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mRNAの研究を加速 |
mRNAの研究および発見のプロセスには、多様なニーズを満たす柔軟な製品および技術が必要です。mRNAの発見を効果的に促進するために、サーモフィッシャーサイエンティフィックは、ターゲット遺伝子の同定と合成、プラスミド作製、in vitro転写、タンパク質発現や免疫応答による導入まで、ポートフォリオ全体を網羅するさまざまな製品やサービスを提供しています。
mRNA治療薬やワクチンの標的遺伝子は、次世代シーケンシング(NGS)などの技術を使用して発見され、検証されることがよくあります。ターゲット配列を選択、最適化、合成し、DNAプラスミドに挿入して、in vitro転写を使用してmRNAを合成するテンプレートとして使用し、さらなる試験用にmRNAを生成します。
in vitro転写では、ターゲット遺伝子、ヌクレオチド、酵素を含む直鎖状DNAテンプレートを使用してmRNAを合成します。得られたmRNA産物は、修飾ヌクレオチドを使用するか、mRNAキャッピングおよびテーリングを使用して合成することで、タンパク質翻訳を強化し、安定性を向上させ、必要に応じて免疫原性を低減できます。
最終的なmRNA産物は、ビーズまたはカラムを用いたアフィニティー精製によって分離および精製され、必要に応じてクロマトグラフィーとろ過を用いてさらに調製されます。精製後、mRNAは、通常、多数の成分脂質やその他の材料で構成された脂質ナノ粒子を使用して試験モデルシステムに送達するために調製されます。
ターゲットmRNAが合成、調製、導入された後、通常、細胞ベースまたは組織ベースのシステムを使用して、mRNAの取り込みと取り込みの測定が行われます。mRNAの取り込みは、RT-PCR、ノーザンブロット、またはin situハイブリダイゼーションなどのいくつかの技術を使用して測定および可視化できます。
mRNA治療薬またはワクチンは多くの場合、標的細胞や患者のタンパク質またはタンパク質フラグメントの産生を誘発するように設計されています。mRNAによってコードされたタンパク質の産生を測定することは、mRNA治療候補の成功を判断するための鍵となります。前臨床段階では、タンパク質発現は、ウェスタンブロッティングや蛍光検出などの手法を使用して間接的に測定するか、液体クロマトグラフィー-質量分析(LCMS)により直接測定できます。
T細胞の活性化は、特に免疫療法においてmRNAの活性の重要な指標であり、適切なT細胞遺伝子発現マイクロアレイを用いて抗原処理と提示をモニタリングすることができます。
また、mRNAをベースとした免疫療法の多くは、mRNAによってコード化された標的タンパク質に対する抗体を産生することで体液性免疫を刺激するように設計されています。mRNA治療候補に対するこの抗体反応を測定することは、mRNA免疫治療またはワクチンにとって不可欠な情報です。ELISAアッセイは、発見段階で、mRNA治療候補に対する抗体またはタンパク質の反応を追跡するために一般的に使用される技術です。
mRNA治療薬やワクチンの標的遺伝子は、次世代シーケンシング(NGS)などの技術を使用して発見され、検証されることがよくあります。ターゲット配列を選択、最適化、合成し、DNAプラスミドに挿入して、in vitro転写を使用してmRNAを合成するテンプレートとして使用し、さらなる試験用にmRNAを生成します。
in vitro転写では、ターゲット遺伝子、ヌクレオチド、酵素を含む直鎖状DNAテンプレートを使用してmRNAを合成します。得られたmRNA産物は、修飾ヌクレオチドを使用するか、mRNAキャッピングおよびテーリングを使用して合成することで、タンパク質翻訳を強化し、安定性を向上させ、必要に応じて免疫原性を低減できます。
最終的なmRNA産物は、ビーズまたはカラムを用いたアフィニティー精製によって分離および精製され、必要に応じてクロマトグラフィーとろ過を用いてさらに調製されます。精製後、mRNAは、通常、多数の成分脂質やその他の材料で構成された脂質ナノ粒子を使用して試験モデルシステムに送達するために調製されます。
ターゲットmRNAが合成、調製、導入された後、通常、細胞ベースまたは組織ベースのシステムを使用して、mRNAの取り込みと取り込みの測定が行われます。mRNAの取り込みは、RT-PCR、ノーザンブロット、またはin situハイブリダイゼーションなどのいくつかの技術を使用して測定および可視化できます。
mRNA治療薬またはワクチンは多くの場合、標的細胞や患者のタンパク質またはタンパク質フラグメントの産生を誘発するように設計されています。mRNAによってコードされたタンパク質の産生を測定することは、mRNA治療候補の成功を判断するための鍵となります。前臨床段階では、タンパク質発現は、ウェスタンブロッティングや蛍光検出などの手法を使用して間接的に測定するか、液体クロマトグラフィー-質量分析(LCMS)により直接測定できます。
T細胞の活性化は、特に免疫療法においてmRNAの活性の重要な指標であり、適切なT細胞遺伝子発現マイクロアレイを用いて抗原処理と提示をモニタリングすることができます。
また、mRNAをベースとした免疫療法の多くは、mRNAによってコード化された標的タンパク質に対する抗体を産生することで体液性免疫を刺激するように設計されています。mRNA治療候補に対するこの抗体反応を測定することは、mRNA免疫治療またはワクチンにとって不可欠な情報です。ELISAアッセイは、発見段階で、mRNA治療候補に対する抗体またはタンパク質の反応を追跡するために一般的に使用される技術です。
当社のカスタム生物学サービスグループは、お客様の小規模研究ニーズを満たすmRNAの構築をお手伝いします。すぐに使用できる完全なmRNAテンプレートをお持ちの場合でも、実績ある設計でプラグアンドプレイしたい場合でも、当社のスケールおよびQCオプションの柔軟性は、さまざまなアプリケーションに対応します。当社は、ARCAやCleanCap® Reagent AGなどの5’CAPオプションを備えたmRNA、修飾ヌクレオチドを完全にカスタマイズ可能で、わずか50 μgのスケールでも提供しています。当社は、in vitro転写テンプレート設計からmRNA合成、脂質ナノ粒子カプセル化までのワークフロー全体をサポートしており、cGMP製造へのシームレスな移行も可能です。
カスタムmRNA合成サービスに関するお問い合わせは、一般サービスに関するお問い合わせフォームをご利用ください。以下をクリックしてフォームに移動し、細胞エンジニアリングタブ内のカスタムmRNA合成サービスのチェックボックスをオンにしてください。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.