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プロテイン A、プロテイン G、プロテイン A/Gおよびプロテイン L は、哺乳類の免疫グロブリン分子と結合する微生物由来の天然タンパク質および組換えタンパク質です。これらのタンパク質は、精製済み、塩不含、凍結乾燥などの形態を取り揃えています。また、マイクロプレートにコーティングされた形態や、さまざまな固体担体に共有結合的に固定化された形態も用意しております。抗体のカラムアフィニティ精製用担体で最も一般的なのは架橋ビーズアガロースですが、Thermo Scientific™ UltraLink™ Biosupport (ポリアクリルアミド) やその他の多孔質媒体も使用できます。磁気ビーズは、免疫沈降アプリケーション用の最も一般的な担体です。
ネイティブプロテイン A | 組換えプロテイン A | 組換えプロテイン G | 組換えプロテイン A/G | 組換えプロテイン L | |
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天然供給源 | 黄色ブドウ球菌 | 黄色ブドウ球菌 | 連鎖球菌 | N/A | ペプトストレプトコッカス・マグヌス |
産生源 | 黄色ブドウ球菌 | 大腸菌 | 大腸菌 | 大腸菌 | 大腸菌 |
分子量 | 46,700 | 44,600 | 21,600 | 50,460 | 35,800 |
SDS-PAGE による見かけの分子量 | 42 kDa | 45 kDa | 32 kDa | 40~45 kDa | 36 kDa |
Ig結合部位数 | 5 | 5 | 2 | 4+2 | 4 |
アルブミン結合部位 | なし | なし | なし | なし | なし |
結合の至適 pH | 8.2 | 8.2 | 5 | 5 ~ 8.2 | 7.5 |
Ig 結合標的 | Fc | Fc | Fc | Fc | VL-κ |
4 つの抗体結合タンパク質は、ほぼ IgG クラスのみと結合しますが、各タンパク質の結合特性は動物種や IgG のサブクラスにより異なります。プロテイン A は、通常、ウサギ、ブタ、イヌおよびネコ由来の IgG に対して高い結合親和性を示します。プロテイン G は、幅広いマウスおよびヒトの IgG サブクラス (IgG1、IgG2 など) に対して優れた結合能を示します。
プロテイン A/G は、プロテイン A とプロテイン G の IgG 結合ドメインを合わせ持つ組換え融合タンパク質です。そのため、プロテイン A/G は、ウサギ、マウス、ヒト、およびその他の哺乳類サンプル由来の幅広い IgG サブクラスとの結合に最適です。
Protein L は、特定の免疫グロブリン κ 軽鎖と結合します。κ 軽鎖は、免疫グロブリンの全クラス (すなわち、IgG、IgM、IgA、IgE および IgD) のメンバーに存在するため、プロテイン L によってこれらの異なるクラスの抗体を精製することができます。ただし、適切な κ 軽鎖を有するクラスに属する抗体のみが結合します。プロテイン L による特定の抗体の精製に関する有効性を判定するには、通常は実証試験が必要になります。