序列特异性 DNA 和 RNA 结合蛋白(如启动子、基因调节蛋白和转录因子)在正常细胞控制和病情(如癌症和特定遗传疾病)中至关重要。这些调节蛋白是潜在的药物靶点,但由于这些蛋白通常寿命短且稀缺,因此需要采用一种快速、灵敏的纯化方法。
要简单、快速、可靠地纯化序列特异性 DNA 或 RNA 结合蛋白,链霉亲和素偶联 Dynabeads 磁珠是个不错的选择。
为何选择链霉亲和素偶联 Dynabeads 磁珠来分离 DNA/RNA 结合蛋白?
- 灵敏、快速且方便的磁性固相操作
- 在30分钟内分离纯净、均质的转录因子
- 只需一个吸附步骤,即可获得高得率蛋白
- 富集多达20,000倍的 DNA 和 RNA 结合蛋白
- 通过链霉亲和素-生物素结合将 DNA 偶联到 Dynabeads 磁珠上,这一操作至少可以重复使用十次
Dynabeads 磁珠上的 DNA 具有较高的稳定性和结合能力,因此,它与靶蛋白的结合具有与游离溶液中的 DNA 类似的动力学
它的工作原理是什么?
将生物素标记的 DNA/RNA 靶序列固定到磁珠上,与细胞提取物一起孵育。随后您可以使用磁性分离法分离结合蛋白。您可以将蛋白质洗脱下来进行特性鉴定,也可以将整个固相复合物直接用于(例如)DNase 足迹研究。
部分参考文献
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