无血清培养基（SFM）

用 Gibco 无血清培养基培养细胞

 

无血清培养基由适当的营养和荷尔蒙配方组成，可以在不使用动物血清的情况下培养细胞。使用无血清培养基进行细胞培养具有许多优势，包括提高一致性和生产率，以及更方便纯化和下游处理。此外，无血清培养基可以配制成含有对特定细胞类型具有选择性的生长因子组合。无血清培养基配方可用于多种多原代培养物和细胞系，包括重组蛋白生产中国仓鼠卵巢（CHO）系、杂交瘤细胞系和作为病毒生产宿主的细胞系（例如，293、VERO、MDCK、MDBK）。

Gibco 无血清培养基提供了卓越的细胞生长和存活率

赛默飞世尔科技是业界规模较大的无血清细胞培养基生产厂商，同时也是创新的特殊培养基（包括无血清培养基）开发方面的当先者。无血清培养基（SFM）有助于研究人员在无血清条件下培养特定细胞类型或进行特定应用研究。

CHO 细胞培养基

无血清 CHO 培养基可简化下游蛋白纯化，且其经过优化可支持中国仓鼠卵巢（CHO）细胞。从化学成分明确、无蛋白和无血清的配方以及悬浮细胞或贴壁细胞培养基中进行选择。浏览 CHO 培养基目录。
 

杂交瘤培养基

开发杂交瘤培养基以支持杂交瘤细胞培养用于抗体生产。从化学成分明确、无蛋白和无血清的配方中进行选择，以改善杂交瘤细胞培养。
 

蛋白表达培养基

Gibco 蛋白表达培养基有多种配方可供选择，支持亲本 PER.C6、HEK 293 和 HeLa 细胞在悬浮培养中的生长。这些蛋白表达培养基不含直接来自人类或动物来源的成分。探索所有蛋白表达产品，请访问 thermofisher.com/proteinexpression。
 

使用无血清培养基的优点包括：

  • 提高了培养条件的明确性
  • 更一致的性能
  • 提高了细胞的生长和/或生产率
  • 对细胞功能的精确评估
  • 更好地控制生理反应
  • 高灵敏度检测细胞内的中介体
  • 更方便的纯化及下游加工处理

如何从含血清的培养基转换为无血清培养基

当您准备转换为无血清培养系统时，我们将为您提供帮助。无论您选择哪种适应方法（连续适应或条件培养基），我们都强烈建议您采取以下预防措施：

  • 在开始适应前，在含血清培养基中冻存一份细胞
  • 在进行下一步适应前，都应在上一步适应条件下保存一份细胞作为备份，以防细胞在下一代培养中无法存活

细胞适应至无血清培养基的连续适应代数 

 

连续适应代数是我们将细胞适应至无血清培养基（SFM 培养基）的优选方法。该过程在细胞上更容易实现，可在几个步骤内将细胞适应至新培养基，典型转换是：

传代1  75%含血清的培养基：25%无血清培养基（SFM）
传代2 50%含血清的培养基：50%无血清培养基（SFM）
传代3 25%含血清的培养基：75%无血清培养基（SFM）
传代4 100%无血清培养基（SFM）

在某些情况下，从75%到100%无血清培养基的变化可能对细胞压力太大。因此，您可能需要在补充10%含血清的培养基中传代培养2至3次：90% SFM 混合物。 

 

在100％无血清培养基（SFM）中传代3次后，大多数细胞系即可视为完全适应。在将培养基转换为100％无血清培养基（SFM）之前，偶尔也会出现细胞无法通过某一步骤的情况。如果出现这种情况，使用先前含血清培养基与无血清培养基的比例返回并继续传代培养2至3次。

使用条件培养基进行适应

 

适应 SFM 培养基的另一种方法涉及使用条件培养基，这是细胞在一次完整传代中生长的培养基。如果选择该方法，可以通过以下方法进行适应：

传代1 100%含血清的培养基
传代2 50%第1代中的培养基：50%无血清培养基（SFM）
传代3 50%第2代中的培养基：50%无血清培养基（SFM）
传代4 50%第3代中的培养基：50%无血清培养基（SFM）
传代5 100%无血清培养基（SFM）

以无血清培养基培养细胞的注意事项 

总的来说，在无血清培养基中培养的细胞对极端 pH 值、温度、渗透压、机械力和酶处理更为敏感。

 

抗生素

最好不要在无血清培养基中使用抗生素。确需使用的话，我们建议使用量为添加血清培养基中使用量的1/5到1/10。这是因为血清蛋白倾向于结合一定量的抗生素，如果没有这些血清蛋白，原来使用的抗生素水平将对某些细胞产生毒性。

 

更高的细胞密度

在开始适应前，细胞必须处于对数生长期并且活性>90%，并且可能需要连续适应代数。

 

在适应至无血清培养基期间，每次传代时，接种细胞密度要高于正常传代时的密度，这有助于适应过程。由于部分细胞无法在新培养环境中存活，因此接入更多的细胞将有利于增加进一步传代存活的细胞数量。

 

结团

在适应至无血清培养基过程中，细胞经常会团聚成块。我们建议您在进行细胞传代培养时将细胞结团轻轻磨碎，使细胞分散开。

 

形态

在适应至无血清培养基的过程中以及适应之后，一般会发生细微的细胞形态变化。只要细胞倍增时间和存活率保持良好，细微的形态变化是无关紧要的。

资源 和 技术支持

资源

细胞培养和转染学习中心
访问细胞培养和转染教育资源，更好地规划和执行实验。
 

Gibco 细胞培养基础知识
了解细胞培养的基础知识，包括实验室设置、安全性和无菌技术，以获得一致的结果。
 

培养基配方工具
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技术支持

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