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ゲルろ過クロマトグラフィーは、様々なサイズ排除クロマトグラフィーレジンを使用することで、脱塩およびバッファー交換を実施するのにしばしば使用されます。脱塩は、バッファー成分、塩類および未反応の標識試薬といったより小さな分子から、高分子のクロマトグラフィー分離を行います。バッファー交換は、タンパク質または分子を、電気泳動、イオン交換、アフィニティクロマトグラフィーまたは保管といった用途に適したバッファーの中に移し変えるのに使用します。
脱塩およびバッファー交換の場合、高分子成分は、ゲルろ過カラム内のレジンを平衡化するのに用いるのと同じバッファーで回収します。平衡化に水を使用した場合、成分は脱塩されます。別のバッファーを使用した場合は、バッファー交換が起こります。バッファー交換は、望ましいバッファーで事前に平衡化した後、以下に一覧で示す脱塩製品のそれぞれを用いて実施することができます。
Thermo Scientific Zeba脱塩製品としては、独自開発の高性能サイズ排除レジンなどがあり、他の市販レジンと比べて比類ない脱塩およびタンパク質回収特性が得られます。低濃度(25 μg/mL)のタンパク質サンプルについても、95%を上回る塩と低分子を保持(除去)可能で、タンパク質とその他の高分子の回収にも優れています。
Zebaスピン脱塩カラム(5つのカラムサイズで利用可能)および2つのMWCO(7 Kと40 K)は使いやすく、標準的なドリップカラム法の結果を劇的に改善します。重力フローによるサンプル溶出を待つ必要も、タンパク質回収のために分画をモニターする必要もありません。Zeba脱塩カラムは、クロマトグラフィー機器、煩わしいカラムの準備または平衡化を必要とせず、約8分で多数のサンプルを処理することができます。
Zeba Desalting Resin also comes pre-packed in 96-well filter/centrifuge plates and in two sizes of Pierce Chromatography Cartridges.
7 K MWCO | 40K MWCO | Resin bed | Sample size |
---|---|---|---|
Micro spin column | Micro spin column | 0.075 mL | 2 to 12 µL |
0.5 mL spin column | 0.5 mL spin column | 0.5 mL | 30 to 130 µL |
2 mL spin column | 2 mL spin column | 2 mL | 200 to 700 µL |
5 mL spin column | 5 mL spin column | 5mL | 600 to 2000 µL |
10 mL spin column | 10 mL spin column | 10 mL | 1500 to 4000 µL |
96-well spin plate | 96-well spin plate | 0.55 mL | 20 to 100 µL |
1 mL cartridge | 1 mL | 50 to 250 µL | |
5 mL cartridge | 5 mL | 100 to 1500 µL |
Note: Sample size ranges given here are for the 7K MWCO products. Ranges for the 40K MWCO products are slightly different; see the product page for specific values.注記:ここに示したサンプルサイズ範囲は、7 K MWCO製品のものです。 40 K MWCO製品の範囲はわずかに異なります。特異的な値については製品ページをご覧ください。
Thermo Scientific Zeba Resin technology provides consistent performance and peace of mind. The unique, proprietary Zeba Resin enables better protein recovery, even for samples with low protein concentrations.
Thermo Scientificポリアクリルアミド脱塩カラムは、ポリアクリルアミドサイズ排除レジンとともにパッケージされています。6 K MWCOカラムは、直径90~180 μmの濡れたビーズが入っています。1.8 K MWCOカラムは、直径45~90 μmの濡れたビーズが入っています。これらのカラムは、分画範囲が0.1~1.8 Kの低分子量化合物を分離するのに最適です。ポリアクリルアミドサイズ排除レジンは、酵素による分解を受けにくく、微生物増殖の栄養源にはなりません。本レジンは非常に親水性が高いため、サンプル分子に対する疎水性の結合は最小限に抑えられます。ポリアクリルアミドレジンは、架橋型の多糖類担体の使用時に起こり得る低分子量糖類によるサンプル汚染も防止します。さらに、酸化剤は、担体を破壊することなく除去されます。本レジンは、極端なpH条件下でアミド基の加水分解を受けやすいため、室温でpHを2~10に調整することを推奨しています。ポリアクリルアミドレジンは、オートクレーブ滅菌をpH 5.5~6.5、120°Cで30分間行うこともできます。
カラムサイズ | Resin bed | Sample size |
---|---|---|
0.7 mL spin column | 0.7 mL | 30 to 120 µL |
5 mL gravity column | 5 mL | up to 1.25 mL |
10 mL gravity column | 10 mL | up to 2.5 mL |
Note: The optimal sample size for this matrix is 1/10 the column resin bed. However, sample volumes up to 1/4 of the column volume bed may be used if 100% desalting is not required.注記:本マトリックスでの最適なサンプルサイズは、カラムレジンベッドの1/10です。 しかし、100%の脱塩を必要としない場合、サンプル容量はカラム容量べッドの最大1/4まで使用することができます。
Thermo Scientificデキストラン脱塩カラム(5 K MWCO)は、架橋型デキストランサイズ排除レジンとともにパッケージされています。濡れたビーズの直径は50~150 μmです。本レジンは容易な取扱いに適した剛性と、優れた流動特性を備えています。デキストランレジンは、水、塩溶液、有機溶媒、およびアルカリ性または弱酸性溶液での安定性に優れています。熱安定性に優れており、乾燥状態または中性溶液中で、120°Cで30分間オートクレーブ滅菌することができ、そのクロマトグラフィー特性に影響を及ぼすことはありません。
カラムサイズ | Resin bed | Sample size |
---|---|---|
5 mL gravity column | 5 mL | up to 1.25 mL |
10 mL gravity column | 10 mL | up to 2.5 mL |
Note: The optimal sample size for this matrix is 1/10 the column resin bed. However, sample volumes up to 1/4 of the column volume bed may be used if 100% desalting is not required.注記:本マトリックスでの最適なサンプルサイズは、カラムレジンベッドの1/10です。 しかし、100%の脱塩を必要としない場合、サンプル容量はカラム容量べッドの最大1/4まで使用することができます。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.