微生物の生存率に関するイメージングアッセイは、酵母や細菌に最適化された試薬とバイオフィルム研究用の独自の試薬を含みます哺乳動物細胞と同様に、このアッセイは、生細胞と死細胞を見分けるために酵素活性と膜透過性の併用に基づきます。Molecular Probes®はフローサイトメトリーによるフローサイトメトリー用微生物生存率アッセイも提供します。

微生物生存率用のアッセイの選択

フローサイトメトリー用の細胞生存率測定も合わせて参照ください。
イメージング用の哺乳動物細胞生存率測定も参照してください。

微生物生存率のイメージング

  • 細菌および酵母用の2色アッセイ
  • バイオハザードをより低減する最小のステップ

膜透過性を測定するイメージングアッセイを用いて微生物生存率を決定することができます。膜透過性DNA染色試薬と不透過性DNA染色試薬を組み合わせることで、生細胞を緑色に染色され、死細胞が赤色に染色されます。細菌では、生細胞の決定を蛍光によるグラム染色と組み合わせることができます。

酵母細胞では、膜染色試薬を用いることで、生細胞および死細胞の両方が青色シグナルより検出されます。生細胞では、小胞が橙色と赤色に染色される二色アッセイが提供されます。

 
LIVE/DEAD® Yeast Viability KitLIVE/DEAD® Yeast Viability Kitによる酵母の染色LIVE/DEAD Yeast ViabilityKit.

バイオフィルムイメージング

  • バイオフィルムでの生存率測定に最適化されています。
  • エステラーゼ活性または膜透過性を利用します。

バイオフィルムコミュニティーで増殖する生物の生存率を測定するにはは、染色にあたって細胞浸透とアクセスのしやすさに関する問題が生じることがあります。FilmTracer™ Calcein試薬は、エステラーゼがアセトキシメチルエステルを加水分解するまでは非蛍光性ですが、加水分解されることで高蛍光カルセインを生じます。FilmTracer™ Calcein試薬は、マルチプレックス化で用いられる一連の波長で利用可能です。

DNA結合性蛍光試薬を用いる細菌性生存率用の2色アッセイは、バイオフィルム上での使用に最適化されています。膜透過性DNA蛍光試薬と不透過性DNA蛍光試薬を組み合わせることで、生細胞を緑色に染色され、死細胞が赤色に染色されます。

 
Bacterial Viability Kit

細菌生存率キットによるストレプトマイシンの染色

微生物の生存率は、膜透過性およびDNA結合を測定するイメージングアッセイを用いて測定されます。細菌では、生細胞の決定を蛍光によるグラム染色と組み合わせることができます。

 
ターゲット細菌用の生存率染色試薬酵母用の生存率染色試薬
リードアウト生細菌細胞では、グラム陽性細胞は緑色に染まり、グラム陰性細胞は赤色に染まります。膜透過性に基づく生存率染色試薬無傷な細胞はほとんどが緑色を発し、死細胞はほとんどが赤色を発します。活性細胞の液胞は橙色に染色され、生細胞および死細胞は青色に染色されます。
蛍光標識SYTO® 9SYTO® 9SYTO® 10FUN® 1
Hexidium iodidePromidium iodideEthidium homodimer-2Calcofluor White M2R
標準フィルターセットFITCFITCFITCFITC
Texas Red®Texas Red®Texas Red®DAPI
励起/蛍光 (nm)480/500480/500484/505488,560,-610
480/625536/617535/624365/440
文献引用引用
生細胞可可可可
固定可能不可 不可不可不可
プラットフォームイメージングイメージングイメージングイメージング
パッケージフォーマット1キット/>1000アッセイ1キット/>1000アッセイ1キット/100アッセイ1 キット
カタログ 番号L7005L7007L7013L7009

代謝活性またはエステラーゼ活性の指標を測定するイメージングアッセイを用いて、バイオフィルムでの微生物生存率を決定することができます。細胞膜は、障害細胞および死細胞の細胞膜透過性を高めて細胞成分の流出または蛍光色素の流入をもたらします。アッセイを併用することで、複数のパラメータを測定して、生細胞および死細胞の両方の状態を決定するためのより多くのものを提供します。

 
ターゲットバイオフィルムのイメージングと互換性があり、そのためにデザインされた細菌生存率染色試薬
リードアウト膜透過性に基づく生存率染色試薬無傷な細胞はほどんどが緑色を発し、死細胞はほとんどが赤色を発します。FilmTracer™ Calcein試薬は、エステラーゼの基質となるアセトキシメチルエステルです。それらは細胞透過性であり、生細胞におけるエステラーゼによる加水分解後に蛍光性になります。生細胞は、蛍光を発します。
蛍光標識SYTO® 9

Calcein Orange

Calcein Violet
Calcein Green
Promidium iodide
標準フィルターセットFITC
Texas Red®
DAPI
FITC
Texas Red®
励起/蛍光 (nm)480/500
576/590
400/450
494/514
536/617
文献引用引用
生細胞可可可可
固定可能可不可不可不可
プラットフォームイメージングイメージングイメージングイメージング
パッケージフォーマット1キット/>100アッセイ20 x 50 µg20 x 25 µg20 x 50 µg
カタログ 番号L10316F10319F10320F10322
微生物イメージングアッセイ

微生物の生存率は、膜透過性およびDNA結合を測定するイメージングアッセイを用いて測定されます。細菌では、生細胞の決定を蛍光によるグラム染色と組み合わせることができます。

 
ターゲット細菌用の生存率染色試薬酵母用の生存率染色試薬
リードアウト生細菌細胞では、グラム陽性細胞は緑色に染まり、グラム陰性細胞は赤色に染まります。膜透過性に基づく生存率染色試薬無傷な細胞はほとんどが緑色を発し、死細胞はほとんどが赤色を発します。活性細胞の液胞は橙色に染色され、生細胞および死細胞は青色に染色されます。
蛍光標識SYTO® 9SYTO® 9SYTO® 10FUN® 1
Hexidium iodidePromidium iodideEthidium homodimer-2Calcofluor White M2R
標準フィルターセットFITCFITCFITCFITC
Texas Red®Texas Red®Texas Red®DAPI
励起/蛍光 (nm)480/500480/500484/505488,560,-610
480/625536/617535/624365/440
文献引用引用
生細胞可可可可
固定可能不可 不可不可不可
プラットフォームイメージングイメージングイメージングイメージング
パッケージフォーマット1キット/>1000アッセイ1キット/>1000アッセイ1キット/100アッセイ1 キット
カタログ 番号L7005L7007L7013L7009
バイオフィルムイメージングアッセイ

代謝活性またはエステラーゼ活性の指標を測定するイメージングアッセイを用いて、バイオフィルムでの微生物生存率を決定することができます。細胞膜は、障害細胞および死細胞の細胞膜透過性を高めて細胞成分の流出または蛍光色素の流入をもたらします。アッセイを併用することで、複数のパラメータを測定して、生細胞および死細胞の両方の状態を決定するためのより多くのものを提供します。

 
ターゲットバイオフィルムのイメージングと互換性があり、そのためにデザインされた細菌生存率染色試薬
リードアウト膜透過性に基づく生存率染色試薬無傷な細胞はほどんどが緑色を発し、死細胞はほとんどが赤色を発します。FilmTracer™ Calcein試薬は、エステラーゼの基質となるアセトキシメチルエステルです。それらは細胞透過性であり、生細胞におけるエステラーゼによる加水分解後に蛍光性になります。生細胞は、蛍光を発します。
蛍光標識SYTO® 9

Calcein Orange

Calcein Violet
Calcein Green
Promidium iodide
標準フィルターセットFITC
Texas Red®
DAPI
FITC
Texas Red®
励起/蛍光 (nm)480/500
576/590
400/450
494/514
536/617
文献引用引用
生細胞可可可可
固定可能可不可不可不可
プラットフォームイメージングイメージングイメージングイメージング
パッケージフォーマット1キット/>100アッセイ20 x 50 µg20 x 25 µg20 x 50 µg
カタログ 番号L10316F10319F10320F10322

お役立ち情報

より詳しくはMolecular Probes®ハンドブックをご覧ください。
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