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对微小RNA (miRNA) 等调控 RNA 的功能分析可以帮助破译发育和疾病病因学中的复杂细胞过程。
我们的一套 miRNA 模拟物和抑制剂包括:
我们推荐 mirVana模拟物和抑制剂用于开始对内源性 微小RNA 进行功能分析并寻找特异性和效力方面最新进展的任何人。我们的 Pre-miR 和 Anti-miR 试剂仍然与受益于这些原始产品形式的正在进行的研究相关。
mirVana miRNA 模拟物是经过化学修饰的双链 RNA 分子,旨在模拟内源性 微小RNA (miRNA),由于 mRNA 隔离或降解导致靶 mRNA 翻译下调。与天然 miRNA 一样,这些模拟物有两条链——成熟链或引导链,它具有功能性并被 Argonaute (Ago) 蛋白用于靶向 mRNA,而过客链(以前称为星链)可能会也可能不会有自己的天然靶标。
mirVana miRNA 模拟物中的化学修饰使过客链失活,以帮助确保引导链(代表所需的成熟 miRNA)被 Ago 吸收以产生 miRNA 效应(图 1)。 mirVana miRNA 模拟物旨在在低至 0.3 nM 的浓度下产生最大且一致的效果,可单独使用或作为文库使用。
图 1. mirVana miRNA 模拟物具有高特异性。用浓度为 3 nM 的六种不同 mirVana miRNA 模拟物之一和相应的报告质粒转染 HeLa 细胞。每个 miRNA 模拟物链的报告基因表达的倍数变化是通过测量模拟物存在时相对于阴性对照(设置为 1.0)的表达来确定的。每个质粒都具有以正向 (Fwd) 克隆的报告基因(以测量 miRNA 模拟物成熟链的活性),以及以反向/互补方向 (Rev) 克隆的报告基因(以测试过客链的活性)。对于所有六种模拟物,成熟链活性高(与阴性对照相比,报告基因表达减少 5 至 10 倍),而过客链活性低或不存在(类似于阴性对照)。
mirVana miRNA 抑制剂是化学修饰的单链寡核苷酸,具有专利二级结构,旨在特异性结合并抑制内源性 miRNA,从而上调靶 mRNA 翻译。与竞争对手相比,这些抑制剂在最低的 miRNA 抑制剂浓度下具有最强效的体外抑制作用(图 2)。与模拟物一样,mirVana miRNA 抑制剂可单独使用或作为文库使用。
图 2. mirVana miRNA 抑制剂比主要竞争对手的抑制剂更有效。使用 Lipofectamine RNAiMAX 试剂将mirVana miRNA 抑制剂和其他两种市售 let-7 抑制剂以 10 nM 浓度分别转染到 HeLa 细胞中。24 小时后,使用 TaqMan 分析通过 qRT-PCR 测量 HMGA2 mRNA 水平(let-7 微小RNA 的天然靶标)。
图 3. mirVana miRNA 抑制剂在体内有效抑制 miRNA。miR-122 或 Negative Control #1 mirVana miRNA 抑制剂与 Invivofectamine 2.0 试剂复合,并以 7 mg/kg 体重连续三天注射到 Balb-C 小鼠的尾静脉中。最后一次注射后 24 小时,使用 TaqMan 测定法在肝脏中测量 miR-122 的四种天然靶标的表达水平。与未接受治疗或阴性对照的小鼠相比,在用 miR-122 抑制剂治疗的小鼠中检测到所有四种 mRNA 的显著上调。结果表明,mirVana miRNA 抑制剂可通过 Invivofectamine 2.0 有效地输送到肝脏,在那里它们使 miR-122 失活,导致被 miR-122 自然抑制的基因上调。
除了我们的预定义 miRNA 文库之外,mirVana 模拟物和抑制剂也可作为定制集合使用。
产品线 | 每孔数量 |
---|---|
mirVana miRNA 模拟物——人、小鼠或大鼠 | 0.25 或 1.0 nmol/孔 |
mirVana miRNA 抑制剂——人、小鼠或大鼠 | 0.25 或 1.0 nmol/孔 |
mirVana miRNA 模拟物是经过化学修饰的双链 RNA 分子,旨在模拟内源性 微小RNA (miRNA),由于 mRNA 隔离或降解导致靶 mRNA 翻译下调。与天然 miRNA 一样,这些模拟物有两条链——成熟链或引导链,它具有功能性并被 Argonaute (Ago) 蛋白用于靶向 mRNA,而过客链(以前称为星链)可能会也可能不会有自己的天然靶标。
mirVana miRNA 模拟物中的化学修饰使过客链失活,以帮助确保引导链(代表所需的成熟 miRNA)被 Ago 吸收以产生 miRNA 效应(图 1)。 mirVana miRNA 模拟物旨在在低至 0.3 nM 的浓度下产生最大且一致的效果,可单独使用或作为文库使用。
图 1. mirVana miRNA 模拟物具有高特异性。用浓度为 3 nM 的六种不同 mirVana miRNA 模拟物之一和相应的报告质粒转染 HeLa 细胞。每个 miRNA 模拟物链的报告基因表达的倍数变化是通过测量模拟物存在时相对于阴性对照(设置为 1.0)的表达来确定的。每个质粒都具有以正向 (Fwd) 克隆的报告基因(以测量 miRNA 模拟物成熟链的活性),以及以反向/互补方向 (Rev) 克隆的报告基因(以测试过客链的活性)。对于所有六种模拟物,成熟链活性高(与阴性对照相比,报告基因表达减少 5 至 10 倍),而过客链活性低或不存在(类似于阴性对照)。
mirVana miRNA 抑制剂是化学修饰的单链寡核苷酸,具有专利二级结构,旨在特异性结合并抑制内源性 miRNA,从而上调靶 mRNA 翻译。与竞争对手相比,这些抑制剂在最低的 miRNA 抑制剂浓度下具有最强效的体外抑制作用(图 2)。与模拟物一样,mirVana miRNA 抑制剂可单独使用或作为文库使用。
图 2. mirVana miRNA 抑制剂比主要竞争对手的抑制剂更有效。使用 Lipofectamine RNAiMAX 试剂将mirVana miRNA 抑制剂和其他两种市售 let-7 抑制剂以 10 nM 浓度分别转染到 HeLa 细胞中。24 小时后,使用 TaqMan 分析通过 qRT-PCR 测量 HMGA2 mRNA 水平(let-7 微小RNA 的天然靶标)。
图 3. mirVana miRNA 抑制剂在体内有效抑制 miRNA。miR-122 或 Negative Control #1 mirVana miRNA 抑制剂与 Invivofectamine 2.0 试剂复合,并以 7 mg/kg 体重连续三天注射到 Balb-C 小鼠的尾静脉中。最后一次注射后 24 小时,使用 TaqMan 测定法在肝脏中测量 miR-122 的四种天然靶标的表达水平。与未接受治疗或阴性对照的小鼠相比,在用 miR-122 抑制剂治疗的小鼠中检测到所有四种 mRNA 的显著上调。结果表明,mirVana miRNA 抑制剂可通过 Invivofectamine 2.0 有效地输送到肝脏,在那里它们使 miR-122 失活,导致被 miR-122 自然抑制的基因上调。
除了我们的预定义 miRNA 文库之外,mirVana 模拟物和抑制剂也可作为定制集合使用。
产品线 | 每孔数量 |
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mirVana miRNA 模拟物——人、小鼠或大鼠 | 0.25 或 1.0 nmol/孔 |
mirVana miRNA 抑制剂——人、小鼠或大鼠 | 0.25 或 1.0 nmol/孔 |
miRNA 需要特殊的工具来进行准确度和灵敏度分析。我们提供广泛的产品组合,为 miRNA 表达谱分析或靶向定量/靶点验证提供完整的解决方案。
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