如何使用链霉亲和素偶联 Dynabeads磁珠捕获特定的 RNA 和 DNA 序列

Invitrogen 链霉亲和素偶联 Dynabeads 磁珠是一种强大的多功能工具，可用于捕获特定 RNA 或 DNA 序列，然后将其直接从溶液中提取出来。这些单一尺寸的超顺磁性 Dynabeads 为硝酸纤维素膜提供了高效的固相替代方法，可为您提供优异的产物质量和数据一致性。优异的近液相反应动力学，可实现超快速实验方案。磁性处理固有的简便性使得下游操作和缓冲液更换非常简单，只需要使用磁力架将磁珠结合靶标吸附浓缩到管壁上，然后丢弃上清液即可。这些磁珠可兼容非常广泛的样本类型，包括大多数体液，植物、动物和微生物来源的粗裂解物，以及纯化的总 RNA 或 DNA。由于这些 Dynabeads 磁珠仅与特异性靶向的 RNA 或 DNA 分子相互作用，因此几乎都不需要进行上游总 RNA 或 DNA 纯化。详细了解30,000多份研究文献引用链霉亲和素偶联 Dynabeads磁珠 的原因。

序列特异性 DNA 捕获

直接捕获流程涉及到将双链 PCR 产物固定在磁珠上。这些产物可轻松转化为单链磁珠结合模板，然后用于直接从溶液中捕获特定 RNA 或 DNA 分子。 

在某些情况下，通过另一种间接捕获方法可实现更快的反应动力学。这种间接捕获方法可以在靶标固定到磁珠之前捕获靶标序列。首先，将生物素化捕获序列（单链 DNA）与样本一起孵育，让其与溶液中的靶标 RNA 或 DNA 分子杂交。然后将链霉亲和素包被的 Dynabeads 磁珠加入混合物中，杂交序列会通过链霉亲和素-生物素键固定到 Dynabeads 磁珠上。

每毫克 1μm Dynabeads MyOne 链霉亲和素 C1磁珠 具有非常大的表面积，可高度富集低丰度 RNA 或 DNA。需要从粘稠度更高的样本（如脑脊液）中捕获核酸时，建议使用尺寸更大的 2.8 μm Dynabeads M-270 链霉亲和素磁珠。 这些 Dynabeads（MyOne 链霉亲和素 C1 和 M-270 链霉亲和素）磁珠经过优化设计，具有略带负电的表面，可以确保非靶标核酸序列的非特异性结合可忽略不计。

应用实例包括：RNA/DNA 致病因子分离 (1,2,3,4)、消减杂交 (5,6,7)、cDNA 筛选和富集、突变序列检测和分离 (8,9,10)、细胞特异性转录本分离以及 mRNA 差异显示。

了解有关核酸捕获测定的更多信息

部分参考文献

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