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基于载体的 RNAi
RNA 干扰 (RNAi) 是有效敲低基因表达和研究各种细胞类型中蛋白功能的最佳方法。 与传统的小/短干扰 RNA (siRNA) 相比，使用载体来进行 RNAi 实验能极大地扩大实验的可行性。
载体技术可帮助您：
- 完成瞬时或稳定的目标敲低
- 在任何细胞类型中进行 RNAi 实验，甚至是难转染的原代细胞和非分裂细胞
- 通过诱导型 RNAi 表达来调控基因抑制
- 筛选出能稳定表达 RNAi 序列的纯细胞群
- 使用组织特异性启动子来控制体内基因表达
表 1.RNAi 载体技术对比。
| BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi | BLOCK-iT™ shRNA |
|---|---|
| Pol II 表达系统 | Pol III 表达系统 |
| miRNA 的多顺反子表达（链锁作用） | 每一启动子表达单一 shRNA |
| 共表达 GFP，以便对表达进行追踪 | 只能追踪传递过程（使用独立的表达盒） |
| 与大多数 Gateway DEST 载体兼容 | 与 BLOCK-iT™ DEST 载体兼容 |
| 最佳设计成功率（>70%） | 中等设计成功率（约 50%） |
表 2.我们的 RNAi 载体产品。
| 产品类型 | 描述 | 在线订购 |
|---|---|---|
| BLOCK-iT™ miR RNAi 选择 | 预设计的 miR RNAi 载体插入片段，适用于任何生物体 | 载体插入片段：BLOCK-iT™ RNAi 表达片段 载体骨架：在线目录 |
| BLOCK -iT™ Pol II miR Validated miRNA Vector DuoPak | 经过验证的 miR RNAi 构建体，适用于人激酶基因 | 甘油菌：BLOCK-iT™ RNAi 表达片段 |
| 定制的 BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi 载体 | 定制的 miR RNAi 载体，适用于任何生物体 | 载体插入片段：BLOCK-iT™ RNAi 设计软件 载体骨架：在线目录 |
| BLOCK-iT™ shRNA 载体 | 定制的 shRNA 载体，适用于任何生物体 | 载体插入片段：BLOCK-iT™ RNAi 设计软件 载体骨架：在线目录 |
| RNAi 载体对照 | 转染对照、阳性对照及阴性对照，适用于各种 RNAi 实验 | 在线目录 |
Ambion pSilencer™ siRNA 表达载体
pSilencer siRNA 表达载体系列产品包括几种带有 U6（RNA 聚合酶 III）启动子的经典质粒载体。 这些系统均包含预切载体、阴性对照载体及阳性对照插入片段。 请注意，这些载体并不包含细胞，也不兼容 Gateway。
| 表达载体 | 载体类型 | 应用 |
|---|---|---|
| pSilencer 2.1-U6 Neo | shRNA 载体（不兼容 Gateway） | 在转染细胞中瞬时或稳定表达 shRNA。 用新霉素筛选稳定表达株。 |
| pSilencer 2.1-U6 Hygro | shRNA 载体（不兼容 Gateway） | 在转染细胞中瞬时或稳定表达 shRNA。 用潮霉素筛选稳定表达株。 |
| pSilencer 2.1-U6 Puro | shRNA 载体（不兼容 Gateway） | 在转染细胞中瞬时或稳定表达 shRNA。 用嘌呤霉素筛选稳定表达株。 |
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