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图1.T 细胞亚群工作流程概述。无需全面的检测组合设计。您只需按照方案生成数据。设门策略可提供相关指导,帮助您在采集事件时找到正确的细胞群。结果将显示指定标记物的 T 细胞阳性或阴性百分比。
T 细胞
CD3:APC-eF780
CD4:APC
CD8:eF450
CD62L:FITC
CCR7:PE
Treg
CD4:FITC
CD25:PerCP-eF710
CD127:PE
Foxp3:eF450
Th1/Th17
CD4:FITC
IL-17:APC
IFN-γ:PE
图2.根据其介导的特定免疫反应,T 细胞可分为亚群组。CD8+ T 细胞通过穿孔素和颗粒酶直接杀死感染的细胞或肿瘤细胞。CD4+ 细胞通过适应性免疫反应调节其他免疫细胞。CD4+ 细胞可通过刺激分化成多种细胞群:例如,产生的 Th1 细胞影响巨噬细胞和 B 细胞并,而产生的 Th17 细胞分泌细胞因子和炎症反应的其他因子。Treg 群组抑制或下调免疫反应。
要在这些试剂盒内运行检测组合,需要仪器采用具有灵活滤光片配置的 2-3 激光系统。以下是大多数传统流式细胞仪可实现的仪器配置示例。
仪器 | 规格 |
---|---|
流式细胞仪 | 激光: 滤光片组: |
表1.运行 eBioscience 基本表型试剂盒所需的仪器规格示例。
A.
B.
C.
图3.从两款流式细胞仪获得的数据示例。从 PBMC 中分离 T 细胞,然后立即冷冻。刺激解冻的 T 细胞并根据方案在所有 3 种 eBioscience 表型试剂盒上染色。然后,由2名不同用户在 Invitrogen Attune NxT 流式细胞仪和 LSRII Fortessa 流式分析仪上检测细胞。通常,为设门和数据分析采集50,000个事件。从两台仪器中将数据导出为 FCS 文件并使用 FlowJo 软件分析。红色框表示感兴趣细胞群。(A) eBioscience 基本人 T 细胞表型试剂盒 (B) eBioscience 基本人 Treg 表型试剂盒 (C) eBioscience 基本人 Th1/Th17 表型试剂盒。
要在这些试剂盒内运行检测组合,需要仪器采用具有灵活滤光片配置的 2-3 激光系统。以下是大多数传统流式细胞仪可实现的仪器配置示例。
仪器 | 规格 |
---|---|
流式细胞仪 | 激光: 滤光片组: |
表1.运行 eBioscience 基本表型试剂盒所需的仪器规格示例。
A.
B.
C.
图3.从两款流式细胞仪获得的数据示例。从 PBMC 中分离 T 细胞,然后立即冷冻。刺激解冻的 T 细胞并根据方案在所有 3 种 eBioscience 表型试剂盒上染色。然后,由2名不同用户在 Invitrogen Attune NxT 流式细胞仪和 LSRII Fortessa 流式分析仪上检测细胞。通常,为设门和数据分析采集50,000个事件。从两台仪器中将数据导出为 FCS 文件并使用 FlowJo 软件分析。红色框表示感兴趣细胞群。(A) eBioscience 基本人 T 细胞表型试剂盒 (B) eBioscience 基本人 Treg 表型试剂盒 (C) eBioscience 基本人 Th1/Th17 表型试剂盒。
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