组织染色

Arcturus® HistoGene® LCM 冷冻切片染色试剂盒包含制备用于激光捕获显微切割 (LCM) 的冷冻组织切片所需的所有试剂和用品。该试剂盒设计为快速渗透染剂，可提供出色的对比度，同时保持核酸完整性并保留低丰度 mRNA。

每个试剂盒包含：

• HistoGene® 染色液
• 100%、95%、75% 乙醇
• 二甲苯
• 一次性玻片染色瓶
• HistoGene® LCM 玻片
• 经验证的实验方案

保留低丰度 mRNA
对从使用 HistoGene® 试剂盒处理过的组织中捕获的细胞之特定基因进行 RT-PCR 分析，结果显示既保留了低丰度 mRNA，又保留了较高丰度的物种（图 1）。HistoGene® 试剂盒样本的 mRNA 图谱显示无降解。

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图 1.HistoGene® 样本中低丰度 mRNA 的检测。对从小鼠肝脏和肾脏中捕获的 500 个细胞的 RNA 进行 RT-PCR 分析。使用三个引物组对等量的 cDNA 进行分析：延伸因子 1-a（EF-1a，高丰度基因，~3,000 拷贝/细胞，187 bp）、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH，中丰度基因，300–3,000 拷贝/细胞，357 bp）和蛋白磷酸酶 1（PP1，低丰度基因，<300 拷贝/细胞，498 bp）。在 6% 丙烯酰胺凝胶上运行样本，并使用 SYBR® Gold 核酸凝胶染色剂 (Life Technologies) 进行染色。M：分子量标记。1：肾脏 EF-1a。2：肝脏 EF-1a。3：肾脏 GAPDH。4：肝脏 GAPDH。5：肾脏 PP1。6：肝脏 PP1。7：肝脏 EF-1a，无 RT 对照。8：无 RT 模板对照。

从多种组织类型中获得高质量 RNA
已通过检查组织类型扩展列表中的 RNA 完整性，对 HistoGene® 试剂盒进行了验证。迄今为止使用 HistoGene® 试剂盒检测的所有组织均获得了高质量的 RNA（表 1）。

表 1.通过 HistoGene® 试剂盒验证的组织。

Arcturus® HistoGene® LCM 免疫荧光染色试剂盒设计用于在 15 分钟内，从免疫荧光染色的冷冻组织中收集高质量核酸。该试剂盒提供了便捷、可靠的免疫荧光染色试剂和玻片以及经过简化和优化的方案，可保持核酸质量。

每个试剂盒均提供足够用于 32 张玻片染色的材料，包括：

• HistoGene® 缓冲液 A (4 mL)
• HistoGene® 缓冲液 B (60 mL)
• HistoGene® Cy®3 链霉素亲和素 (60 μL)
• 72 HistoGene® LCM 免疫荧光染色玻片
• 用户指南

出色的高对比度标记强度
HistoGene® LCM 免疫荧光染色试剂盒使用生物素-亲和素系统以及 Cy®3 染料，可实现非常好的染色强度和特异性。该染色试剂盒与用户提供的选定抗原的生物素化单克隆一抗配合使用，试剂盒中还含有 Cy®3 结合链霉素亲和素（图 2）。

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图 2.使用 HistoGene® LCM 免疫荧光染色试剂盒标识靶细胞。(A) 抗 CD1a 抗体染色的人包皮组织。(B) 抗广谱细胞角蛋白抗体染色的人空肠组织。(C) 抗 CD4 抗体染色的小鼠泪腺炎性体浸润物。(D) 抗 MAdCAM-1 抗体染色的小鼠小肠组织。

从多种组织类型中获得高质量 RNA
已在其他类型的组织样本中，对 HistoGene® LCM 免疫荧光染色试剂盒对 RNA 的完整性进行了验证。使用本试剂盒检测的所有组织均获得了高质量的 RNA（表 2）。


表 2.经过验证的组织-抗体组。

Arcturus® Paradise® PLUS FFPE LCM 染色试剂盒提供了一种简单的解决方案，开发用于在进行激光捕获显微切割 (LCM) 和下游分子分析之前对福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织进行染色。FFPE 样本为基因表达谱分析带来了挑战，包括 RNA 分子的化学修饰和片段化。由于 RNA 降解随时间推移增加，因此长时间保存的FFPE 样本也成为挑战之一。