Gibco高质量的选择剂为您的研究需求提供独特的解决方案,例如双重选择和快速建立稳定细胞系。

查看我们的 抗生素和抗真菌剂的完整列表。此外,还探索 在细胞培养中使用抗生素的问题。

真核选择性抗生素

选择性抗生素最常见的选择性使用方式常用工作浓度可用粉末规格尺寸可用液体规格尺寸
杀稻瘟菌素真核生物和细菌1-20 µg/mL50 mg10 x 1 mL, 20 mL
庆大霉素(G-418)真核生物100–200 µg/mL 细菌
200-500 μ µg 个哺乳动物细胞
1 g, 5 g, 10 g, 25 g20 mL, 100 mL
潮霉素 B双选择实验和真核细胞200-500 µg/mL20 mL
麦酚酸哺乳动物和细菌25 µg/mL500 mg
嘌呤霉素真核生物和细菌0.2-5 µg/mL10 x 1 mL, 20 mL
博莱霉素哺乳动物,昆虫,酵母,细菌和植物50-400 µg/mL8 x 1.25 mL, 50 mL

细菌选择性抗生素

选择性抗生素最常见的选择使用方式常见工作浓度可用粉末规格尺寸可用液体规格尺寸
放线菌素 D细菌1 µg/mL5 mg , 10 mg
氨苄青霉素钠盐细菌10-25 µg/mL200 mg
杀稻瘟菌素真核生物和细菌50-100 µg/mL50 mg10 x 1 mL, 20 mL
卡邦西林,二钠盐农杆菌大肠杆菌100-500 µg/mL5 g
硫酸卡那霉素细菌100 µg/mL5 g, 25 g100 mL
麦酚酸哺乳动物和细菌25 µg/mL500 mg
硫酸新霉素细菌50 µg/mL100 g
多粘菌素 B 硫酸盐细菌100 单位/mL25 MU
嘌呤霉素真核生物和细菌0.2-5 µg/mL10 x 1 mL, 20 mL
链霉素硫酸盐细菌50-100 µg/mL100 g
博莱霉素哺乳动物、昆虫、酵母、细菌和植物75-400 µg/mL8 x 1.25 mL, 50 mL

真核选择性抗生素

选择性抗生素最常见的选择性使用方式常用工作浓度可用粉末规格尺寸可用液体规格尺寸
杀稻瘟菌素真核生物和细菌1-20 µg/mL50 mg10 x 1 mL, 20 mL
庆大霉素(G-418)真核生物100–200 µg/mL 细菌
200-500 μ µg 个哺乳动物细胞
1 g, 5 g, 10 g, 25 g20 mL, 100 mL
潮霉素 B双选择实验和真核细胞200-500 µg/mL20 mL
麦酚酸哺乳动物和细菌25 µg/mL500 mg
嘌呤霉素真核生物和细菌0.2-5 µg/mL10 x 1 mL, 20 mL
博莱霉素哺乳动物,昆虫,酵母,细菌和植物50-400 µg/mL8 x 1.25 mL, 50 mL

细菌选择性抗生素

选择性抗生素最常见的选择使用方式常见工作浓度可用粉末规格尺寸可用液体规格尺寸
放线菌素 D细菌1 µg/mL5 mg , 10 mg
氨苄青霉素钠盐细菌10-25 µg/mL200 mg
杀稻瘟菌素真核生物和细菌50-100 µg/mL50 mg10 x 1 mL, 20 mL
卡邦西林,二钠盐农杆菌大肠杆菌100-500 µg/mL5 g
硫酸卡那霉素细菌100 µg/mL5 g, 25 g100 mL
麦酚酸哺乳动物和细菌25 µg/mL500 mg
硫酸新霉素细菌50 µg/mL100 g
多粘菌素 B 硫酸盐细菌100 单位/mL25 MU
嘌呤霉素真核生物和细菌0.2-5 µg/mL10 x 1 mL, 20 mL
链霉素硫酸盐细菌50-100 µg/mL100 g
博莱霉素哺乳动物、昆虫、酵母、细菌和植物75-400 µg/mL8 x 1.25 mL, 50 mL


G418,庆大霉素

通常被称为G418或G-418,Gibco Geneticin试剂是一种与庆大霉素相关的氨基糖苷类抗生素,通常用作真核细胞的选择性试剂。作为新霉素硫酸盐的类似物,它干扰真核细胞中80S核糖体的功能和蛋白质合成。

常见哺乳动物表达载体所用的显性抗性基因 (neor) 包含源自转座子 Tn601 (903) 或 Tn5 中的元件。在含有Geneticin筛选试剂的培养基中培养时,可在10至14天内形成表达这些抗性标记的稳定哺乳动物细胞集落。

G418 ,Geneticin 的订购信息

您的G418里有什么?

为了发挥作用,选择性试剂需要可靠、高纯度且性质一致Geneticin选择性抗生素被认为是近20年来的首选试剂,是唯一能够在哺乳动物细胞培养中提供这些特性的G-418试剂。

与其他制造商的G-418产品相比,Geneticin抗生素具有更高的纯度,因此您可以使用更少的量,并产生更大的选择压力,同时最小化来自杂质的毒性。

在评估 G-418 产品时,考虑的不仅仅是效力。还需考虑纯度和工作范围。将这三个特征综合起来,才能真正评估 G-418 的有效性。

纯度 通过HPLC测定,Geneticin选择性试剂的纯度始终保持在90%以上,远高于其他供应商。这意味着:

  • 与其他G-418产品相比,可以使用15-30%更低浓度的Geneticin试剂来获得相似的选择结果。
  • 当使用Geneticin而不是低纯度的G-418产品时,存活的克隆群可能会更快地形成,并且细胞看起来更健康。

效力。效力作为一个描述性术语通常与纯度同义,但质量控制数据中报告的效力与纯度无关。 效价是细菌生长抑制的衡量指标。

  • 庆大霉素通常可以污染G-418 制剂,这会增加细菌检测的效力,但不会影响哺乳动物细胞筛选性。
  • 低纯度G-418中的其他细菌污染物可能对哺乳动物细胞具有毒性,从而降低ED50值。

因此,比较不同供应商之间的效力值不是哺乳动物细胞筛选的相关规范。

ED50测定是在参考的NIH3T3细胞上确定的,它是真正衡量真核生物生长选择性的方法。较高的纯度通常意味着较高的ED50 值。

  • 有毒杂质会降低ED50 值,这意味着抗生素选择的工作范围较窄。
  • 供应商提供的一致的 ED50 值确保了在哺乳动物细胞培养应用中批次之间的性能重复性。

这意味着当购买新批次的Geneticin时,您无需重新优化理想的抗生素浓度(假设没有其他培养基的改变)。来自其他G-418供应商的不同批次显示出的 ED50 值范围很大,可能需要您针对每个批次重新优化。Geneticin 批次间一致性非常高,您不会发现批次间的选择性能有何差异。

纯度 通过HPLC测定,Geneticin选择性试剂的纯度始终保持在90%以上,远高于其他供应商。这意味着:

  • 与其他G-418产品相比,可以使用15-30%更低浓度的Geneticin试剂来获得相似的选择结果。
  • 当使用Geneticin而不是低纯度的G-418产品时,存活的克隆群可能会更快地形成,并且细胞看起来更健康。

效力。效力作为一个描述性术语通常与纯度同义,但质量控制数据中报告的效力与纯度无关。 效价是细菌生长抑制的衡量指标。

  • 庆大霉素通常可以污染G-418 制剂,这会增加细菌检测的效力,但不会影响哺乳动物细胞筛选性。
  • 低纯度G-418中的其他细菌污染物可能对哺乳动物细胞具有毒性,从而降低ED50值。

因此,比较不同供应商之间的效力值不是哺乳动物细胞筛选的相关规范。

ED50测定是在参考的NIH3T3细胞上确定的,它是真正衡量真核生物生长选择性的方法。较高的纯度通常意味着较高的ED50 值。

  • 有毒杂质会降低ED50 值,这意味着抗生素选择的工作范围较窄。
  • 供应商提供的一致的 ED50 值确保了在哺乳动物细胞培养应用中批次之间的性能重复性。

这意味着当购买新批次的Geneticin时,您无需重新优化理想的抗生素浓度(假设没有其他培养基的改变)。来自其他G-418供应商的不同批次显示出的 ED50 值范围很大,可能需要您针对每个批次重新优化。Geneticin 批次间一致性非常高,您不会发现批次间的选择性能有何差异。

规格Invitrogen供应商 A供应商 BGeneticin 优势

纯度 (HPLC)

>90–93%

66 – 75% 

65-82%

纯度明显更高

声称的效力 (µg/mg)

718–735

712-724

673-735

更严格的效力测定

重新测试时的效力 (µg/mg)

718–735

640-659

621-677

实际效力始终较高

ED50 测定 (µg/ml)

2,450–2,700

1,350–3,100

600–2,350

可靠的批次间筛选

根据 Invitrogen 的 Geneticin 原材料 QC 实验方案,分析了两个不同供应商的多个 G-418 批次。据观察,使用供应商 A 和供应商 B 的 G-418 获得的结果中所有测量参数都有很大差异,包括实际效力与所提供产品文献中报告的值不一致。重新测试的效力值与其他供应商声称的值存在差异可能是因为 G-418 参考批次和测定程序存在差异。
HPLC data of Geneticin compared to supplier A and supplier B

Geneticin 与供应商 A 和供应商 B 的选定批次 G-418 的 HPLC 数据对比。根据在Clinical Chem中发布的程序对样品进行制备和分析。(1978),第24卷,第11号,第1940页。


博莱霉素

Gibco Zeocin 在多种生物体中都非常有效,包括哺乳动物和昆虫细胞系以及酵母、细菌和植物。作为博来霉素家族的一员,Zeocin 可通过嵌入和裂解 DNA 来导致细胞死亡。

由 Sh ble 基因产物实现对 Zeocin 的耐受性,它可结合抗生素,防止其结合 DNA。该筛选试剂对多种细胞类型有效,因此真核表达载体只需要携带一种药物筛选标记。这可以减少载体的尺寸,使亚克隆和转染更容易、更有效。

分子式:C55H83N19O21S2Cu

试剂订购信息

细胞类型浓度(μg/mL)*Invitrogen 携带抗性标记的载体
293 HEK200-400InsectSelect 系统、pIZ/V5-His 载体(昆虫细胞中的稳定表达)
CHO~250pSecTag2、pSecTag2/Hygro(分泌型哺乳动物表达)
COS-1~400ZeoCassette载体(组成型 Zeocin 耐受载体)
HeLa<~150pcDNA4 载体(组成型哺乳动物表达)
Jurkat T 细胞~200pPICZ 和 pPICZ α 载体(毕赤酵母中的诱导表达)
NIH3T3~400T-REx 系统、pcDNA4/TO 载体(诱导型哺乳动物表达)
毕赤酵母~100 
S2 果蝇~75 
Sf9 昆虫~250pGAPZ 和 pGAPZ α 载体(毕赤酵母中的诱导表达)

* 应使用杀菌曲线确定用于筛选细胞系的适宜浓度。


嘌呤霉素

嘌呤霉素(Puromycin)是一种由白黑链霉菌产生的氨基苷类抗生素。其可以打乱核糖体上的肽转运,造成翻译过程中不成熟链终止,从而抑制蛋白质合成。在原核和真核细胞中,杀稻瘟菌素都是强效翻译抑制剂。链霉菌中的嘌呤霉素N-乙酰转移酶基因(pac)可使机体对嘌呤霉素耐药。

嘌呤霉素的低浓度选择

嘌呤霉素作用迅速,在低浓度下即可快速导致细胞死亡。哺乳动物贴壁细胞对浓度为 2-5 µg/mL 的嘌呤霉素敏感,而悬浮细胞对于浓度低至 0.5-2 µg/mL 的嘌呤霉素敏感。对嘌呤霉素稳定耐药的哺乳细胞可在一周内生成。

试剂订购信息

细胞系浓度 [µg/ml]参比
A549(肺癌)

1.5

Mol Cell Biol 27:324–339 (2007)
1.5J Biol Chem 283:33394-33405 (2008)
H1299(非小细胞肺癌)1Nucleic Acids Res 35:e17 (2007)
1.5J Biol Chem  283:33394-33405 (2008)
2.5PNAS 105:1937-1942, 2008.
HEK293(人胚胎肾脏)0.25Nucleic Acids Res36:e83 (2008)
2Mol Cell Biol 28:4104-4115 (2008)
3Mol Cell Biol 27:4708–4719 (2007)
人宫颈癌细胞1–2Genes Cells12:397–406 (2007)
2Mol Cell Biol 28:4104-4115 (2008)
2PNAS 105:16490-16495, 2008.
Hep G2(人肝细胞癌)0.3J Biol Chem 283:21462-21468 (2008)
2Mol Cell Biol 28:4104-4115 (2008)
2J Biol Chem 283:708-715 (2008)
HT1080(人 纤维肉瘤)0.2–0.4J Biol Chem 282:29314-29322 (2007)
1J Virol 82:3320-3328 (2008)
2Cancer Res68: 1417–1426 (2008)
人胚胎干 (ES) 细胞0.5Nucleic Acids Res 36:e148 (2008)
1Stem Cells26:850–863 (2008)
5Stem Cells26:2245-2256 (2008)

MCF-7(人乳腺癌)

0.45RNA 13 : 1375-1383 (2007)
1Cancer Res 68:1319-1328 (2008)
2Mol Cell Biol 28:4104-4115 (2008)
MDA-MB-231(人乳腺癌)0.5Mol Cell Biol 28:997-1006 (2008)
1.5Mol Cell Biol 27:324339 (2007)
5Mol Cell Biol  28:687-704 (2008)


杀稻瘟菌素

杀稻瘟菌素是一种从灰色链霉菌中分离出的核苷类抗生素。在原核和真核细胞中,杀稻瘟菌素都是强效翻译抑制剂。杀稻瘟菌素抗性由土曲霉bsd 基因的产物决定。

低浓度杀稻瘟菌素选择

杀稻瘟菌素作用迅速,在低浓度下即可快速导致细胞死亡。大肠杆菌菌株通常对 50 μg/ml 的浓度敏感,而哺乳动物细胞对低至 2 至 10 μg/ml 的浓度已经很敏感。细胞死亡发生迅速,可在不到一周内生成具有稳定的杀稻瘟菌素抗性的哺乳动物细胞系。

试剂订购信息

细胞系浓度 [µg/ml]参考文献
HT1080
(人纤维肉瘤)

1–5

10

20

J Biol Chem 283:11556-11564 (2008)

J Virol 82:7325-7335 (2008)

Mol Biol Cell 19:8–16 (2008)

HeLa
(人宫颈癌细胞)

10

10

20

J Gen Virol 89:2611–2621 (2008)

Mol Biol Cell 19:8–16 (2008)

J Immunol 181:22–26 (2008)

HEK293
(人胚胎肾细胞)

5

10

J Biol Chem 283:27534-27546 (2008)

J Virol 82:1665-1678 (2008)

Hep G2
(人肝细胞癌)

4

5

J Biol Chem 283:16320-16331 (2008)

Blood :113.1786–1793 (2009)

HT1080
(人纤维肉瘤)

1–5

10

20

J Biol Chem 283:11556-11564 (2008)

J Virol 82:7325-7335 (2008)

Mol Biol Cell 19:8–16 (2008)

MCF-7
(人乳腺癌)

2

5

Mol Cancer Res 6:555–567 (2008)

Mol Endocrinol 22: 361–379 (2008)

A549(肺癌)10Cancer Res 68:5040–5048 (2008)


潮霉素 B

潮霉素 B 是一种氨基糖苷类抗生素,通过干扰易位和促使80S核糖体的错译来抑制蛋白质合成。由于其作用模式不同于 Gibco Geneticin、杀稻瘟菌素 S 或 Gibco Zeocin,其非常适合与其他筛选试剂配合使用进行双筛选实验。

潮霉素选择基因和浓度

對潮霉素 B 的耐药性由大肠杆菌潮霉素抗性基因(hyg 或 hph)决定。筛选的浓度范围为 100-1000 μg/ml(通常为 200 μg/ml),应针对每个细胞系进行优化。

分子式:C20H37N3O13
FW:527.5 g/mole

试剂订购信息

细胞类型浓度(μg/mL)*Invitrogen 携带抗性标记的载体
CHO~250pIND/Hygro 载体(Ecdyone 诱导型哺乳动物表达)
HeLa~550pcDNA5 载体(组成型哺乳动物表达)
Jurkat T细胞~1,000pSecTag2/Hygro 载体(分泌型哺乳动物表达)
S2 果蝇200-300pREP 载体(游离型哺乳动物表达)
pcoHygro (DES 筛选载体)

* 应使用杀菌曲线确定用于筛选细胞系的适宜浓度。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。

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