Arcturus® LCM 流程概述

采用红外激光的激光捕获显微切割 (LCM) 技术经证明适用于多种不同的细胞类型。该流程非常简单实用,专用于 Applied Biosystems® Arcturus® LCM 仪器。Arcturus® LCM 方法非常温和,是单细胞或少量细胞显微切割的理想选择。本系统独特地结合了 红外 和紫外激光切割方法,可实现极佳的显微切割灵活性。

仅需 4 步即可捕获细胞并回收生物分子

Capture Cells and Recover Biomolecules 在定位感兴趣细胞后,将 CapSure® 收集帽移动至目标区域上。红外激光穿过收集帽会致使热塑性薄膜形成薄薄的凸起,从而桥接收集帽与样本组织之间的间隙并粘附至目标细胞。提起收集帽便可分离出捕获的目标细胞。分离得到的细胞即可用于生物分子萃取。

适用于微基因组学的综合系统®

Arcturus® 激光捕获显微切割 (LCM) 系统、仪器和微基因组学试剂的组合为您的微基因组学研究带来全面的解决方案。

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实验工作流程:查找每一步所需的产品

为了标识用于 LCM 的目标细胞,使用组织制备试剂盒对组织进行染色,以帮助标识和溯源后期分析用的生物分子。

第一步所需的产品

 HistoGene® LCM 冷冻切片染色试剂盒
HistoGene® 染色剂是进行 LCM 用组织染色的特殊解决方案,染色组织随后可用作 RNA、DNA 和蛋白质提取源。它是一种快速渗透染色剂,通过区分细胞核(紫色)与细胞质(浅粉色)提供良好的对比度。HistoGene® 染色流程将组织暴露于水的可能降到极低(在水中核酸酶可能被激活),有助于保持 RNA 完整性,如果使用耗时较长的染色方案,RNA 完整性可能受损。

 
HistoGene® LCM 免疫荧光染色试剂盒
使用抗原标志物突出显示特定表面或细胞内蛋白质,可标识 LCM 和基因表达分析用的目标细胞。HistoGene® LCM 免疫荧光染色试剂盒是仅有的一款专门设计用于从免疫荧光染色冷冻组织中获取高质量 RNA 的试剂盒。

 
Paradise® PLUS FFPE LCM 染色试剂盒
Paradise® 染色剂是进行 LCM 用福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织染色的特殊解决方案,染色组织随后可用作 RNA、DNA 和蛋白质提取来源。快速穿透型染色剂通过区分细胞核(紫色)与细胞质(浅粉色)提供良好的对比度。Paradise® 染色流程将组织暴露于水的可能降到极低(在水中核酸酶可能被激活),有助于保持 RNA 完整性,如果使用耗时较长的染色方案,RNA 完整性可能受损。

组织染色后,使用专用的显微切割软件定位和选择感兴趣细胞。红外激光可激活放置在组织样本上的盖子的转移膜,使膜粘附到选择的下层细胞上。然后,将感兴趣细胞从组织切片中分离出,留下所有不需要的细胞,并为细胞特异性分子分析提供纯细胞群。

第二步所需的产品

 Arcturus Cellect LCM 系统
Arcturus Cellect 系统将红外 (IR) 激光和紫外 (UV) 激光切割结合在一个激光捕获显微切割平台中。Arcturus Cellect 系统的集成式设计提供了优异的研究灵活性和多功能性。系统允许研究人员在整个实验中维持对样本的监控,确保仅收集了所需的材料,从而消除了显微切割流程的不确定性。

 
CapSure® LCM 收集帽
CapSure® LCM 收集帽可通过 Arcturus® 激光捕获显微切割,从组织切片和细胞学样本中精确快速地提取纯细胞群。

从样品中纯化 DNA 或 RNA 以用于下游分析。

第三步所需的产品

 PicoPure® DNA 提取试剂盒
PicoPure® DNA 提取试剂盒可提供生成 PCR 即用型 DNA 的简单、简化基因组提取流程。在同一管中提取和扩增 DNA,无需进行有机提取或使用离心柱。通过激光捕获显微切割 (LCM) 或从数毫克组织获得的少至十个细胞中回收 DNA。

 
PicoPure® RNA 分离试剂盒
PicoPure® RNA 分离试剂盒设计用于从少于 10 个细胞中始终如一地回收高质量总 RNA,可搭配使用含皮克级 RNA 的小样本以及含至多 100 µg RNA 的样本。由于 RNA 在少至 10 µL 的缓冲液中洗脱,其可随即用于基因表达分析,而无需任何真空浓缩。

扩增 DNA 或 RNA 以用于分子分析。

第四步所需的产品

 RiboAmp® PLUS RNA 扩增试剂盒
RiboAmp® PLUS RNA 扩增试剂盒可从总 RNA 量少至 1 ng 的样本中进行独特的线性扩增。采用专有的待决专利流程进行高效、高保真线性扩增,使信使 RNA 在一轮合成中扩增达 1,000 倍,在两轮合成中扩增达 1,000,000 倍。RiboAmp® PLUS 试剂盒生成扩增反义 RNA (aRNA),可直接用于标记和芯片杂交或 qRT-PCR。

 
RiboAmp® HS PLUS 扩增试剂盒

目前,对于因样本量过小而无法进行芯片分析的 RNA 样本,您可借助于 RiboAmp® PLUS RNA 扩增试剂盒进行分子分析。该试剂盒可从少至 1 ng 的总 RNA 中实现独特的线性扩增。

为了标识用于 LCM 的目标细胞,使用组织制备试剂盒对组织进行染色,以帮助标识和溯源后期分析用的生物分子。

第一步所需的产品

 HistoGene® LCM 冷冻切片染色试剂盒
HistoGene® 染色剂是进行 LCM 用组织染色的特殊解决方案,染色组织随后可用作 RNA、DNA 和蛋白质提取源。它是一种快速渗透染色剂,通过区分细胞核(紫色)与细胞质(浅粉色)提供良好的对比度。HistoGene® 染色流程将组织暴露于水的可能降到极低(在水中核酸酶可能被激活),有助于保持 RNA 完整性,如果使用耗时较长的染色方案,RNA 完整性可能受损。

 
HistoGene® LCM 免疫荧光染色试剂盒
使用抗原标志物突出显示特定表面或细胞内蛋白质,可标识 LCM 和基因表达分析用的目标细胞。HistoGene® LCM 免疫荧光染色试剂盒是仅有的一款专门设计用于从免疫荧光染色冷冻组织中获取高质量 RNA 的试剂盒。

 
Paradise® PLUS FFPE LCM 染色试剂盒
Paradise® 染色剂是进行 LCM 用福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织染色的特殊解决方案,染色组织随后可用作 RNA、DNA 和蛋白质提取来源。快速穿透型染色剂通过区分细胞核(紫色)与细胞质(浅粉色)提供良好的对比度。Paradise® 染色流程将组织暴露于水的可能降到极低(在水中核酸酶可能被激活),有助于保持 RNA 完整性,如果使用耗时较长的染色方案,RNA 完整性可能受损。

组织染色后,使用专用的显微切割软件定位和选择感兴趣细胞。红外激光可激活放置在组织样本上的盖子的转移膜,使膜粘附到选择的下层细胞上。然后,将感兴趣细胞从组织切片中分离出,留下所有不需要的细胞,并为细胞特异性分子分析提供纯细胞群。

第二步所需的产品

 Arcturus Cellect LCM 系统
Arcturus Cellect 系统将红外 (IR) 激光和紫外 (UV) 激光切割结合在一个激光捕获显微切割平台中。Arcturus Cellect 系统的集成式设计提供了优异的研究灵活性和多功能性。系统允许研究人员在整个实验中维持对样本的监控,确保仅收集了所需的材料,从而消除了显微切割流程的不确定性。

 
CapSure® LCM 收集帽
CapSure® LCM 收集帽可通过 Arcturus® 激光捕获显微切割,从组织切片和细胞学样本中精确快速地提取纯细胞群。

从样品中纯化 DNA 或 RNA 以用于下游分析。

第三步所需的产品

 PicoPure® DNA 提取试剂盒
PicoPure® DNA 提取试剂盒可提供生成 PCR 即用型 DNA 的简单、简化基因组提取流程。在同一管中提取和扩增 DNA,无需进行有机提取或使用离心柱。通过激光捕获显微切割 (LCM) 或从数毫克组织获得的少至十个细胞中回收 DNA。

 
PicoPure® RNA 分离试剂盒
PicoPure® RNA 分离试剂盒设计用于从少于 10 个细胞中始终如一地回收高质量总 RNA,可搭配使用含皮克级 RNA 的小样本以及含至多 100 µg RNA 的样本。由于 RNA 在少至 10 µL 的缓冲液中洗脱,其可随即用于基因表达分析,而无需任何真空浓缩。

扩增 DNA 或 RNA 以用于分子分析。

第四步所需的产品

 RiboAmp® PLUS RNA 扩增试剂盒
RiboAmp® PLUS RNA 扩增试剂盒可从总 RNA 量少至 1 ng 的样本中进行独特的线性扩增。采用专有的待决专利流程进行高效、高保真线性扩增,使信使 RNA 在一轮合成中扩增达 1,000 倍,在两轮合成中扩增达 1,000,000 倍。RiboAmp® PLUS 试剂盒生成扩增反义 RNA (aRNA),可直接用于标记和芯片杂交或 qRT-PCR。

 
RiboAmp® HS PLUS 扩增试剂盒

目前,对于因样本量过小而无法进行芯片分析的 RNA 样本,您可借助于 RiboAmp® PLUS RNA 扩增试剂盒进行分子分析。该试剂盒可从少至 1 ng 的总 RNA 中实现独特的线性扩增。