StemPro® NSC SFM - 無血清ヒト神経幹細胞培養培地

図1 Phenotype marker expression of neural stem cells cultured in StemPro® NSC SFM. StemPro® NSC SFMで17継代培養された神経幹細胞の表現型マーカー発現。 正常な表現型マーカー（ネスチン、Sox2）および増殖マーカー（Ki67）を発現した神経幹細胞。 ヒトES細胞（Oct4）が残存した形跡はありませんでした。 The inset image in each panel shows the staining pattern given by the nuclear stain DAPI.

StemPro® NSC SFMは、接着培養とニューロスフェア浮遊培養の双方で優れたhNSC増殖と多用途性を実現します。 As human NSCs comprise a very small fraction of the total CNS cell population, expansion is critical to generate sufficient cells to study differentiation pathways and explore the downstream clinical applications of human NSCs. hNSCs can be passaged only a limited number of times before exhibiting reduced proliferation and differentiation potential. このため、継代培養1回あたりの収量を最大化することが非常に重要です（図2）。


図 2 Superior human NSC expansion is achieved using StemPro® NSC SFM compared with competitor serum-free NSC media. StemPro® NSC SFMは、標準的なN2添加、および競合する神経幹細胞培地処方に比べて優れた細胞増殖能力を発揮します。 Invitrogen StemPro® NSC SFMで培養されたhNSC、競合するSCT培地、シグマ培地、およびN2添加培地の増殖を測定しました。 ESC由来hNSCは、それぞれの培地で、Cellstart™基質コーティング96ウェルプレート内でウェル1個あたり等倍の10 ⁴細胞の割合で3日間播種されました。 Indirect cell count was obtained with the CyQUANT® proliferation assay kit (Cat. no. C35006), and data shows mean relative florescence units of stained cells (n=6).

図 3 Stable proliferation of hNSCs in StemPro® NSC SFM enables culturing of both adherent and suspension culture systems. StemPro® NSC SFMを用いると、（A）接着培養または（B）ニューロスフェアでの培養のいずれでも、多分化能性を維持したまま、ヒト神経幹細胞を複数継代に渡って培養することが可能になります。 ヒト神経幹細胞は、NSC SFMで7継代にわたり CELLstart™基質上で培養されたヒトES細胞に由来しています。 第3次ニューロスフェアはNSC SFMで培養された胎児組織から分離されました。

ヒト神経幹細胞は、神経細胞、乏突起膠細胞、および星状膠細胞という特徴的な3つの細胞系列のうちの、いずれかに分化する能力で定義されます。 StemPro® NSC SFMは、幹細胞のもつ多分化能性や特定の実験要件（図4）を満たす理想的な細胞系統にヒト神経幹細胞を誘導する能力を維持し、強力な血清不含の神経幹細胞用培地です。


図 4 Differentiation potential of hNSCs cultured in StemPro® NSC SFM. hNSCs were cultured in StemPro® NSC SFM and were differentiated to neurons, and glial cells. Shown above (A) Neurons were labeled with an anti-HuC/D antibody (green) and an anti-Dcx antibody (red). (B) Cells with an oligodendrocyte lineage were labeled with an anti-GalC antibody (red). Cell nuclei were labeled with DAPI (blue) and neurons were labeled with an anti-Dcx antibody (green). (C) Cells with an astrocyte lineage were labeled using an anti-CD44 antibody (green). Cell nuclei were labeled with DAPI (blue) and neurons were labeled with an anti-Dcx antibody (green).