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如果您询问“什么是胎牛血清?它有什么用途?”,这并不出奇。胎牛血清 (FBS) 是从牛胎中抽取的血液凝固后剩余的液体部分。1通过离心去除细胞、凝固纤维蛋白原和蛋白以得到血清。

虽然胎牛血清已去除细胞和凝血因子,但仍留有许多有助于细胞生长的成分,包括:

  • 粘附因子
  • 生长因子
  • 激素
  • 脂质
  • 铺展因子
  • 糖类
  • 转运蛋白
  • 维生素

牛血清的分类

牛血清根据采血动物的年龄进行分类:2

  • 胎牛血清取自胎牛。
  • 新生牛血清取自不满二十天的小牛。
  • 小牛血清取自三周至12个月的小牛。
  • 成年牛血清取自12个月以上的母牛。
  • 供体牛血清可以取自12个月或更老的牛。
    • 供体牛饲养在仅用于供血的特定受控牛群内。

动物的年龄是值得注意的特征,因为它可能影响血液的成分,进而影响血清。

为何选择胎牛血清?

想知道胎牛血清有何作用以及它在研究中的应用?虽然其他动物血清(如马、兔、山羊、猪等)有售且可供使用,但胎牛血清仍然是使用较为普遍的血清。与小牛和成年牛血清相比,胎牛血清的 γ 球蛋白含量稀少、生长因子含量较高且补体蛋白较少。

这使得 FBS 非常适合用来促进细胞生长,同时降低培养中的哺乳动物细胞结合或裂解的可能性,因而胎牛血清比新生、供体或成年牛血清更受偏爱。

胎牛血清有何用途?

在哪种情况下,您可能想知道“胎牛血清有何用途”?它有什么用途?

1950年代后期,Theodore Puck 率先尝试使用 FBS 来促进细胞增殖。几十年来,胎牛血清的使用已经遍及世界各地的实验室。它的普及性始终取决于其在细胞和组织培养应用中作为添加剂的必要性。

研究、制药和生物技术制造均依赖于 FBS 的宝贵性质。其用途包括但不限于:

  • 动物诊断
  • 生物技术研究和生产
  • 克隆
  • 冻存
  • 干细胞研究
  • 疫苗生产

虽然胎牛血清采集具有广泛的应用,但其较常用于真核细胞的体外细胞培养。3向培养基中添加动物血清主要有助于:

  • 刺激细胞分化
  • 提供细胞增殖和生长所需的激素因子
  • 提供营养物质、微量元素、转运蛋白、粘附性和扩增因子
  • 通过稳定和解毒因子营造合适的生长环境

如何采集胎牛血清?

胎牛血清采集的一般程序包括以下阶段:

  1. 作为肉类加工业的副产品,在母牛接受死前和死后兽医检查的屠宰场中屠宰时,采集胎牛血
  2. 在政府批准的机构内从死亡的怀孕母牛采集胎牛血
  3. 在封闭的无菌系统中,通过心脏穿刺从死亡胎牛抽血,同时采用最佳实践调节血红蛋白和内毒素水平
  4. 冷藏血液以促进凝固
  5. 然后,将血液加工成原始血清

FBS 应始终在 ≤-10°C 的温度下储存,直至用于预期用途

如何加工 FBS?

虽然胎牛血的采集过程很简单,但根据其预期用途和所需的检测,仔细、受控的 FBS 加工过程可能特别广泛。

  1. 将原始血清冷冻在无菌罐中,直至进一步处理。
  2. 将原始血清解冻。
  3. 通过一系列过滤膜进行预过滤和最终除菌过滤。
  4. 在过滤后立即冷冻血清。
  5. 最后一步是进行全面的质量检测

虽然过滤孔可以去除真菌和细菌,但它们无法根除病毒。因此,每批都要经过病毒检测。根据客户要求,可以用 γ 射线辐照血清,从而使所含的病毒失活。

进行检测的示例包括:

  • 内毒素检测
  • 血红蛋白
  • 支原体检测
  • 渗透压
  • 性能(生长)
  • 总蛋白
  • 9CFR 病毒检测
  • EMA 病毒检测(针对选定批次)

每个批次的每个处理阶段都有严格的记录,但客户也可以先检测产品,然后再购买。根据应用,可能进行其他检测。

除了 γ 射线辐照,血清还可能经过其他几种特殊处理:

  • 活性炭处理—活性炭与亲脂分子结合,进而用于去除往往会妨碍免疫检测系统和胰岛素检查程序的激素(如雄激素、皮质醇、雌二醇、睾酮等)。
  • 透析—去除分子量低于 10,000 MW 的任何分子,包括抗生素、氨基酸、细胞因子、葡萄糖和激素。
  • 热灭活—将 FBS 置于56摄氏度的水浴中三十分钟,借此使抑制剂失活。不过,不建议将这种处理方法用于大多数细胞培养,因为它可以使生长因子无效并导致沉淀形成。
  • 低 IgG—捕获色谱可显著降低 IgG 含量。

应如何储存胎牛血清?

FBS 是一种生物物质,必须小心、妥善地储存以免其降解。比较有效的储存方式是让血清保持冷冻。

FBS 应该:

  • 在 ≤-10 摄氏度下储存
  • 在 2-8 摄氏度之间解冻
  • 在一致的条件下储存和运输以防品质下降

谁负责监管 FBS?

政府机构(DEFRA、USDA、MPI、DAWR 等)制定了动物副产品标准以及在全球进出口这些产品的要求/法规。

然而,某些地区的病毒风险水平有所不同。例如,从加拿大和新西兰进口到美国的 FBS 不需要 USDA 进行进一步的安全检测。而来自澳大利亚的 FBS 必须接受两种病毒(赤羽病和蓝舌病)检测。墨西哥和中美洲 FBS 在进口到美国时也需要 USDA 进行安全检测,以确定是否含有蓝舌病病毒。

国际血清行业协会 (ISIA) 成立于2006年,旨在监管动物血清行业。4ISIA 制定了要求进行精确质量检查和验证的标准。四个重点关注领域是:

  • 教育—为动物血清用户和生产商提供信息
  • 监管—协助行业管治的发展
  • 标准化—使进/出口、标准和检测方法系统化
  • 可追溯性—改善和促进 ISIA 可追溯性计划

ISIA 如何实施可追溯性计划?

上文提到的 ISIA 可追溯性计划并非必要措施,而是公司为证明血清可追溯性而乐意采取的流程。5经过 ISIA 批准和培训的审计员将在 FBS 生产过程(从第一个阶段到最后一个阶段)中发现并报告差异。认证需要审查记录。

完成审计后,合格企业可能会收到证明其符合标准的证书。ISIA 最终认可产品标签和说明的准确性和真实性。

指纹识别技术

除了 ISIA 可追溯性计划外,还革新了指纹识别技术,以提高血清采集和分销过程中的透明度。胎牛血清指纹识别技术由 Oritain 发明,该技术对动物、植物和土壤吸收的天然元素进行测量,然后创建指纹。

采集过程分为三个阶段:

  1. 获得产品样品。
  2. 分析样品。
  3. 在数据库中存储指纹以确保真实性。

通过该指纹可以验证每份血清的来源。血清的来源至关重要,因为牛血只能来源于动物健康状态经批准的国家/地区以及获得许可的机构。因此,通过指纹识别,消费者可以放心,他们的产品是正品并且源自广告宣传的地理位置。

胎牛血清的未来

近年来,由于需求日益增加且供应数量有限,FBS 的价格提高了 300% 以上。6它的供应很大程度上取决于环境因素和联邦的农业指导原则。

虽然寻求 FBS 替代品的竞争者有小幅增加,但尚未得出可证明功效相当的决定性结果。

然而,赛默飞世尔科技产品(包括血清)的质量、安全性、一致性和合规性均有保证。我们确保 Gibco 产品接受了严格的参数检测,包括经过 ISIA 可追溯性认证、获得指纹识别来源保证。

掌握有关胎牛血清的最新信息,选择赛默飞世尔科技为您提供值得信赖的 FBS 产品。

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参考文献