BLOCK-iT™ Dicer 试剂盒为 RNAi 基因敲低提供了高效的 siRNA 库。Diced siRNA (d-siRNA) 库 是针对相同的靶标完成多组实验且 经济高效的方法。使用 Dicer 的实验能够得到可靠的抑制效果,并且特别有助于评估多个感兴趣基因的 RNAi 敲低效应,或者完成后续的微阵列分析。一旦确定一种RNAi 有效,进一步的评估就可以包括合成或载体的方法。

Dicer 技术适用于多种研究需求

  • 抑制通过其他方法难以敲低的基因
  • 无需额外订购多种合成序列即可研究多种基因
  • 使用每次反应中生成的大量 d-siRNA 平行进行多个转染实验
  • 当难以确定特定靶标位点时,抑制目标 mRNA
  • 生成针对特定基因或基因家族的 d-siRNA 库,以最大限度地实现特别强有力的抑制

使用体外 Dicer 生成的 d-siRNA 库实现强力抑制

BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi 试剂盒为您提供生成长 dsRNA 并进行切割得到 d-siRNA 库的所有技术和试剂。本试剂盒包含生成及纯化 d-siRNA 库,转染哺乳动物细胞获得强烈基因抑制的所有物品(图 1)。

图 1.使用切割库成功获得 RNAi。Dicer siRNA 库 (d-siRNA) 由  β-半乳糖苷 (β-gal) 或荧光素酶 dsRNA 转录物生成,用于测定 dsiRNA  专一抑制基因活性。GripTite™ 293 MSR 细胞与如下物质共转染: 阳性对照质粒 pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ 和 pcDNA™5/FRT/luc、分别表达 β-gal  和荧光素酶的报告基因;阳性对照质粒加 50ng lacZ d-siRNA;或阳性 对照质粒加 luc d-siRNA。对于每一个报告基因,相应的 d-siRNA 成功 降低了报告基因表达活性,而源自其他转录物的 d-siRNA
不影响其表达。

直接制备有效的 d-siRNA 混合物

BLOCK-iT™ RNAi Dicer 试剂盒是唯一包含重组 Dicer 酶、高质量 d-siRNA 纯化模块和最受欢迎的 RNAi 转染试剂 Lipofectamine™ RNAiMAX 的系统。通过三个简单步骤生成 d-siRNA 库,就能使用体外切割技术轻松实现可靠的基因抑制(图 2)。无需设计和订购合成寡核苷酸。该试剂盒包含从目标基因 PCR 片段生成高效 siRNA 库的所有成分。此外,我们也可应您的需要提供更大规格的定制特纯重组 Dicer 酶。


图 2.使用 Dicer 库成功获取 RNAi 的三个简单步骤。