B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent

機械的破砕を伴うことなくE.coliなどの細菌細胞を効率的に溶解する非イオン性界面活性剤溶液でネイティブタンパク質を穏やかに抽出します。Thermo Scientific™ B-PER™ Complete Bacterial Protein Extraction Reagentは、リゾチームとヌクレアーゼを組み合わせた溶解試薬で、グラム陰性菌およびグラム陽性菌から穏やかにタンパク質を抽出するための試薬です。

タンパク質抽出物はほとんどのタンパク質アッセイや一般的な下流用途に対応しています。これらの試薬は高いタンパク質回収率をもち、通常、サンプルを10~15分で処理できます。

お客様の細菌細胞に適した全タンパク質抽出試薬を選択してください

ReagentB-PER Complete Bacterial Protein Extraction ReagentB-PER Bacterial Protein Extraction ReagentB-PER (PBS) Bacterial Protein Extraction ReagentB-PER II (2X) Bacterial Protein Extraction Reagent
Compatible sample typesE. coli, B. subtilisE. coli, B. subtilisE. coli, B. subtilisE. coli, B. subtilis
Nuclease and lysozyme in formulation?YesNoNoNo
Sample processing time15 min10–15 min10–15 min10–15 min
Works for fresh and frozen cells?Add EDTA to gram negative fresh cellsYesYesYes
Mechanical disruption required?NoNo, but for gram positive bacteria add enzymes for increased yieldNo, but for gram positive bacteria add enzymes for increased yieldNo, but for gram positive bacteria add enzymes for increased yield
Amount of sample processed100 g cell paste per 500 mL125 g cell paste per 500 mL125 g cell paste per 500 mL125 g cell paste per 250 mL
Protein assay compatibilityBCA, Coomassie Plus, Pierce 660, Detergent Compatible Bradford (subtract blank–contains enzymes)BCA, Coomassie Plus, Pierce 660 (dilute 1:2), Detergent Compatible BradfordBCA, Coomassie Plus, Pierce 660 (dilute 1:2), Detergent Compatible BradfordBCA, Coomassie Plus, Pierce 660 (dilute 1:2), Detergent Compatible Bradford
Downstream compatibilitySDS-PAGE, western blotting & protein purificationSDS-PAGE, western blotting & protein purification (except for GST fusion proteins)SDS-PAGE, western blotting & protein purification (except for GST fusion proteins)SDS-PAGE, western blotting & protein purification (except for GST fusion proteins)
Protease inhibitors recommended?YesYesYesYes
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2つの細菌細胞溶解試薬に関するタンパク質収量の比較

E. coli 2つの細菌細胞溶解試薬を用いたE. coliからのタンパク質回収量の比較

2つの細菌細胞溶解試薬を用いたタンパク質回収量の比較E. coli ER2566/pLATE51-Klenow、ER2566/pGST-CC-StpAおよびER2566/pGSTSyk細胞ペレット(0.5 g)を、B-PER Complete ReagentまたはEMD Millipore™ BugBuster™ Master Mix2.5 mLで再懸濁し、室温で15分間穏やかにボルテックスしました。不溶性の細胞片は、16,000 x g、4°C、20分の遠心分離により除去しました。可溶性画分のタンパク質収量(濃度)は、Pierce BCA Protein Assay Kit(品番23225)を用いて測定しました。

  • C = コントロール(IPTG誘導前に回収したE. coliのライセート)
  • T = total protein (initial lysate before removal of cell debris by centrifugation)
  • S = soluble protein (final clarified lysate of IPTG-induced culture)

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.