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Lipofectamine® LTX Reagent は、トランスフェクションの効力と細胞への優しさのバランスがとれたプラスミド導入用トランスフェクション試薬です。高い導入効率と生存率が得られます。この試薬はChinese Hamster Ovary (CHO)などの一般的な細胞、または、初代神経前駆細胞、初代繊維芽細胞、初代上皮などの導入が困難な細胞において、遺伝子発現のための先進的なソリューションとなります。 Lipofectamine® LTX Reagent 特長
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これまで、初代細胞はトランスフェクションが困難な細胞株でした。 Lipofectamine® LTX をPLUS™ 試薬と組み合わせて使用することで、初代神経前駆細胞を含む初代細胞株へのトランスフェクションが改善されます。(図1)。
図1: Lipofectamine® LTXをPLUS™ 試薬と組み合わせることにより、初代神経前駆細胞へのトランスフェクションが効率的に行われます。、Lipofectamine® LTX Reagent(1.5 μL)とPLUS™ Reagent(2.5 μL)を使用して、マウス胚初代神経前駆細胞にGFP発現プラスミドをトランスフェクションしました。GFP発現をトランスフェクションから24時間後に解析しました。 データはアイオワ大学Beverly Davidson研究室のご厚意により掲載を許可いただいたものです。
Lipofectamine® LTX Reagentは、初代細胞およびトランスフェクションが困難な細胞に対して効率的なトランスフェクションを行えるほか、他のトランスフェクション試薬に感受性の高い細胞株へのトランスフェクションに対しても広く使用できます(図3)。
図 2Lipofectamine® LTX Reagemtは、トランスフェクション効率が高いほか、細胞毒性が低いという面でも、他社F6試薬 およびFD試薬よりも優れています。活性/毒性分析を行うことで、細胞毒性に対する遺伝子発現量の比を求めます。この比が高いと、低い細胞毒性レベルでトランスフェクション効率が最適化されていることが分かります。 各試薬の推奨プロトコールに従って、10の細胞株にルシフェラーゼ発現プラスミドをトランスフェクトしました。 ルシフェラーゼ発現と、Vybrant® Cytotoxicity Assay Kit(カタログ番号 V23111)を使用して細胞への毒性を分析しました。 データは他社FH試薬の活性/毒性比に対し標準化しました。
Lipofectamine® LTX Reagentには、導入効率が改善される新しい簡便なプロトコールがあります。 トランスフェクション後、トランスフェクション複合体の除去も培地交換も必要ありません。 作業時間が短縮され、より良質な結果をより短時間で得られます。
導入効率、生存率および再現性に関して最適化されたLipofectamine® LTX &Plus™ 試薬プロトコール
図 3:Lipofectamine® LTX ReagentとPlus™ Reagentの新しいプロトコールと以前のプロトコールの性能比較