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Invitrogen PureLink Expi 无内毒素质粒纯化试剂盒采用新型专有阴离子交换树脂,以现行标准方案约一半的时间分离高级转染级质粒 DNA。增强型树脂结合真空辅助工作流程将纯化时间大大缩短至 2 小时内。该方案快速、简单,旨在提供高达 1.5 mg(maxiprep)、5 mg(megaprep)或高达 15 mg(gigaprep)的高品质无内毒素质粒 DNA,适用于敏感细胞系的转染或体内实验等高级转染应用。PureLink Expi Endotoxin-Free 试剂盒与 Gibco ExpiCHO 和 Expi293 瞬时哺乳动物表达系统兼容。
图 1.与竞争对手的试剂盒相比,使用 PureLink Expi 试剂盒可获得高产量的无内毒素高级转染级质粒 DNA。根据产品手册的描述,使用 PureLink Expi 和 Qiagen 无内毒素大提、超大量和 宏量试剂盒纯化两个具有不同骨架的高拷贝数质粒。DNA 的产量数据如图所示;仅提供了 PureLink Expi 试剂盒纯化的内毒素值(EU/μg)。
图 2.快速纯化高产量无内毒素质粒 DNA。与 Qiagen 无内毒素试剂盒相比,PureLink Expi 试剂盒可以更短的时间获得高产量、高级转染级无内毒素质粒 DNA。与 Qiagen 无内毒素 重力流试剂盒相比,先进的阴离子交换技术和真空辅助功能相结合,缩短了整体方案时间。
图 3.质粒 DNA 适用于敏感细胞系的转染。众所周知,肝细胞系 Huh7 在转染期间对内毒素水平非常敏感。使用荧光素酶表达质粒对 Huh7 细胞进行转染,并采用 PureLink Expi 系统或 Qiagen EndoFree 系统进行纯化,然后对其荧光素酶活性进行测量。
图 4.使用 PureLink Expi 试剂盒纯化的质粒 DNA 与 Gibco Expi293 和 ExpiCHO 表达系统兼容。基于 Expi293 和 ExpiCHO 表达系统,使用兔 IgG 重链和轻链质粒的阳性对照对细胞进行转染,其中这些质粒采用 PureLink Expi megaprep 试剂盒或 Qiagen EndoFree mega prep 试剂盒进行纯化。上述滴度值在 Expi 表达系统的预期输出范围内。
观看有关如何纯化质粒 DNA 的 4 分钟视频。它将向您展示如何获得快速、高质量、无内毒素的质粒 DNA。
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