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如前所述,Invitrogen™Gateway™ 克隆的核心是入门载体。一旦准备好入门克隆,就可以将目标基因轻松地穿梭至第二个质粒,即目标载体。该反应由称为 LR Clonase™ 的强大酶混合物介导,该混合物具有必要的蛋白质活性,可以从入门克隆中切除目标基因,并将其整合到目标载体中,然后成为您的表达克隆(图 1)。逆转该反应仅需要与 BP Clonase 酶混合物进行 BP 反应。LR 和 BP Clonase 酶混合物均可提供可即时使用的预混液形式,可确保反应之间的一致性和可靠性。
Gateway BP Clonase 酶同时包含 Int(整合酶)和 IHF(整合宿主因子)蛋白,它们催化来自克隆(包含 attB 位点)和供体载体(包含 attP 位点)的 PCR 产物或 DNA 片段的体外重组,从而产生入门克隆。查看下列选择指南,为你的研究目标查找最合适的 BP Clonase™ 酶。
Gateway LR Clonase II 酶混合物包含 Int(整合酶)、IHF(整合宿主因子)和 Xis(切除酶)酶的专有混合物,这些酶催化入门克隆(包含带有 atLL 位点的目标基因)和目标载体(包含 atRR 位点)之间的体外重组,以生成表达克隆。我们提供不同规格的 LR Clonase 酶混合物,具体取决于您的应用和所需规格。查看下列选择指南,为你的研究目标查找最合适的 LP Clonase 酶。
图 1.Gateway 反应。
等级 | 酶 | 产品规格 | 优势 |
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LR Clonase 酶混合物 | |||
最佳 | LR Clonase II Plus 酶混合物 | 酶和反应缓冲液的单一混合物 |
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非常好 | LR Clonase II 酶混合物 | 酶和反应缓冲液的单一混合物 |
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好 | LR Clonase 酶 | 酶 5X 反应缓冲液 |
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BP Clonase 酶混合物 | |||
最佳 | BP Clonase II 酶混合物 | 酶和反应缓冲液的单一混合物 |
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好 | BP Clonase 酶 | 酶 5X 反应缓冲液 |
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