Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶

使用常规PCR试剂进行PCR扩增时，由于不同引物的退火温度和延伸时间不一致，需要针对每个DNA片段的扩增设计特定的PCR扩增方案。因此，不同的PCR反应不能同时在一个PCR运行中进行扩增。使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶，可以使用通用退火温度，且延伸时间可按照最长片段计算，因而可实现不同的 PCR 反应同时进行扩增。此外，Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶是一种“快速”DNA 聚合酶；因此，这种新一代 DNA 聚合酶结合通用 PCR 扩增方案后，可在 30 分钟内通过快速扩增循环完成所有 PCR 反应。

图1：可同时进行PCR扩增，极大的节省时间。使用常规PCR试剂进行PCR扩增时，由于不同引物的退火温度和延伸时间不一致，所以需要针对每个DNA片段设计特定的扩增方案。因此，使用传统的PCR试剂，多个目标片段通常不能在同一个PCR运行中一起扩增。使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶，可以使用通用退火温度，且延伸时间可按照最长片段计算，因而可实现不同的 PCR 反应同时进行扩增。此外，Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶是一种快速的 DNA 聚合酶，只需 30 分钟便可获得 PCR 结果。

图2：Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶可以实现短片段和长片段的同时扩增。使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶或其它热启动 DNA 聚合酶，在 50μL 反应体系中从 50ng 人基因组 DNA 中扩增 132bp、251bp、1,005bp 和 3.9kb 片段。所有四个目的片段都使用相同的PCR反应条件，图中已标注退火和延伸条件设置。所使用的标准参照物为 Thermo Scientific ZipRuler Express DNA Ladder 2。

Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶是一种经分子改造的酶，DNA 合成速率得到提高。因此，当使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶时，获得 PCR 结果的速度通常比使用其它热启动 Taq DNA 聚合酶快两倍以上。

图3：快速扩增，缩短PCR运行时间。分别使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶和来自其它供应商的热启动 DNA 聚合酶，在 50μL 反应体系中，对 50ng 人基因组 DNA 中的 529bp 片段扩增 35 个循环。每种聚合酶的扩增时间以紫色显示，ProFlex PCR系统上的渐变时间（6°C /秒升温速率）以红色显示。在1％TAE琼脂糖凝胶中分析PCR产物，结果显示于图下方。所用的 DNA 标准参照物为 ZipRuler Express DNA Ladder 2。

Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶所具备的高灵敏度，可确保在起始材料有限或样本中目标 DNA 浓度较低的实验中，成功扩增出特定 PCR 产物。 

图4：从少量起始 DNA 中实现高灵敏度和可靠的扩增。使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶和其它 DNA 聚合酶，在 50μL PCR 反应体系中，分别从 0（无模板对照）、0.016、0.08、0.4、2、10、50ng、250ng 人基因组 DNA 中扩增 529bp 片段。预估的拷贝数约为每0.016ng人类基因组DNA 5个拷贝。分子量标准参照物为 ZipRuler Express DNA Ladder 2。

Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶经过分子改造，对抑制剂具有耐受性，可对非最佳纯度的样品实现成功的扩增。

图5：耐受抑制剂。使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶和其它 DNA 聚合酶，从人基因组 DNA 中扩增 1kb 片段。反应混合物包含：1—腐植酸（终浓度为1.3μg/ mL），2—氯化血红素（终浓度为6μM），3—木聚糖（终浓度为0.26 mg / mL）或4—不含抑制剂对照。分子量标准参照物为 ZipRuler Express DNA Ladder 2。

Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶和 2X 预混液的配方，使得研究人员能够对富含 AT 到富含 GC 的多种靶标进行扩增。产品随附提供一管单独的Platinum GC Enhancer，用于对难以扩增、高GC含量的靶标进行特异性扩增并提高产量。

由 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶产生的 PCR 片段适用于 Sanger 测序。该酶具有出色的性能，通用引物退火温度和快速合成功能，可以轻松简便地生成用于 Sanger 测序的 PCR 扩增子。