flow试剂 | Vybrant DyeCycle Violet Ready Flow 试剂 | |
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读取 | 试剂与活细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期分析;无需计算,无需稀释,无需移液。 | 试剂与固定细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期分析;无需计算,无需稀释,无需移液。 | 试剂与活细胞DNA结合产生荧光信号,可实现细胞周期和DNA含量分析;无需计算,无需稀释,无需移液。 |
靶标 | dsDNA | dsDNA | dsDNA |
标记原理 | 该染色剂是一种DNA小沟结合剂,优先与 DNA 的腺嘌呤-胸腺嘧啶区域结合。 | 染色剂具有细胞渗透性,与双链DNA结合后发出的荧光信号与DNA质量成比例。 | |
荧光 | 试剂本身无荧光。试剂与靶标结合后,荧光大大增强,但对染料结构无修改。 | ||
储存 | 室温 | 室温 | 室温 |
支持活细胞检测? | 是 | 否 | 是 |
染色模式可固定? | 否 | 否 | 否 |
支持固定细胞检测? | 是 | 是 | 否 |
试剂的 Ex/Em (nm) | 361/497 | 358/461 | 369/437 |
推荐激发光源 | UV (350 nm) 或 405 nm | UV (350 nm) 或 405 nm | UV (350 nm) 或 405 nm |
推荐带通滤波器 | 440/50 | 450/50 | 440/40 |
货 号 | R37165 | R37166 | R37172 |
Annexin V Pacific Blue Ready Flow试剂 | Annexin V Alexa Fluor 488 Ready Flow试剂 | Annexin V Alexa Fluor 647 Ready Flow试剂 | Annexin V APC Ready Flow 试剂 | CellEvent Caspase-3/7 Green Ready Flow试剂盒 | |
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读取 | 试剂与凋亡细胞的磷脂酰丝氨酸结合,产生荧光信号;无需计算,无需稀释,无需移液。 | 荧光底物可检测凋亡细胞的活化型 caspases 3和 7;无需计算,无需稀释,无需移液。 试剂盒包含的 SYTOX AADvanced 死细胞染色剂用于检测死细胞。 | |||
标记原理 | 当存在Ca2+ 时,annexin V 偶联物与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸(PS)以高亲和力结合。 annexin V 偶联物还能通过死细胞的破损细胞膜并与细胞内部的PS结合。 建议使用一种非细胞通透性死细胞染色剂与annexin V偶联物共同染色,以便区分死细胞和凋亡细胞。 | CellEvent试剂是一种与核酸结合染料相连的四个氨基酸多肽 (DEVD)。 细胞凋亡期间,caspase-3 和 caspase-7 蛋白激活,可切割 DEVD 多肽之中的编码 caspase 3/7 识别序列。 | |||
靶标 | 与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合 | Caspase 3/7蛋白,死细胞 | |||
荧光 | 否 | 否 | 否 | 否 | 是;识别序列被切割后,试剂与DNA结合,使凋亡细胞发出明亮的信号 |
储存 | 室温 | 室温 | 室温 | 室温 | 室 温 |
染色模式可固定 | 否 | 否 | 否 | 否 | 否 |
可渗透活细胞 | 否 | 否 | 否 | 否 | 是 |
试剂的 Ex/Em (nm) | 410/455 | 495/519 | 650/665 | 650/660 | CellEvent Caspase-3/7: ~511/533; SYTOX AADvanced: 546/647 |
推荐激发光源 | 405 nm | 488 nm | 633 或 635 nm | 633 或 635 nm | CellEvent Caspase-3/7: 488 nm; SYTOX AADvanced: 488 nm(蓝色),532 nm(绿色)或 561 nm(黄色) |
推荐带通滤波器 | 450/50 | 530/30 | 661/8 | 661/8 | CellEvent Caspase-3/7: 530/30; SYTOX AADvanced: 695/40 |
货 号 | R37177 | R37174 | R37175 | R37176 | R37167 |
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