经验证的阳性和阴性 CRISPR 对照

高质量的对照对于成功开发 CRISPR-Cas9 实验以及进行高通量 CRISPR-Cas9 筛选至关重要。Thermo Fisher Scientific 提供全面的经验证的阳性和阴性对照合集,可帮助优化递送条件,尽可能提高编辑效率并建立靶向编辑结果选择标准。这些对照将有助于建立具有较高信噪比的稳健编辑实验。

Gloved hand holding a 96-well plate with colorful samples

关于 CRISPR 对照

对照类型描述建议用途 
CRISPR 阳性对照 

CRISPR 阳性对照是监测实验设计中 CRISPR 试剂介导的基因编辑效率所必需的。阳性对照是经验证的 gRNA 序列,已证明其可在不同细胞类型中进行高效编辑。赛默飞世尔科技提供的一些阳性对照可在多种细胞类型中实现高达 90% 或更高的编辑效率。

可提供单个 LentiArray 和 TrueGuide gRNA。 

阳性对照专门用于检测开发过程,用于确定提供最高细胞模型编辑效率的条件。 

针对特异性基因的单个 gRNAs 可作为实验开发过程中的对照,也可以用作筛选实验时的板阳性对照。

 

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CRISPR 阴性对照 CRISPR 阴性对照是必要的,以表明观察到的表型是预期基因修饰的结果,而不是其他非特异性事件的结果。阴性对照是不识别人类基因组中任意序列的非靶向对照 gRNA 序列。
赛默飞世尔科技非靶向对照 gRNA 阴性对照有多种包装规格,可用于检测开发过程,也可以用作运行筛选检测时的板对照。
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CRISPR 递送优化对照CRISPR 递送优化对照是确保转染成功所必需的。对于 LentiArray CRISPR 文库,Thermo Fisher Scientific 提供了一组对照慢病毒,可用作表达 GFP 的阴性或阳性对照。 
GFP 标记可直观地读取数据,有助于快速优化病毒递送条件。
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数据:使用 GFP 对照优化检测设计

在下列实验中,使用 LentiArray CRISPR 对照慢病毒、人 HPRT 和 GFP 转染 HT1080 细胞。该技术可直观地读取转导效率,有助于确定所用细胞系的感染复数 (MOI)。本例说明了如何使用可表达绿色荧光蛋白 (GFP) 的对照优化转导和检测设计。

两张绿色荧光蛋白发光细胞的显微图像,一张是 CRISPR 阳性对照,一张是 CRISPR 阴性对照

图 1.经 LentiArray CRISPR 阳性对照慢病毒、人 HPRT 和 GFP 感染的 HT1080 细胞。 

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仅供科研使用,不可用于诊断目的。