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克隆酶
介导重组反应
如前所述，Invitrogen™Gateway™ 克隆的核心是入门载体。一旦准备好入门克隆，就可以将目标基因轻松地穿梭至第二个质粒，即目标载体。该反应由称为 LR Clonase™ 的强大酶混合物介导，该混合物具有必要的蛋白质活性，可以从入门克隆中切除目标基因，并将其整合到目标载体中，然后成为您的表达克隆（图 1）。逆转该反应仅需要与 BP Clonase 酶混合物进行 BP 反应。LR 和 BP Clonase 酶混合物均可提供可即时使用的预混液形式，可确保反应之间的一致性和可靠性。
Clonase 酶的类型
Gateway BP Clonase 酶混合物
Gateway BP Clonase 酶同时包含 Int（整合酶）和 IHF（整合宿主因子）蛋白，它们催化来自克隆（包含 attB 位点）和供体载体（包含 attP 位点）的 PCR 产物或 DNA 片段的体外重组，从而产生入门克隆。查看下列选择指南，为你的研究目标查找最合适的 BP Clonase™ 酶。
Gateway LR Clonase 酶混合物
Gateway LR Clonase II 酶混合物包含 Int（整合酶）、IHF（整合宿主因子）和 Xis（切除酶）酶的专有混合物，这些酶催化入门克隆（包含带有 atLL 位点的目标基因）和目标载体（包含 atRR 位点）之间的体外重组，以生成表达克隆。我们提供不同规格的 LR Clonase 酶混合物，具体取决于您的应用和所需规格。查看下列选择指南，为你的研究目标查找最合适的 LP Clonase 酶。
图 1.Gateway 反应。
Clonase 酶选择指南
| 等级 | 酶 | 产品规格 | 优势 |
|---|---|---|---|
| LR Clonase 酶混合物 | |||
| 最佳 | LR Clonase II Plus 酶混合物 | 酶和反应缓冲液的单一混合物 |
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| 非常好 | LR Clonase II 酶混合物 | 酶和反应缓冲液的单一混合物 |
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| 好 | LR Clonase 酶 | 酶 5X 反应缓冲液 |
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| BP Clonase 酶混合物 | |||
| 最佳 | BP Clonase II 酶混合物 | 酶和反应缓冲液的单一混合物 |
|
| 好 | BP Clonase 酶 | 酶 5X 反应缓冲液 |
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相关资源
克隆工具和资源 | 相关产品手册 |