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In Vitro高収量mRNAを合成するためのIn Vitro転写キット |
in vitro 転写(IVT)は、mRNA合成およびRNA研究に不可欠な、一般的で便利な方法です。
当社のInvitrogen mMessage mMachineおよびMEGAscriptキットは、in vitro転写を介した合成mRNAの生成においてフレキシブルな、業界最先端のキットです。Invitrogenは、mRNA発見を加速するための重要なプロセス、スケール、品質を満たした、独自の実績ある製品群を提供しています。これには、感染症用のmRNAワクチンや希少疾患用のmRNA治療薬、抗体療法、タンパク質療法などの下流アプリケーションが含まれます。
最初のin vitro転写キットであるmMessage mMachineおよびMEGAscriptは、1989年にAmbionで商品化され、現在はInvitrogenとして知られています。ブランドは進化していますが、品質と優れた結果は同じままです。これらのキットは、50,000を超える引用を有し、RNA合成のためのさまざまな限界を克服する能力を備えており、業界で最も信頼性の高い高性能ソリューションとして認識されています。
直鎖状DNAテンプレートやPCR増幅DNAをmRNAに転写するために、さまざまなポリメラーゼ(T7、SP6、およびT3)を選択できるため、お客様の研究ニーズに合う一連のキットを提供しています。当社のMEGAscriptおよびmMessage mMachineキットでは、ヌクレオチド、ポリメラーゼ、Poly(A)テーリングキット、およびキャッピング技術(mCapアナログ、ARCA)を修飾して、合成mRNAを合成し、mRNAの発見を加速します。もっとも一般的なin vitro 転写T7ポリメラーゼキットをご覧ください。
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概要 | Next generation in vitro transcription kit for uncapped mRNA synthesis | キャップ構造mRNA合成用の第一世代のmCapアナログ | 第3世代キャップ(ヒトに見られるナチュラルキャップ)CleanCap® Reagent AGを提供しています | Design offers second generation ARCA cap for mRNA synthesis |
利点 |
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キャッピング効率 | N/A | 70~80% | ≥95% | 70〜80% |
Yield per reaction | 100 µg | 20~30 µg | ≥100 µg | 20~30 µg |
スケーラビリティ | ++++ | ++ | ++++ | +++ |
in vitro転写やその他の酵素反応後のRNAクリーンアップと精製のためのシンプルなソリューション。このキットには、取り込まれなかったNTP、酵素、バッファー成分からRNAを効率的に分離するシリカスピンカラム溶液が含まれています。
当社のカスタムmRNA合成サービスは、クラス最高レベルのin vitro転写製品と専門家チームを活用し、ワークフローの効率化を支援します。
図1.CleanCap® Reagent AG付きmMessage mMachine T7 mRNAキットは}、標準的な20 µLの反応でmRNAの収量が5 mg/mLまたは100 µgになります。このキットは、ARCAキャップアナログを備えたmMessage mMachine T7 Ultra転写キットの5倍、CleanCap® Reagent AGを備えた他社製mRNAキットの1.5倍も、mRNAを供与することができます。プロットの灰色のバーは、異なるIVTキットを使用した5つの異なるテンプレートの平均収量を示しています。異なる色のドットは、各テンプレートの平均mRNA収量を示しています。緑色:GFP(長さ1 kb)。青色:Cas9(長さ5 kb)。オレンジ色:ガウシアルシフェラーゼ(長さ0.8 kb)。黄:ホタルルシフェラーゼ(長さ2 kb)。黒色:VEE自己増幅GFP(長さ10 kb)。各mRNAキットを使用して、テンプレートごとに3回反復しました。
図2. CleanCap® Reagent AG付きmMessage mMachine T7 mRNAキットで作成されたmRNAは、ARCAキャップアナログを備えたmMesage mMachine T7 Ultra Transcription Kitで作成されたmRNAよりもはるかに高い細胞性能を発揮し、CleanCap試薬を備えた他社製mRNAキットと同等ですこの実験では、各mRNAキットでfLuc mRNAを作成し、Lipofectamine MessengerMAX Transfection Reagentを使用して、25 ngのmRNAをA549ヒト肺がん上皮細胞にトランスフェクションしました。Pierce Firefly Luc One-Step Glow Assay Kitを使用して、ルシフェラーゼ活性を測定した24時間後に細胞をアッセイしました。
図3.CleanCap® Reagent AG付きmMessage mMachine T7 mRNAキットは、mRNAキャッピング効率を95%超とすることが可能です。これは、ARCAキャップアナログを備えたmMessage mMachine T7 Ultra転写キットよりも大幅に高く、CleanCap® Reagent AGを備えた他社製mRNAキットと同等です。平均キャッピング効率は5種類のテンプレートから計算されました。
図4.CleanCap® Reagent AG付きmMessage mMachine T7 mRNAキットは、ARCAキャップアナログとCleanCap® Reagent AGを備えた他社製mRNAキットを備えたmMessage mMachine T7 Ultra転写キットと同等のmRNA品質を提供します。5種類のmRNAのためのアガロースゲルでは、3つのキットすべてで品質が似ていることが示されています。
アプリケーションノートをダウンロードして、当社のCleanCap® Reagent AG付きmMESSAGE mMACHINE T7 mRNAキットと脂質ナノ粒子(LNP)技術がどのように連携し、効率的なin vivo導入を実現するかをご確認ください。
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線維症を標的としたCAR T治療の開発に、当社のMEGAscriptキットがどのように使用されたかをご覧ください
自己増幅RNA(saRNA)を用いた新しい口腔ワクチンの開発におけるin vitro転写の役割を評価します
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.