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NuPAGE Tris-乙酸预制胶规格
| 可选凝胶规格 | 小型胶：8 cm x 8 cm (1 或 1.5 mm 厚) 中型胶：8 cm x 13 cm (1 mm 厚) |
| 储存条件 | 室温 |
| 有效期 | 8 个月 |
| 推荐的上样缓冲液 | SDS-PAGE：NuPAGE LDS 上样缓冲液 Native-PAGE：Novex Tris-甘氨酸非变性上样缓冲液 |
| 推荐的电泳缓冲液 | SDS-PAGE：NuPAGE Tris-乙酸 SDS 电泳缓冲液 Native-PAGE：Novex Tris-甘氨酸非变性电泳缓冲液 |
| 推荐的转印缓冲液 | NuPAGE 转印缓冲液 |
| 凝胶体系 | Tris-乙酸 |
| 可选的聚丙烯酰胺浓度 | 7%, 3–8% |
| 分离范围（变性） | 30-500 kDa |
| 与小型胶配套的电泳槽（设备） | Mini Gel Tank 小型电泳槽 或 XCell SureLock 小型电泳槽 |
| 与中型胶配套的电泳槽（设备） | Invitrogen XCell4 SureLock 中型电泳槽或 Bio-Rad Criterion 电泳槽（需搭配转接头） |
| 分离方式 | 分子量 |
| 应用 | SDS-PAGE, Native-PAGE |
| 孔类型* | 小型：10, 12, 15 孔 中型：12+2, 20, 26 孔 |
*并非每种上样孔类型都提供所有浓度的凝胶
可靠地分离和转印高分子量（HMW）蛋白是生命科学研究人员面临的普遍挑战。选择正确的凝胶是成功转印 HMW 蛋白的关键因素。流行的通用凝胶是 4％ 至 20％ 的 Tris-甘氨酸预制胶，可有效分离多种蛋白质。但是，HMW 蛋白将被压缩到凝胶顶部的狭窄区域。对于 HMW 蛋白，更好的选择是 Tris-乙酸预制胶或低百分比的非梯度 Tris-甘氨酸或 Bis-Tris 预制胶。当专门分析 HMW 蛋白时，可以使用 Tris-乙酸预制胶实现最佳转印效果。
与 Bis-Tris 或 Tris-甘氨酸预制胶相比，Tris-乙酸预制胶保持中性 pH 值并以更高的分辨率分离 HMW 蛋白。通过比较不同凝胶体系和梯度分离 HMW 蛋白质的效果，可以看到3–8％ 的 Tris-乙酸凝胶对 HMW 蛋白质的分离效果和分辨率是最理想的。这种分辨率的提升会带来更高的转印效率和更高的灵敏度。
Tris-乙酸凝胶分离 HMW 蛋白的效果最佳。(A) 在黄色阴影区域获得理想的分离结果。(B) 在 4–20％ 的 Tris-甘氨酸凝胶上使用 tris-乙酸凝胶可观察到更好的转印：在 Tris-乙酸凝胶上显示 9 ng，而在 tris-甘氨酸梯度凝胶上显示 620 ng。
NuPAGE Tris-乙酸预制胶适合用于在凝胶电泳过程中，优化高分子量蛋白质的分离。与传统的 Tris-甘氨酸 SDS-PAGE 凝胶相比，NuPAGE Tris-乙酸凝胶的 pH 值为 8.1，可最大程度地减少蛋白质修饰并获得更锐利的条带。
NuPAGE Tris-乙酸预制胶的优势包括：
- 高分辨率—优化高分子量蛋白质的分离
- 更好的蛋白质完整性—样品前处理过程经过优化，有助于保护蛋白质完整性
- 保质期更长—凝胶可以在室温下储存至少 8 个月
NuPAGE Tris-乙酸预制胶不含 SDS，可用于变性或非变性蛋白的分离。对于变性蛋白，我们推荐使用 LDS 上样缓冲液以及 tris-乙酸 SDS 电泳缓冲液。对于非变性蛋白质，应使用传统的 Tris-甘氨酸非变性上样缓冲液和 Tris-甘氨酸非变性电泳缓冲液。
NuPAGE Tris-乙酸预制胶使用含有以下三种离子的非连续缓冲液体系：
- 乙酸盐 (–) 来自凝胶缓冲液，并因其相对于体系中其他阴离子与阳极之间有更强的亲和力而作为前导离子。凝胶缓冲液离子有 tris (+) 和乙酸盐 (–) (pH 7.0)。
- Tricine（–）来自电泳缓冲液，用作尾随离子。电泳缓冲液离子有 tris (+)、tricine (–) 以及十二烷基硫酸盐 (pH 8.3)。
- Tris (+) 是凝胶缓冲液和电泳缓冲液中常见的离子。电泳过程中，Tris-乙酸体系的工作 pH 值也显著降低为 8.1。
更好的样品完整性
样品前处理是成功进行蛋白质分析的关键步骤。在 100°C 加热时，传统 Laemmli 型样品缓冲液的 pH 值从 6.8 变为 5.2。 已知较低的 pH 值可诱导天冬氨酰-脯氨酰（Asp-Pro）肽键裂解，从而导致蛋白质降解。通过维护大于 7.0 的 pH 环境，InvitrogenNuPAGE LDS 上样缓冲液通过最小化 Asp-Pro 裂解来保持蛋白质完整性。在整个电泳过程中，使用 Invitrogen NuPAGE 体系可保持样品完整性；用 Laemmli（tris-甘氨酸）上样缓冲液制备的样品中可见蛋白质降解。Invitrogen NuPAGE 抗氧化剂电泳缓冲液添加剂可在电泳过程中最大程度地减少蛋白质氧化，并保持还原的蛋白质条带清晰锐利。
正在使用 Tris-甘氨酸或 Tricine 预制胶？使用下面的 NuPAGE 凝胶转换指南来查找合适的 NuPAGE 预制胶和相应的优化缓冲液。
NuPAGE 凝胶转换指南
| 如果您正在使用： | 推荐的 NuPAGE 预制胶： | 缓冲液体系 |
|---|---|---|
| Tris-甘氨酸预制胶 | ||
| 4% | NuPAGE 3-8% Tris-乙酸 | Tris-乙酸 |
| 6% | NuPAGE 3-8% Tris-乙酸 | Tris-乙酸 |
| 10% | NuPAGE 8% Bis-Tris | MOPS |
| NuPAGE 10% Bis-Tris | MOPS | |
| 12% | NuPAGE 10% Bis-Tris | MOPS |
| 14% | NuPAGE 12% Bis-Tris | MOPS |
| 16% | NuPAGE 12% Bis-Tris | MES |
| 18% | NuPAGE 12% Bis-Tris | MES |
| 4-12% | NuPAGE 3-8% Tris-乙酸 | Tris-乙酸 |
| NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MOPS | |
| 4-20% | NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MES |
| 8-16% | NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MOPS |
| 10-20% | NuPAGE 12% Bis-Tris | MOPS |
| Tricine 预制胶 | ||
| 10% | NuPAGE 8% Bis-Tris | MES |
| NuPAGE 10% Bis-Tris | MES | |
| 16% | NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MES |
| 10-20% | NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MES |
NuPAGE Tris-乙酸预制胶规格
| 可选凝胶规格 | 小型胶：8 cm x 8 cm (1 或 1.5 mm 厚) 中型胶：8 cm x 13 cm (1 mm 厚) |
| 储存条件 | 室温 |
| 有效期 | 8 个月 |
| 推荐的上样缓冲液 | SDS-PAGE：NuPAGE LDS 上样缓冲液 Native-PAGE：Novex Tris-甘氨酸非变性上样缓冲液 |
| 推荐的电泳缓冲液 | SDS-PAGE：NuPAGE Tris-乙酸 SDS 电泳缓冲液 Native-PAGE：Novex Tris-甘氨酸非变性电泳缓冲液 |
| 推荐的转印缓冲液 | NuPAGE 转印缓冲液 |
| 凝胶体系 | Tris-乙酸 |
| 可选的聚丙烯酰胺浓度 | 7%, 3–8% |
| 分离范围（变性） | 30-500 kDa |
| 与小型胶配套的电泳槽（设备） | Mini Gel Tank 小型电泳槽 或 XCell SureLock 小型电泳槽 |
| 与中型胶配套的电泳槽（设备） | Invitrogen XCell4 SureLock 中型电泳槽或 Bio-Rad Criterion 电泳槽（需搭配转接头） |
| 分离方式 | 分子量 |
| 应用 | SDS-PAGE, Native-PAGE |
| 孔类型* | 小型：10, 12, 15 孔 中型：12+2, 20, 26 孔 |
*并非每种上样孔类型都提供所有浓度的凝胶
可靠地分离和转印高分子量（HMW）蛋白是生命科学研究人员面临的普遍挑战。选择正确的凝胶是成功转印 HMW 蛋白的关键因素。流行的通用凝胶是 4％ 至 20％ 的 Tris-甘氨酸预制胶，可有效分离多种蛋白质。但是，HMW 蛋白将被压缩到凝胶顶部的狭窄区域。对于 HMW 蛋白，更好的选择是 Tris-乙酸预制胶或低百分比的非梯度 Tris-甘氨酸或 Bis-Tris 预制胶。当专门分析 HMW 蛋白时，可以使用 Tris-乙酸预制胶实现最佳转印效果。
与 Bis-Tris 或 Tris-甘氨酸预制胶相比，Tris-乙酸预制胶保持中性 pH 值并以更高的分辨率分离 HMW 蛋白。通过比较不同凝胶体系和梯度分离 HMW 蛋白质的效果，可以看到3–8％ 的 Tris-乙酸凝胶对 HMW 蛋白质的分离效果和分辨率是最理想的。这种分辨率的提升会带来更高的转印效率和更高的灵敏度。
Tris-乙酸凝胶分离 HMW 蛋白的效果最佳。(A) 在黄色阴影区域获得理想的分离结果。(B) 在 4–20％ 的 Tris-甘氨酸凝胶上使用 tris-乙酸凝胶可观察到更好的转印：在 Tris-乙酸凝胶上显示 9 ng，而在 tris-甘氨酸梯度凝胶上显示 620 ng。
NuPAGE Tris-乙酸预制胶适合用于在凝胶电泳过程中，优化高分子量蛋白质的分离。与传统的 Tris-甘氨酸 SDS-PAGE 凝胶相比，NuPAGE Tris-乙酸凝胶的 pH 值为 8.1，可最大程度地减少蛋白质修饰并获得更锐利的条带。
NuPAGE Tris-乙酸预制胶的优势包括：
- 高分辨率—优化高分子量蛋白质的分离
- 更好的蛋白质完整性—样品前处理过程经过优化，有助于保护蛋白质完整性
- 保质期更长—凝胶可以在室温下储存至少 8 个月
NuPAGE Tris-乙酸预制胶不含 SDS，可用于变性或非变性蛋白的分离。对于变性蛋白，我们推荐使用 LDS 上样缓冲液以及 tris-乙酸 SDS 电泳缓冲液。对于非变性蛋白质，应使用传统的 Tris-甘氨酸非变性上样缓冲液和 Tris-甘氨酸非变性电泳缓冲液。
NuPAGE Tris-乙酸预制胶使用含有以下三种离子的非连续缓冲液体系：
- 乙酸盐 (–) 来自凝胶缓冲液，并因其相对于体系中其他阴离子与阳极之间有更强的亲和力而作为前导离子。凝胶缓冲液离子有 tris (+) 和乙酸盐 (–) (pH 7.0)。
- Tricine（–）来自电泳缓冲液，用作尾随离子。电泳缓冲液离子有 tris (+)、tricine (–) 以及十二烷基硫酸盐 (pH 8.3)。
- Tris (+) 是凝胶缓冲液和电泳缓冲液中常见的离子。电泳过程中，Tris-乙酸体系的工作 pH 值也显著降低为 8.1。
更好的样品完整性
样品前处理是成功进行蛋白质分析的关键步骤。在 100°C 加热时，传统 Laemmli 型样品缓冲液的 pH 值从 6.8 变为 5.2。 已知较低的 pH 值可诱导天冬氨酰-脯氨酰（Asp-Pro）肽键裂解，从而导致蛋白质降解。通过维护大于 7.0 的 pH 环境，InvitrogenNuPAGE LDS 上样缓冲液通过最小化 Asp-Pro 裂解来保持蛋白质完整性。在整个电泳过程中，使用 Invitrogen NuPAGE 体系可保持样品完整性；用 Laemmli（tris-甘氨酸）上样缓冲液制备的样品中可见蛋白质降解。Invitrogen NuPAGE 抗氧化剂电泳缓冲液添加剂可在电泳过程中最大程度地减少蛋白质氧化，并保持还原的蛋白质条带清晰锐利。
正在使用 Tris-甘氨酸或 Tricine 预制胶？使用下面的 NuPAGE 凝胶转换指南来查找合适的 NuPAGE 预制胶和相应的优化缓冲液。
NuPAGE 凝胶转换指南
| 如果您正在使用： | 推荐的 NuPAGE 预制胶： | 缓冲液体系 |
|---|---|---|
| Tris-甘氨酸预制胶 | ||
| 4% | NuPAGE 3-8% Tris-乙酸 | Tris-乙酸 |
| 6% | NuPAGE 3-8% Tris-乙酸 | Tris-乙酸 |
| 10% | NuPAGE 8% Bis-Tris | MOPS |
| NuPAGE 10% Bis-Tris | MOPS | |
| 12% | NuPAGE 10% Bis-Tris | MOPS |
| 14% | NuPAGE 12% Bis-Tris | MOPS |
| 16% | NuPAGE 12% Bis-Tris | MES |
| 18% | NuPAGE 12% Bis-Tris | MES |
| 4-12% | NuPAGE 3-8% Tris-乙酸 | Tris-乙酸 |
| NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MOPS | |
| 4-20% | NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MES |
| 8-16% | NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MOPS |
| 10-20% | NuPAGE 12% Bis-Tris | MOPS |
| Tricine 预制胶 | ||
| 10% | NuPAGE 8% Bis-Tris | MES |
| NuPAGE 10% Bis-Tris | MES | |
| 16% | NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MES |
| 10-20% | NuPAGE 4-12% Bis-Tris | MES |
资源
仅供科研使用，不可用于诊断目的。