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機械的破砕を伴うことなくE.coliなどの細菌細胞を効率的に溶解する非イオン性界面活性剤溶液でネイティブタンパク質を穏やかに抽出します。Thermo Scientific™ B-PER™ Complete Bacterial Protein Extraction Reagentは、リゾチームとヌクレアーゼを組み合わせた溶解試薬で、グラム陰性菌およびグラム陽性菌から穏やかにタンパク質を抽出するための試薬です。
タンパク質抽出物はほとんどのタンパク質アッセイや一般的な下流用途に対応しています。これらの試薬は高いタンパク質回収率をもち、通常、サンプルを10~15分で処理できます。
Reagent | B-PER Complete Bacterial Protein Extraction Reagent | B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent | B-PER (PBS) Bacterial Protein Extraction Reagent | B-PER II (2X) Bacterial Protein Extraction Reagent |
Compatible sample types | E. coli, B. subtilis | E. coli, B. subtilis | E. coli, B. subtilis | E. coli, B. subtilis |
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Nuclease and lysozyme in formulation? | Yes | No | No | No |
Sample processing time | 15 min | 10–15 min | 10–15 min | 10–15 min |
Works for fresh and frozen cells? | Add EDTA to gram negative fresh cells | Yes | Yes | Yes |
Mechanical disruption required? | No | No, but for gram positive bacteria add enzymes for increased yield | No, but for gram positive bacteria add enzymes for increased yield | No, but for gram positive bacteria add enzymes for increased yield |
Amount of sample processed | 100 g cell paste per 500 mL | 125 g cell paste per 500 mL | 125 g cell paste per 500 mL | 125 g cell paste per 250 mL |
Protein assay compatibility | BCA, Coomassie Plus, Pierce 660, Detergent Compatible Bradford (subtract blank–contains enzymes) | BCA, Coomassie Plus, Pierce 660 (dilute 1:2), Detergent Compatible Bradford | BCA, Coomassie Plus, Pierce 660 (dilute 1:2), Detergent Compatible Bradford | BCA, Coomassie Plus, Pierce 660 (dilute 1:2), Detergent Compatible Bradford |
Downstream compatibility | SDS-PAGE, western blotting & protein purification | SDS-PAGE, western blotting & protein purification (except for GST fusion proteins) | SDS-PAGE, western blotting & protein purification (except for GST fusion proteins) | SDS-PAGE, western blotting & protein purification (except for GST fusion proteins) |
Protease inhibitors recommended? | Yes | Yes | Yes | Yes |
Order now | Order now | Order now | Order now |
2つの細菌細胞溶解試薬を用いたタンパク質回収量の比較E. coli ER2566/pLATE51-Klenow、ER2566/pGST-CC-StpAおよびER2566/pGSTSyk細胞ペレット(0.5 g)を、B-PER Complete ReagentまたはEMD Millipore™ BugBuster™ Master Mix2.5 mLで再懸濁し、室温で15分間穏やかにボルテックスしました。不溶性の細胞片は、16,000 x g、4°C、20分の遠心分離により除去しました。可溶性画分のタンパク質収量(濃度)は、Pierce BCA Protein Assay Kit(品番23225)を用いて測定しました。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.