Search Thermo Fisher Scientific
AmpliTaq Gold DNA 热启动聚合酶
Applied Biosystems AmpliTaq Gold 及 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶为热启动酶，利用化学修饰抑制其在室温下的酶活性。一旦激活，修饰物即被释放，使酶在高于引物退火温度的温度下被激活。因此，所得到的延伸和扩增产物都具有高度特异性的。
什么是热启动 PCR？
了解PCR扩增中的常见问题以及如何使用热启动PCR解决这些问题。发现不同类型的热启动酶修饰，如何选择适合您的PCR的热启动DNA聚合酶。
AmpliTaq Gold 产品形式
两种形式的产品都用于热启动反应，AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶更具全能性，因其能更好地扩增高 GC 含量模板，并且在运输、储存和处理方面更灵活。同时提供和我们最新的Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶的比较，它可能更适合您的PCR应用。
| AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶 | AmpliTaq Gold DNA 聚合酶 | Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶 | |
|---|---|---|---|
| 热启动修饰 | 化学修饰 | 化学修饰 | 抗体修饰 |
| 酶激活时间 | 10分钟 | 10分钟 | 2分钟 |
| 用退火温度60℃ | 否 | 否 | 是 |
| DNA合成速度 | 60 秒/kb | 60 秒/kb | 15 秒/kbb |
| 扩增子长度 | 长达 5 kb | 长达 5 kb | 长达 5 kb |
| 抑制剂耐受 | 否 | 否 | 是 |
| 高 GC 含量序列扩增 | ++ | + | +++ |
| PCR反应液的室温稳定性 | 是 | 是 | 高达24小时 |
| DNA 残留水平低 |
|
| |
| 单酶 | |||
| 预混液形式 | 无色 | 无色 绿色 | |
| 储存温度 | –20°C** | –20°C | –20°C |
| 室温运输 | 是 | 否 | 否 |
*包含电泳跟踪染料和密度试剂，用于PCR产品的直接凝胶上样。
**解冻后，预混液可在+4°C下保存3个月。
AmpliTaq Gold 与 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶有何区别？
相对于原来的 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶，AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶经额外专利分离工艺进一步纯化，减少了酶制剂中细菌 DNA 残留。当与增强型 360 Gold buffer搭配使用时，这种超纯酶除具有热启动功能外，还可减少假阳性结果、扩增低浓度靶序列，包括细菌和人类基因组等各种模板扩增。
AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶的纯度使其能有效扩增低拷贝靶标，从而适于检测低含量或降解的序列。AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶可扩增长达 5 kb 的序列。
AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶的优势
图 1.AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶可扩增多种靶标。图示为使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶扩增所得的产物。PCR 以每个反应 1 ng 模板 DNA 重复两次。扩增子的长度范围为 300 至 1400 碱基对 (bp)，平均长度为 553 bp。扩增子的区别如下：高 AT含量；易扩增；引物二聚体；同聚物；测序复杂的长片段；高 GC含量。高 GC 含量扩增子反应中包含 5 uL 360 GC Enhancer。
图 2.AmpliSeq Gold 360 DNA 聚合酶用于检测低拷贝靶标时的灵敏度。凝胶图为使用 0 至 80 拷贝起始 DNA 以及 2.0 mM MgCl2，在标准热循环条件下扩增 β-肌动蛋白基因的产物。
图 3.使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶生成的 PCR 产物可获得高质量的测序数据。使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶和 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶扩增常规（图 A）和高 GC 含量（图 B）的靶标，将扩增产物进行测序（每次测序反应 10 ng PCR 产物）。使用 BigDye Terminator v3.1 在标准热循环条件下对样品进行循环测序。使用 BigDye Xterminator 纯化试剂盒纯化循环测序反应物，然后将样品加入含 POP-7 聚合物的 Applied Biosystems 3730xl DNA 分析仪。
图 1.AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶可扩增多种靶标。图示为使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶扩增所得的产物。PCR 以每个反应 1 ng 模板 DNA 重复两次。扩增子的长度范围为 300 至 1400 碱基对 (bp)，平均长度为 553 bp。扩增子的区别如下：高 AT含量；易扩增；引物二聚体；同聚物；测序复杂的长片段；高 GC含量。高 GC 含量扩增子反应中包含 5 uL 360 GC Enhancer。
图 2.AmpliSeq Gold 360 DNA 聚合酶用于检测低拷贝靶标时的灵敏度。凝胶图为使用 0 至 80 拷贝起始 DNA 以及 2.0 mM MgCl2，在标准热循环条件下扩增 β-肌动蛋白基因的产物。
图 3.使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶生成的 PCR 产物可获得高质量的测序数据。使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶和 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶扩增常规（图 A）和高 GC 含量（图 B）的靶标，将扩增产物进行测序（每次测序反应 10 ng PCR 产物）。使用 BigDye Terminator v3.1 在标准热循环条件下对样品进行循环测序。使用 BigDye Xterminator 纯化试剂盒纯化循环测序反应物，然后将样品加入含 POP-7 聚合物的 Applied Biosystems 3730xl DNA 分析仪。
订购信息
相关资源
产品使用手册
PCR学习资源
了解PCR的历史、PCR反应配制所需考虑的因素、DNA聚合酶选择的重要性、常见PCR方法和应用以及疑难解答。
分子生物学网络讲座
查看我们的网络讲座系列，了解有关逆转录、PCR 和分子克隆等分子生物学主题的相关信息。
支持中心
PCR 和 cDNA 合成支持中心
查找终点 PCR 和 cDNA 应用相关的实验建议、疑难解答及相关资源。
OEM 和定制 PCR 解决方案
根据您的特定要求，探索可定制的生产解决方案、产品标签和包装功能。
联系我们
通过电子邮件或电话联系我们的技术应用专家，了解有关 PCR 酶和预混液的其它问题。
仅供科研使用，不可用于诊断目的。