アポトーシス初期における顕著な特徴は基質となるタンパク質の切断とその結果として生じる細胞の分解に関与するカスパーゼ酵素の活性化です。Molecular Probes®では、生細胞において活性化カスパーゼをリアルタイムまたはスナップショットとして簡便に検出するための様々なカスパーゼアッセイを提供しています。

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カスパーゼ活性のフローサイトメトリーアッセイもご覧ください

 

カスパーゼ イメージング アッセイ

data-2.par.53227.image.dat-apoptosis-caspase-jpg
U2OS細胞において CellEvent™ Caspase-3/7 Green
detection reagent
を用いたマルチプレックスイメージングを
行い、アポトーシスを検出。
  • リアルタイム、洗浄ステップ無しのカスパーゼ活性アッセイ
  • 生細胞および死細胞向けのマルチパラメーターアッセイ
  • アポトーシス免疫検出用抗体

アポトーシス中、ICEファミリーのメンバーであるカスパーゼ-3および-7などがPARPを切断し、85 kDaと25 kDaのフラグメントを生じます。切断されたPARPの85 kDaフラグメントに対する抗体またはカスパーゼ-3に対する抗体はどちらもアポトーシス細胞のマーカーとなり、蛍光免疫染色によるモニタリングが可能です。マルチパラメーター アポトーシス キットは、カスパーゼの状態に加え、生細胞および死細胞の判別ができるようにデザインされています。

マイクロプレート用カスパーゼアッセイ

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  • 様々な酵素特異性を持つRhodamine 110由来のカスパーゼ基質を利用可能
  • リアルタイムの生細胞アッセイ
  • 細胞ライセート用に最適化されたキット
  • 特異性から選択可能な複数の基質

Molecular Probes®では、細胞そのものまたは細胞溶解液にお使いいただけるマイクロプレート用カスパーゼ活性アッセイを提供しています。 CellEvent® Caspase-3/7 Green Detection Reagentは、アポトーシス解析用に最適化されており、シンプルで洗浄ステップ不要のプロトコールのためデリケートなアポトーシス細胞の解析に便利です。 マイクロプレートウェル中の生細胞のアポトーシス活性を、リアルタイムでモニタリングできます。

カスパーゼ-3測定用のマイクロプレートキットは、 蛍光波長の異なる基質を選ぶことができ、Rhodamine 110またはAMCAが活性のレポーターに使用されています。


カスパーゼアッセイ選択ガイド

システイン依存性アスパラギン酸特異的プロテアーゼ(カスパーゼ)はアポトーシスの様々な段階で非常に重要な役割を果たします。生細胞またはホルマリン固定細胞用のカスパーゼアッセイ をご利用いただけます。デリケートなアポトーシス細胞においてマルチプレックス解析をする際には、リアルタイムアッセイおよび洗浄ステップなしのプロトコールが特に有用です。

リードアウト洗浄ステップなしのアッセイで、経時的にカスパーゼ活性をモニタリングすることも出来ます。カスパーゼ活性が上昇するにつれ蛍光強度が増加します。
カスパーゼ3, 7
標準フィルターセットFITC
Ex/Em (nm)502/530
参考文献引用文献
蛍光 顕微鏡
HCS
HTS
生細胞
固定細胞不可
固定可能
フォーマット100 µL
カタログ番号C10423

シグナル保持をベースとしたアッセイキットは洗浄ステップを必要とし、カスパーゼアッセイのスナップショットを捉えることができます。各キットは、アポトーシス細胞(カスパーゼ活性に基づく)、生細胞および死細胞の同時検出が可能なフォーマットになっています。蛍光免疫染色のプロトコールでは、固定細胞および組織切片を染色できます。

 PARP FITC Apoptosis Kit
リードアウト各キットは、アポトーシス細胞(カスパーゼ活性に基づく)、生細胞、および死細胞の同時検出が可能なフォーマットになっています。アポトーシス細胞検出用のマーカーです。
標準フィルターセットDAPIFITCTRITCDAPIFITCTexas Red®FITC
フルオロフォアHoechst 33342SYTOX® GreenFMKHoechst 33342FAMPropidium iodideFITC
Ex/Em (nm)350/461504/523550/595350/461488/530535/617490/525
参考文献引用文献引用文献
蛍光顕微鏡
HCS
HTS   
生細胞不可
固定細胞不可不可
固定処理
カスパーゼポリ-カスパーゼ3, 7ポリ-カスパーゼ83, 73, 7
フォーマット25-アッセイ キット25-アッセイ キット25-アッセイ キット25-アッセイ キット25-アッセイ キット1キット、 100テスト
カタログ番号I35101I35102I35104I35105I35106AHM2011

システイン依存性アスパラギン酸特異的プロテアーゼ(カスパーゼ)はアポトーシスの様々な段階で非常に重要な役割を果たします。細胞抽出物のアッセイを行うことにより、多数のサンプルで簡便にカスパーゼ活性を測定できます。

 
リードアウト本キットを使用し、細胞抽出物および精製酵素サンプルにおけるカスパーゼ-3活性を、蛍光マイクロプレートリーダーにより連続的に測定できます。
コンジュゲート色素Rhodamine 110AMCRhodamine 110
Ex/Em (nm)496/520342/441496/520
参考文献引用文献
蛍光顕微鏡   
HCS   
HTS
選択的カスパーゼ検出カスパーゼ-3カスパーゼ-3カスパーゼ-3
フォーマット500-アッセイ キット500-アッセイ キットプレフォーマットされた、
96-アッセイ キット
カタログ番号E13184E13183R35100

カスパーゼ基質および抗体は、イメージングまたはスクリーニングにご利用いただけます。

CASP3 [D175] モノクローナル抗体(クローン9H19L2)、 ABfinity™ リコンビナント
リードアウトRhodamine 110(R110)由来のカスパーゼ基質は、タンパク質分解酵素によって切断され、まず蛍光モノアミドに、続いてR110に変換され、この過程に伴って蛍光が上昇します。これらの基質を使用し、細胞抽出物および精製酵素サンプルにおける酵素活性を蛍光マイクロプレートリーダーによって連続測定することができます。抗CASP3抗体は、固定透過処理された細胞においてカスパーゼを検出することができます。
コンジュゲート色素Rhodamine 110なし(未標識ウサギIgG)
Ex/Em (nm)498/521
参考文献引用文献引用文献
蛍光顕微鏡  
HCS   
HTS 
生細胞   不可
固定細胞   
固定処理   
選択的カスパーゼ検出総合的なカスパーゼ試薬カスパーゼ-1、カスパーゼ-4カスパーゼ-6カスパーゼ-3
フォーマット1 mg2 mg2 mg100 µg
カタログ番号R22122R33750R33754700182

システイン依存性アスパラギン酸特異的プロテアーゼ(カスパーゼ)はアポトーシスの様々な段階で非常に重要な役割を果たします。生細胞またはホルマリン固定細胞用のカスパーゼアッセイ をご利用いただけます。デリケートなアポトーシス細胞においてマルチプレックス解析をする際には、リアルタイムアッセイおよび洗浄ステップなしのプロトコールが特に有用です。

リードアウト洗浄ステップなしのアッセイで、経時的にカスパーゼ活性をモニタリングすることも出来ます。カスパーゼ活性が上昇するにつれ蛍光強度が増加します。
カスパーゼ3, 7
標準フィルターセットFITC
Ex/Em (nm)502/530
参考文献引用文献
蛍光 顕微鏡
HCS
HTS
生細胞
固定細胞不可
固定可能
フォーマット100 µL
カタログ番号C10423

シグナル保持をベースとしたアッセイキットは洗浄ステップを必要とし、カスパーゼアッセイのスナップショットを捉えることができます。各キットは、アポトーシス細胞(カスパーゼ活性に基づく)、生細胞および死細胞の同時検出が可能なフォーマットになっています。蛍光免疫染色のプロトコールでは、固定細胞および組織切片を染色できます。

 PARP FITC Apoptosis Kit
リードアウト各キットは、アポトーシス細胞(カスパーゼ活性に基づく)、生細胞、および死細胞の同時検出が可能なフォーマットになっています。アポトーシス細胞検出用のマーカーです。
標準フィルターセットDAPIFITCTRITCDAPIFITCTexas Red®FITC
フルオロフォアHoechst 33342SYTOX® GreenFMKHoechst 33342FAMPropidium iodideFITC
Ex/Em (nm)350/461504/523550/595350/461488/530535/617490/525
参考文献引用文献引用文献
蛍光顕微鏡
HCS
HTS   
生細胞不可
固定細胞不可不可
固定処理
カスパーゼポリ-カスパーゼ3, 7ポリ-カスパーゼ83, 73, 7
フォーマット25-アッセイ キット25-アッセイ キット25-アッセイ キット25-アッセイ キット25-アッセイ キット1キット、 100テスト
カタログ番号I35101I35102I35104I35105I35106AHM2011

システイン依存性アスパラギン酸特異的プロテアーゼ(カスパーゼ)はアポトーシスの様々な段階で非常に重要な役割を果たします。細胞抽出物のアッセイを行うことにより、多数のサンプルで簡便にカスパーゼ活性を測定できます。

 
リードアウト本キットを使用し、細胞抽出物および精製酵素サンプルにおけるカスパーゼ-3活性を、蛍光マイクロプレートリーダーにより連続的に測定できます。
コンジュゲート色素Rhodamine 110AMCRhodamine 110
Ex/Em (nm)496/520342/441496/520
参考文献引用文献
蛍光顕微鏡   
HCS   
HTS
選択的カスパーゼ検出カスパーゼ-3カスパーゼ-3カスパーゼ-3
フォーマット500-アッセイ キット500-アッセイ キットプレフォーマットされた、
96-アッセイ キット
カタログ番号E13184E13183R35100

カスパーゼ基質および抗体は、イメージングまたはスクリーニングにご利用いただけます。

CASP3 [D175] モノクローナル抗体(クローン9H19L2)、 ABfinity™ リコンビナント
リードアウトRhodamine 110(R110)由来のカスパーゼ基質は、タンパク質分解酵素によって切断され、まず蛍光モノアミドに、続いてR110に変換され、この過程に伴って蛍光が上昇します。これらの基質を使用し、細胞抽出物および精製酵素サンプルにおける酵素活性を蛍光マイクロプレートリーダーによって連続測定することができます。抗CASP3抗体は、固定透過処理された細胞においてカスパーゼを検出することができます。
コンジュゲート色素Rhodamine 110なし(未標識ウサギIgG)
Ex/Em (nm)498/521
参考文献引用文献引用文献
蛍光顕微鏡  
HCS   
HTS 
生細胞   不可
固定細胞   
固定処理   
選択的カスパーゼ検出総合的なカスパーゼ試薬カスパーゼ-1、カスパーゼ-4カスパーゼ-6カスパーゼ-3
フォーマット1 mg2 mg2 mg100 µg
カタログ番号R22122R33750R33754700182