효소는 다양한 산업에서 중추적인 역할을 합니다. 제조 속도를 높일뿐 아니라 품질을 개선하고 낭비를 줄이며 제품 수율을 최적화하여 비용 효율성과 수익성을 확대할 수 있습니다. 효소 및 기질은 서로 잘 맞으며, 올바른 모양의 기질만 효소에 의해 변형됩니다. 이로 인해 효소의 작용은 특이적입니다.

효소는 화학적 반응을 촉진합니다. 원료를  바이오 제약, 연료 에탄올, 와인, 맥주 생산 에 필요한 발효와 같은 다른 제품으로 변환하는 데 도움이 되는 화학 반응을 촉진하거나 속도를 높입니다. 효소는 세제와 동물 사료 제형에 포함됩니다. 반응 유형 또는 완제품에 관계없이 효소 품질, 활성, 안정성은 원하는 결과를 얻는 데 매우 중요합니다.

효소 활성

효소 활성은 효소 반응의 속도로, 일반적으로 시간 단위당 변환된 기질(또는 형성된 제품)의 단위로 표현됩니다. 효소 활성은 다양한 요인에 따라 달라집니다. 따라서 효소 활성 측정은 현대적인 실험실 장비뿐 아니라 기술 지식, 기량, 기술이 필요한 정밀한 작업입니다.

효소 분석

효소 분석은 효소 반응(효소 활성)의 속도를 측정하는 실험법입니다. 이 분석법은 분석 기술을 개발하고 효소 촉매 메커니즘을 연구하는 데에도 도움을 줍니다. 효소 키네틱 및 효소 억제 연구에 매우 중요합니다. 일반적으로 이 분석은 추가된 보효소에 의해 활성화 여부와 없이 효소 활성을 결정함으로써 수행됩니다. 이 활성은 반응 중에 기질 또는 제품의 농도 변화를 측정하여 모니터링할 수 있습니다.

효소 키네틱

효소 키네틱은 효소에 의해 촉진되는 화학 반응에 관한 연구입니다. 효소 키네틱에서 기술자는 반응 속도를 측정하고 다양한 반응 조건의 영향을 조사합니다. 효소의 키네틱을 연구하면 효소의 촉매 메커니즘, 대사에서의 작용, 활성이 조절되는 방식, 약물 또는 작용제가 효소를 억제하는 방식을 알 수 있습니다.

효소 분석은 직접적·간접적·결합적으로 진행할 수 있습니다. 직접 검사의 경우, 기질이 시료에 추가되고 최종 산물이 결정되며 기질이나 분석 시약이 효소에 의해 직접 수정됩니다. 이 신호는 다른 시약 또는 다른 반응과의 상호작용에 의해 발생합니다.

6 step Method of Development

효소 분석 또는 효소 활성을 위한 신뢰할 수 있는 분석법을 개발하려면 여러 가지 단계가 필요합니다. 전체적인 분석법 개발은 지루하고 시간이 많이 소요됩니다. 분석법 개발은 효소 활동을 위해 많은 시료 세트를 검사해야 하는 실험 설계(Doe)를 통해 핵심 방법 변수를 식별하는 것부터 시작합니다. 각 효소 유형에 대해 유연한 분석법 매개변수: 파장 측정, 공시험액 측정(blank measurement), 완충액 추가, 시약 추가, 기질 추가, 효소 특이적 인큐베이션 온도, 효소 특이적 인큐베이션 시간, 데이터 수집 기간 등을 통해 연구개발(R&D)에서 품질 보증 및 관리까지의 효소 분석법 개발 및 분석법 이전을 훨씬 간단하고 신뢰성 있게 수행할 수 있습니다. 

pH, Temperature, Buffer Type, Ionic Strength

효소의 유형과 민감도에 따라 다양한 분석법이  사용됩니다.  대부분의 효소 분석은 분광 기법을 기반으로 하며, 2가지(흡수와 형광 발광)가 가장 많이 사용됩니다.  

측광, 형광 측정, 96-웰 포맷이나 384-웰 포맷, 심지어는 1536-웰 포맷 마이크로플레이트 기반의 효소 분석은 기존 분광광도계에 대한 고처리량 대체품을 제공합니다. 마이크로플레이트 형식은 200μL 분석 용량을 사용하는 고속 대량 분석 시 편리하고, 생명과학 응용 분야에 널리 사용됩니다. 하지만 마이크로플레이트 방법은 온도 안정화, 흡수 보정, 에지 효과로 방해받을 수 있습니다.

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