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AmpliTaq Gold DNA 聚合酶
Applied Biosystems AmpliTaq Gold 及 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶为热启动酶，利用化学修饰抑制其在室温下的酶活性。一旦激活，修饰物即被释放，使酶在高于引物退火温度的温度下被激活。因此，所得到的延伸和扩增产物都是由高度特异性的。
AmpliTaq Gold 产品形式
尽管两种形式的产品都用于热启动反应，但 AmpliTaq Gold 360 聚合酶因其能更好地扩增高 GC 含量模板而更具全能性，在运输、储存和处理方面更灵活。
| AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶1 | AmpliTaq Gold DNA 聚合酶 | |
|---|---|---|
| 热启动修饰 | 化学修饰 | 化学修饰 |
| 扩增子长度 | 长达 5 kb | 长达 5 kb |
| 聚合酶激活步骤 | 在 95°C 条件下反应 10 分钟 | 在 95°C 条件下反应 10 分钟 |
| 高 GC 含量序列扩增 | 是 | 否 |
| 单酶 | ||
| 储存温度: | -20°C 或 +4°C | -20°C |
| 常温运输 | 是 | 否 |
| 预混液形式 | 是 | 否 |
1 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶与 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶是同一种酶，但前者经过进一步纯化，经验证DNA 残留水平更低：人类 DNA ≤2 拷贝/10 U；细菌 DNA ≤1.4 拷贝；大肠杆菌 DNA/ 5 U。
AmpliTaq Gold 与 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶有何区别？
相对于原来的 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶，AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶经额外专利分离工艺进一步纯化，减少了酶制剂中细菌 DNA 残留。当与增强型 360 Gold buffer搭配使用时，这种超纯酶除具有热启动功能外，还可减少假阳性结果、扩增低浓度靶序列，包括细菌和人类基因组等各种模板扩增。
AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶的纯度使其能有效扩增低拷贝靶标，从而适于检测低含量或降解的序列。AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶可扩增长达 5 kb 的序列。
AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶的优势
图 1.AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶可扩增多种靶标。图示为使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶扩增所得的产物。PCR 以每个反应 1 ng 模板 DNA 重复两次。扩增子的长度范围为 300 至 1400 碱基对 (bp)，平均长度为 553 bp。扩增子的区别如下：高 AT含量；易扩增；引物二聚体；同聚物；测序复杂的长片段；高 GC含量。高 GC 含量扩增子反应中包含 5 uL 360 GC Enhancer。
图 2.AmpliSeq Gold 360 DNA 聚合酶用于检测低拷贝靶标时的灵敏度。凝胶图为使用 0 至 80 拷贝起始 DNA 以及 2.0 mM MgCl2，在标准热循环条件下扩增 β-肌动蛋白基因的产物。
图 3.使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶生成的 PCR 产物可获得高质量的测序数据。使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶和 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶扩增常规（图 A）和高 GC 含量（图 B）的靶标，将扩增产物进行测序（每次测序反应 10 ng PCR 产物）。使用 BigDye Terminator v3.1 在标准热循环条件下对样品进行循环测序。使用 BigDye Xterminator 纯化试剂盒纯化循环测序反应物，然后将样品加入含 POP-7 聚合物的 Applied Biosystems 3730xl DNA 分析仪。
图 1.AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶可扩增多种靶标。图示为使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶扩增所得的产物。PCR 以每个反应 1 ng 模板 DNA 重复两次。扩增子的长度范围为 300 至 1400 碱基对 (bp)，平均长度为 553 bp。扩增子的区别如下：高 AT含量；易扩增；引物二聚体；同聚物；测序复杂的长片段；高 GC含量。高 GC 含量扩增子反应中包含 5 uL 360 GC Enhancer。
图 2.AmpliSeq Gold 360 DNA 聚合酶用于检测低拷贝靶标时的灵敏度。凝胶图为使用 0 至 80 拷贝起始 DNA 以及 2.0 mM MgCl2，在标准热循环条件下扩增 β-肌动蛋白基因的产物。
图 3.使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶生成的 PCR 产物可获得高质量的测序数据。使用 AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶和 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶扩增常规（图 A）和高 GC 含量（图 B）的靶标，将扩增产物进行测序（每次测序反应 10 ng PCR 产物）。使用 BigDye Terminator v3.1 在标准热循环条件下对样品进行循环测序。使用 BigDye Xterminator 纯化试剂盒纯化循环测序反应物，然后将样品加入含 POP-7 聚合物的 Applied Biosystems 3730xl DNA 分析仪。
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