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NuPAGE® electrophoresis systemのサンプル調製、バッファー調製、電気泳動、染色およびブロッティングの詳細なプロトコルについては、NuPAGE®テクニカルガイドをご覧ください。
NuPAGE®テクニカルガイド
NuPAGE Novex precast gelを使用した1D SDSタンパク質電気泳動の詳細なプロトコル情報をご覧ください。プロトコルには以下の情報が含まれています。
Novex® NuPAGE® Precast Gelのパワーと性能を確認してください
。NuPAGE® Novex® Bis-Tris GelとMES SDSランニングバッファーをターボプロセスで使用することで、わずか25分間で優れた分離と分解能が取得を実現します(図1)。電圧を250 Vの一定値に設定し、予測電流は130~150 mAが各ゲルに流れるようにすると、泳動時間は25分となります。NuPAGE® Turboプロトコルには以下の利点があります。
図1 NuPAGE® Turboプロトコル Turboプロトコルを使用するとゲルの泳動時間が短縮されます―250 Vでわずか25分でバンドをひずませることなく完了します。Novex® NuPAGE® 4~12% Bis-Tris Gelに以下のサンプルをロードし、MES SDSランニングバッファーを用いて、標準プロトコルでは200 Vで40分間(右)、加速プロトコルでは250 Vで25分間(左)電気泳動を行います。ゲルはCoomassie® R-250で染色しました。レーン1、3、5、7、9: SeeBlue® Plus2 染色済みスタンダード5 µL;レーン2、 4、6、8、10:Mark 12™ 未染色スタンダード5 µL ;ライセート: E. coli ライセート10 µg。
ゲル/泳動条件 | 泳動時間/予測電流 | コメント |
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NuPAGE®Mini-Gel、200 V (MES Buffer + Antioxidant)、ゲル1枚または2枚 | 35分 110~125 mA/ゲルで開始、 70~80 mA/ゲルで終了 | 分離と解像度の最適化 |
NuPAGE® Mini gel、250 V (MES Buffer + Antioxidant)、ゲル 1枚または2枚 | 24 分 130–150 mA/ゲルで開始、130–140 mA/ゲルで終了 | 一度に1ゲルまたは2ゲルを流す際に、重大なバンドのひずみなし |
NuPAGE®Mini-Gel、 200 V (MES Buffer + Antioxidant)ゲル1~4枚 | 40 分 250-270 mA/ゲルで開始、150-170 mA/ゲルで終了 | 分離と解像度の最適化 |
NuPAGE®Mini-Gel、 250 V (MES Buffer + Antioxidant)ゲル1~4枚 | 25 分 270-290 mA/ゲルで開始、270-290 mA/ゲルで終了 | 一度に4ゲルを流す際に、重大なバンドのひずみなし |
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.