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Lipofectamine MessengerMAX mRNA 转染试剂在神经元和广谱原代细胞中提供了惊人的转染效率,从而能改善应用结果和进行更多的生物学相关研究。这是因为我们的新型脂质纳米微粒技术经过优化,能够在没有 DNA 所需的入核步骤的情况下递送尽可能多的 mRNA。
图 1.在原代细胞(新鲜分离的小鼠皮质神经元、BJ 成纤维细胞和原代角质形成细胞)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 递送试剂和领先的 mRNA 递送试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 传递试剂用于以 24 孔的形式传递 GFP mRNA(500ng/孔)。领先的 DNA 传递试剂用于传递 GFP DNA(500ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图 2.在各种干细胞(Gibco iPSC、H9 ESC、mESC、hNSC)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 递送试剂和领先的 mRNA 递送试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 递送试剂用于在 48 孔板中递送 GFP mRNA(250 ng/孔)。领先的 DNA 递送试剂用于递送 GFP DNA(250 ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图3.在各种非常难以转染的细胞系((bEnd.3、SH-SY5Y、SK-N-SH、A431、RAW 264.7 和 HT29)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 传递试剂和领先的 mRNA 传递试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 传递试剂用于在 24 孔板中递送 GFP mRNA(500ng/孔)。领先的 DNA 传递试剂用于传递 GFP DNA(500ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图 1.在原代细胞(新鲜分离的小鼠皮质神经元、BJ 成纤维细胞和原代角质形成细胞)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 递送试剂和领先的 mRNA 递送试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 传递试剂用于以 24 孔的形式传递 GFP mRNA(500ng/孔)。领先的 DNA 传递试剂用于传递 GFP DNA(500ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图 2.在各种干细胞(Gibco iPSC、H9 ESC、mESC、hNSC)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 递送试剂和领先的 mRNA 递送试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 递送试剂用于在 48 孔板中递送 GFP mRNA(250 ng/孔)。领先的 DNA 递送试剂用于递送 GFP DNA(250 ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图3.在各种非常难以转染的细胞系((bEnd.3、SH-SY5Y、SK-N-SH、A431、RAW 264.7 和 HT29)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 传递试剂和领先的 mRNA 传递试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 传递试剂用于在 24 孔板中递送 GFP mRNA(500ng/孔)。领先的 DNA 传递试剂用于传递 GFP DNA(500ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
虽然 DNA 转染是用于表达目的基因的最常用方法,但这个过程涉及多个步骤,包括 DNA 进入细胞核。DNA 进入细胞核通常是最难转染的步骤之一,特别是在难以转染的细胞中。
相比之下, mRNA 转染比 DNA 转染更简单,因为 mRNA 转录物可以直接递送到细胞中 ,无需进入细胞核 (步骤 4 ,图 4) 进行表达。此外, mRNA 转染独立于细胞周期,有助于消除基因组整合风险。
Lipofectamine MessengerMAX 转染试剂专门设计用于 mRNA 转染,可在转染细胞中实现快速蛋白表达,同时使其表达均一。
图4.DNA 与 mRNA 转染。
Lipofectamine MessengerMAX 试剂通过高效转染,提高用 InvitrogenGeneArt CRISPR 核酸酶 mRNA 切割和重组的可能性,最大限度地提高 CRISPR 驱动的基因修饰效率,并简化下游流程。
图 5.在 12 孔板中针对 Gibco iPS 细胞的 HPRT 位点的各种 Invitrogen GeneArt CRISPR 模式的切割效率。Invitrogen Lipofectamine 3000 试剂用于递送 CRISPR 核酸酶一体化质粒 DNA;Lipofectamine MessengerMAX 和两种领先的 mRNA 递送试剂用于递送全 RNA CRISPR 形式(Cas9 mRNA + IVT gRNA)。在转染后 72 小时,使用 Invitrogen GeneArt 基因组切割检测试剂盒测定切割效率。
用 T7 启动子准备 DNA 模板。您可选择用 Invitrogen Gateway pcDNA-DEST40 载体来克隆基因,或者用 PCR 和含 T7 的引物进行扩增。
用 Invitrogen mMESSAGE mMACHINE T7 超转录试剂盒转录模板 DNA,以产生用于转染的 mRNA。
用简单的 Lipofectamine MessengerMAX 转染方案来转染 mRNA。
下载 Lipofectamine MessengerMAX 实验方案
用 T7 启动子准备 DNA 模板。您可选择用 Invitrogen Gateway pcDNA-DEST40 载体来克隆基因,或者用 PCR 和含 T7 的引物进行扩增。
用 Invitrogen mMESSAGE mMACHINE T7 超转录试剂盒转录模板 DNA,以产生用于转染的 mRNA。
用简单的 Lipofectamine MessengerMAX 转染方案来转染 mRNA。
下载 Lipofectamine MessengerMAX 实验方案
细胞类型 | Lipofectamine MessengerMAX 转染效率(%) |
---|---|
MDA-MB-231 | |
A431 | |
A549 | |
bEnd.3 | |
BJ 成纤维细胞 | |
H9 ESCs | |
原代肝细胞 | |
Hep G2 | |
HT-29 | |
iPSC | |
原代角质形成细胞 | |
L929 | |
LNCaP | |
hNSC | |
MCF7 | |
Neuro-2a | |
原代神经元 | |
RAW 264.7 | |
RBL | |
SK-N-SH | |
SH-SY5Y |
转染效率(%)*<30% 30~50% 51~79% >80%
为了帮助确保转染结果的有效性,强烈建议使用阳性对照 mRNA(可从不同的第三方供应商获取),包括 TriLink BioTechnologies(如 EGFP mRNA)。
Packaging must protect the product inside—but that doesn’t have to mean sacrificing sustainability. Lipofectamine products are shipped at ambient temperature, diverting 24,000 ft3 of Expanded Polystyrene (EPS) coolers from landfills annually. We reduce the carbon footprint from packaging and shipping these products by 80 tons (CO2 equivalents).
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我们的 Lipofectamine 试剂特异性方案针对多种细胞类型在效率、活率和可重复性方面进行了优化。搜索该数据库,找到满足您实验需求的方案和参考文献。按细胞类型、递送物质和选择的产品进行筛选,可以轻松找到您需要的答案。
请搜索我们广泛的转染常见问题解答集,以查找与Lipofectamine RNAiMAX试剂相关的答案。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。