转染方法概述

阳离子脂质转染是最热门的方法之一，在各种应用和细胞类型中的转染效率较高。此外，这种方法具有通用性，试剂可用于递送 DNA、RNA 或蛋白质。具体来说，这些试剂自发形成核酸-阳离子脂质试剂复合物，通过内吞作用由细胞吸收。

了解阳离子脂质转染

磷酸钙沉淀是一种易于实现且价格低廉的转染方法，可用于多种细胞类型。在该方法中，磷酸钙促进 DNA 与细胞表面结合，通过内吞作用促进摄取。

了解磷酸钙沉淀

DEAE-右旋糖酐转染是最早的化学转染方法之一，操作相对简单，成本较低。在该方法中，DEAE-右旋糖酐分子与核酸形成带正电的复合物，核酸可以结合细胞膜并通过内吞作用或渗透性休克进入细胞。

了解 DEAE-右旋糖酐转染

阳离子聚合物的转染效率水平可能有所不同，它们溶于水，并在核酸-聚合物复合物形成后发挥作用。这些复合物可以附着在细胞膜上，通过内吞作用被摄取。

了解阳离子聚合物转染

图 1.化学转染机制。 试剂-DNA 复合物的表面正电荷使其能够附着在细胞表面并通过内吞作用进入细胞。在逃离核内体后，DNA 被转移到细胞核进行转录，而 mRNA 可以直接在细胞质中翻译。

电转染是一种常见的物理转染法，该方法使用电脉冲在细胞膜上暂时形成多个孔，方便核酸通过。该方法可用于大量细胞的快速转染，适用于包括临床研究在内的一系列环境。

了解电转染

其他物理基因递送法与电转染不同，但仍然可以在不使用载体分子的情况下将核酸直接转移到细胞中。这些方法包括生物颗粒递送，即将核酸包衣的颗粒以显微注射法注射到细胞中，其中使用针直接将核酸注射到细胞中，然后进行激光介导转染，其中激光脉冲产生细胞孔。

了解其他物理递送法

图2.电转染机制。 当感应电场穿过细胞膜时，会形成多个孔，使有效载荷进入细胞。电穿孔后，细胞膜恢复，递送物质分布在细胞质和细胞核中。

图 3.病毒转染机制。 (1) 使用 3 ~ 4 个编码目标基因和病毒蛋白的质粒转染包装细胞。(2) 病毒在包装细胞中组装、收获并纯化。(3) 利用病毒转导靶细胞，释放目标基因。(4) 在本例中，慢病毒载体的 RNA 被逆转录为 DNA，DNA 整合到宿主基因组中表达重组蛋白。