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번역 후 변형(post-translational modification, PTM) 또는 활성 결합 부위를 기반으로 한 세포 단백질의 분리에는 여러 기법들이 이용가능 합니다. 단백질 강화(enrichment)는 함량이 적은 단백질의 분리 또는 단백질 계열 분리를 위해 필수적인 단계입니다. 표적 특이적인 고정 항체 또는 PTM 특이 친화결합을 이용하면 특정 단백질 또는 단백질 복합체의 강화를 가장 쉽게 실시할 수 있습니다. 새로운 Thermo Scientific™ ActivX™ probe 및 강화 키트는 kinase, GTPase, serine hydrolase를 포함하는 여러 효소 계열을 특이적으로 표적화합니다.
Phospho- protein Enrichment Kit | Glycoprotein Enrichment Kit, ConA | Glycoprotein Enrichment Kit, WGA | Ubiqitin Enrichment Kit | Kinase Enrichment Kit with ATP Probe | ActivX™ TAMRA-FP Serine Hydrolase Probe | |
Target | Phosphorylated proteins | α-linked mannose and terminal glucose residues | N-acetyl glucosamine (GlcNAc) | Polyubiquin-ated proteins | ATP binding sites | Active serine hydrolase enzymes |
Binding/ labeling mechanism | Metal chelate affinity to phosphate groups | Lectin affinity to sugars | Lectin affinity to sugars | Antibody affinity to target | Biotinylated ATP analog to active-site lysine | TAMRA-labeled fluoro phosphanate binds to active site serine |
Processing time | 2 hr | <1 hr | <1 hr | <45 min | 6.5 hr | 3 hr |
Enrichment format | IMAC-agarose | Immobilized conA-lectin-agarose | Immobilized WGA-lectin-agarose | Immobilized polyubiqitin affinity-agarose | Immobilized strepavidin-agarose | Immobilized anti-TAMRA mAb-agarose |
90003 (10 columns) | 89804 (10 rxn) | 89805 (10 rxn) | 89899 (15 rxn) | 88310 (16 rxn) | 88318 (6.8 µg) |
Downstream 질량 분광분석법의 경우, 함량이 적은 단백질로부터의 펩티드 검출 및/또는 단백체(proteomic) 분석을 위한 샘플의 복잡성을 줄이기 위해 펩티드 강화 및/또는 분획이 필요합니다.
Kit | 인단백질 수율(ug)* | 강화 시간(시간) |
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Pierce® 인단백질 강화 키트 | 300 | 1.5 |
Supplier Q 키트 | 88 | 4.5 |
Supplier I 키트 | 52** | 3.5 |
Supplier C 키트 | 160 | 3 |
Supplier E 키트 | 측정하기에 너무 묽음 | 5 |
*총 단백질 2 mg으로부터.
**제조원’ 프로토콜에 따라 최대 1mg 로딩 기준.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.