Platinum Direct PCR 通用预混液

Invitrogen Platinum直接 PCR 通用预混液旨在从各种类型样本中直接扩增DNA靶标,无需纯化 DNA。其为从原始样本中直接扩增靶标 DNA 的理想选择,可用于小鼠基因分型、CRISPR 基因编辑细胞的分析鉴定和珍贵样本的靶标 DNA 检测等实验应用。

产品优势

  • 通用型—一种预混液适用于不同样本类型,一种退火温度适用于不同引物
  • 方便—缓冲液经优化实现在 60 °C 进行引物退火,减少了 PCR 优化步骤
  • 快速—无需纯化 DNA; DNA 合成速率为 20s/ kb
  • 高效—高抑制剂耐受性; 包含 GC enhancer,用于扩增高 GC 含量序列
  • 灵活—同时提供可选的裂解方案,可用于样本长期储存和进一步检测
  • 减少移液—预混液含上样染料,扩增后可直接上样电泳

该预混液由 Invitrogen Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶  配制而成,具有高抑制剂耐受性、快速 DNA 合成能力和高灵敏度扩增能力。除DNA聚合酶外,预混液中还包含 dNTP、其它反应组分和用于直接凝胶电泳上样的绿色染料。试剂盒中还单独提供裂解液、蛋白酶 K 和 Invitrogen Platinum GC Enhancer。

订购信息

什么是直接 PCR?

如何使用直接 PCR 对样本进行 PCR 分析

查看什么是直接 PCR?它是如何实现的以及如何充分利用 直接 PCR 试剂盒?

Platinum 直接PCR 通用预混液可检测的样本类型

人源组织

Platinum直接 PCR 通用预混液可从各种人源组织中成功扩增靶标 DNA 序列,这些组织包括唾液、口腔拭子、血液(保存于柠檬酸盐、肝素或 EDTA 中)、指甲、头发和 HeLa S3 细胞等。

从各种人源组织中扩增出的 0.35 kb 和 7.5 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图2.对各种人源组织直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从各种类型的人源组织中扩增 0.35 kb 和 7.5 kb 片段。采用裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 Invitrogen TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

小鼠样本

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从各种类型小鼠组织(耳、尾巴、肾脏、心脏、胰腺、肝脏、脾脏、脑、头发、骨髓、骨骼和牙齿)中扩增出靶标 DNA 序列。

从各种小鼠组织中扩增出的 0.3 kb 和 3.6 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 3.对各种小鼠组织直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从各种类型的小鼠组织中扩增出 0.3 kb 和 3.6 kb 片段。按照裂解方案进行直接PCR。将软组织切成 1 mm 小块,将硬组织(如骨头)在陶瓷研磨机中破碎成 1-2 mm小块。 所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

植物样本

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从各种植物组织中扩增出靶标 DNA 序列,植物组织包括小麦叶、烟草叶、桦木叶、枫叶、木兰叶、兰花叶、拟南芥叶片、玫瑰叶、菩提树叶、丁香叶、草莓叶、淤泥草莓叶、崖柏叶、松树穗、云杉穗、玫瑰果花瓣、草莓、玉米种子、花生、小麦种子、烟草种子、向日葵种子和小麦根。

从各种植物组织中扩增出的 0.3 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 4.对不同植物物种和组织类型直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从列出的植物叶片、种子、根、果实中直接扩增出 0.3 kb 的片段。按照直接方案,使用 1 mm 叶片或压碎的种子进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

藻类

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从含或不含细胞壁的藻类中成功扩增出靶标DNA 序列。

从含或不含细胞壁的藻类中直接扩增出的 0.11 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 5.对藻类直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum 直接 PCR 通用预混液从含和不含细胞壁的单细胞绿藻Chlamydomonas reinhardtii 中直接扩增出一个0.11 kb 片段。按照裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

鸟类组织

Platinum直接 PCR 通用预混液成功地从各种鸟类组织(鸡软骨、鸡肉和鹌鹑羽毛)中成功扩增出靶标 DNA 序列

从各种鸟类组织中直接扩增出的 0.24 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 6.对鸟类组织直接进行 DNA 扩增。使用Platinum直接 PCR 通用预混液从所列出的鸡(软骨)和鹌鹑(羽毛)中直接扩增出 0.24 kb 片段。按照裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

细菌种类

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌中扩增出靶 DNA 序列。

从大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中扩增出的 0.62 kb 和 0.59 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 7.对细菌直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液直接从革兰氏阴性菌(Escherichia coli )和革兰氏阳性菌(Bacillus subtilis )菌中分别扩增出 0.62 kb 和 0.59 kb 片段。使用裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

Platinum Direct PCR Universal Master Mix可用于细菌DNA检测。

斑马鱼组织

Platinum直接PCR 通用预混液成功从斑马鱼多种组织-鳍、鳞片、肌肉和大脑中成功扩增出靶标 DNA 序列。

从斑马鱼鳍中扩增的 PCR 产物的凝胶电泳图像

图 9.对斑马鱼直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从斑马鱼组织中扩增出 0.35 kb 和 1 kb 片段。使用裂解方案进行直接PCR扩增。可以看到,可从斑马鱼的鳍、鳞片、肌肉和大脑组织中成功扩增出目的片段。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

果蝇组织

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从Drosophila各种组织(全身、半身、头部、半幼虫)中直接扩增出靶标 DNA 序列。

从果蝇组织扩增的 PCR 产物的凝胶电泳图像

图 10.直接对Drosophila直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从各种Drosophila 各种组织中扩增 0.66 kb 的片段。使用裂解方案进行直接PCR扩增从果蝇身体、头部和幼虫中均成功进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

血液

Platinum直接 PCR 通用预混液从保存在柠檬酸、肝素或 EDTA 中的人血中成功直接扩增出靶标 DNA 序列。

从保存在柠檬酸盐、肝素和 EDTA 中的人血中直接扩增出的 0.35 kb 和 7.5 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 11.对人血样本直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从保存在柠檬酸、肝素或 EDTA 中的人血中直接扩增出 0.35 kb 和 7.5 kb 的片段。使用裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

FFPE样本

Platinum直接PCR 通用预混液从小鼠肾脏 FFPE 样本中成功扩增出靶标 DNA 序列。

从小鼠肾脏 FFPE 块中扩增出的 0.1 kb、0.2 kb、0.3 kb、0.5 kb、1 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 12.对 FFPE 样本直接进行 DNA 扩增。按照使用说明书,使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从小鼠肾脏 FFPE 样本中成功扩增出不同长度的片段(0.1 kb、0.2 kb、0.3 kb、0.5 kb、1 kb)。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。请注意,FFPE DNA 通常是片段化的,样本质量决定了很难扩增出大于 0.3 kb 的片段。

人源组织

Platinum直接 PCR 通用预混液可从各种人源组织中成功扩增靶标 DNA 序列,这些组织包括唾液、口腔拭子、血液(保存于柠檬酸盐、肝素或 EDTA 中)、指甲、头发和 HeLa S3 细胞等。

从各种人源组织中扩增出的 0.35 kb 和 7.5 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图2.对各种人源组织直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从各种类型的人源组织中扩增 0.35 kb 和 7.5 kb 片段。采用裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 Invitrogen TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

小鼠样本

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从各种类型小鼠组织(耳、尾巴、肾脏、心脏、胰腺、肝脏、脾脏、脑、头发、骨髓、骨骼和牙齿)中扩增出靶标 DNA 序列。

从各种小鼠组织中扩增出的 0.3 kb 和 3.6 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 3.对各种小鼠组织直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从各种类型的小鼠组织中扩增出 0.3 kb 和 3.6 kb 片段。按照裂解方案进行直接PCR。将软组织切成 1 mm 小块,将硬组织(如骨头)在陶瓷研磨机中破碎成 1-2 mm小块。 所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

植物样本

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从各种植物组织中扩增出靶标 DNA 序列,植物组织包括小麦叶、烟草叶、桦木叶、枫叶、木兰叶、兰花叶、拟南芥叶片、玫瑰叶、菩提树叶、丁香叶、草莓叶、淤泥草莓叶、崖柏叶、松树穗、云杉穗、玫瑰果花瓣、草莓、玉米种子、花生、小麦种子、烟草种子、向日葵种子和小麦根。

从各种植物组织中扩增出的 0.3 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 4.对不同植物物种和组织类型直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从列出的植物叶片、种子、根、果实中直接扩增出 0.3 kb 的片段。按照直接方案,使用 1 mm 叶片或压碎的种子进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

藻类

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从含或不含细胞壁的藻类中成功扩增出靶标DNA 序列。

从含或不含细胞壁的藻类中直接扩增出的 0.11 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 5.对藻类直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum 直接 PCR 通用预混液从含和不含细胞壁的单细胞绿藻Chlamydomonas reinhardtii 中直接扩增出一个0.11 kb 片段。按照裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

鸟类组织

Platinum直接 PCR 通用预混液成功地从各种鸟类组织(鸡软骨、鸡肉和鹌鹑羽毛)中成功扩增出靶标 DNA 序列

从各种鸟类组织中直接扩增出的 0.24 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 6.对鸟类组织直接进行 DNA 扩增。使用Platinum直接 PCR 通用预混液从所列出的鸡(软骨)和鹌鹑(羽毛)中直接扩增出 0.24 kb 片段。按照裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

细菌种类

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌中扩增出靶 DNA 序列。

从大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中扩增出的 0.62 kb 和 0.59 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 7.对细菌直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液直接从革兰氏阴性菌(Escherichia coli )和革兰氏阳性菌(Bacillus subtilis )菌中分别扩增出 0.62 kb 和 0.59 kb 片段。使用裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

Platinum Direct PCR Universal Master Mix可用于细菌DNA检测。

斑马鱼组织

Platinum直接PCR 通用预混液成功从斑马鱼多种组织-鳍、鳞片、肌肉和大脑中成功扩增出靶标 DNA 序列。

从斑马鱼鳍中扩增的 PCR 产物的凝胶电泳图像

图 9.对斑马鱼直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从斑马鱼组织中扩增出 0.35 kb 和 1 kb 片段。使用裂解方案进行直接PCR扩增。可以看到,可从斑马鱼的鳍、鳞片、肌肉和大脑组织中成功扩增出目的片段。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

果蝇组织

Platinum直接 PCR 通用预混液成功从Drosophila各种组织(全身、半身、头部、半幼虫)中直接扩增出靶标 DNA 序列。

从果蝇组织扩增的 PCR 产物的凝胶电泳图像

图 10.直接对Drosophila直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从各种Drosophila 各种组织中扩增 0.66 kb 的片段。使用裂解方案进行直接PCR扩增从果蝇身体、头部和幼虫中均成功进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

血液

Platinum直接 PCR 通用预混液从保存在柠檬酸、肝素或 EDTA 中的人血中成功直接扩增出靶标 DNA 序列。

从保存在柠檬酸盐、肝素和 EDTA 中的人血中直接扩增出的 0.35 kb 和 7.5 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 11.对人血样本直接进行 DNA 扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从保存在柠檬酸、肝素或 EDTA 中的人血中直接扩增出 0.35 kb 和 7.5 kb 的片段。使用裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

FFPE样本

Platinum直接PCR 通用预混液从小鼠肾脏 FFPE 样本中成功扩增出靶标 DNA 序列。

从小鼠肾脏 FFPE 块中扩增出的 0.1 kb、0.2 kb、0.3 kb、0.5 kb、1 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 12.对 FFPE 样本直接进行 DNA 扩增。按照使用说明书,使用 Platinum直接 PCR 通用预混液从小鼠肾脏 FFPE 样本中成功扩增出不同长度的片段(0.1 kb、0.2 kb、0.3 kb、0.5 kb、1 kb)。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。请注意,FFPE DNA 通常是片段化的,样本质量决定了很难扩增出大于 0.3 kb 的片段。

Platinum直接 PCR 通用预混液的其它主要优势

Platinum直接 PCR 预混液的缓冲液含独特配方,有助于减少 PCR 扩增中繁琐的优化步骤。创新的缓冲液使得引物能够在 60°C(通用退火温度)下退火,无论引物序列如何(按照常规引物设计规则)(图 13)。当在退火步骤中使用自己计算出的Tm 时,也可进行成功扩增(数据未显示)。

使用 60°C 通用退火温度从植物、小鼠和人组织中扩增出的 PCR 产物的凝胶电泳图像

图 13.当使用Platinum直接 PCR 通用预混液在 60°C 通用退火温度下扩增各种类型样本时,均可获得高特异性和高产率的 PCR 产物。使用退火温度不同的引物对(如上所示)从植物、小鼠和人的不同组织中扩增5个靶标。同时使用直接方案和裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

了解通用退火温度对于 PCR的优势

了解退火步骤在 PCR 扩增中的重要性,如何利用独特PCR 缓冲液减少反应优化,以及通用退火温度的优势。

借助创新型缓冲液,Platinum直接 PCR 通用预混液可实现使用通用退火温度、灵活的延伸时间,从而使得不同PCR反应可以同时进行扩增。

96孔板上三种不同颜色代表同时扩增的三个不同PCR反应

图 14.通用 PCR 方案可节省时间并实现不同PCR反应同时扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液,对于不同的PCR反应,均可使用一种方案(通用的引物退火温度和基于最长片段计算的延长时间),从而实现不同 PCR同时进行扩增(图 15)。

使用通用 PCR 方案以相同的延伸时间从小鼠、植物和人组织中扩增出的 0.2 kb、0.6 kb、1 kb、1.5 kb、2 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 15.Platinum直接 PCR 通用预混液可实现短片段和长片段的同时扩增。从不同物种和组织类型的样本中同时扩增出 0.2 kb、0.6 kb、1 kb、1.5 kb 和 2 kb 的片段,均使用同一种扩增方案:94℃ 变性 15 秒,60℃ 退火 15 秒,68℃ 延伸 40 秒。延伸时间按最长靶标进行计算。

Platinum直接PCR 预混液提供两种从粗样中扩增靶 DNA 的方案。在直接方案中,将推荐大小的样本直接加入到预混液中。在裂解方案中,首先将推荐大小的样本进行裂解,然后将一部分上清液加入预混液中。直接方案的流程较短,而裂解方案的流程较为灵活,样本可以储存( 图 16 )。直接 PCR 方案可扩增长达 2 kb的片段,而裂解方案可扩增长达 8 kb的片段( 图 20 )。样品可在裂解缓冲液中保存长达12个月 。

直接方案与裂解方案的步骤说明

图 16.直接方案与裂解方案。

样本大小和样本量对于直接PCR 的成功扩增至关重要。样本量太少会由于模板起始量不足而导致 PCR 扩增失败。另一方面,样本量太多会引入太多可抑制 PCR 扩增的细胞组分和碎片。Platinum直接 PCR 通用预混液使用手册中提供了建议的样本量。

直接PCR推荐的样本大小以圆圈大小表示

图 17.直接方案和裂解方案的建议样本大小(未提供实际大小)。通常,使用0.5–1.0 mm 的固体样本用于直接方案。尽管裂解方案可使用多达 10 mm 的样本,但建议裂解方案使用 0.5–2.0 mm 大小的样本。有关不同样本类型的详细建议,请参阅产品手册。

为方便起见,在使用 Platinum直接 PCR 通用预混液时,对于固体样本建议打印样本大小指南 字母尺寸 (8.5“ x 11”)或 A4 尺寸 (210 mm x 297 mm)。

Platinum直接 PCR 通用预混液为绿色预混液,可用于 PCR 产物的直接凝胶上样,省去了向PCR产物中添加染料的繁琐步骤,同时有助于减少移液误差,缩短动手操作时间。

PCR 预混液中的绿色染料在电泳时会分离为黄色和蓝色染料,显示出了直接凝胶上样预混液的优势

图 18.绿色预混液可实现 PCR 产物直接上样至凝胶进行电泳检测。Platinum直接 PCR 通用预混液包含一种密度试剂和两种示踪染料。使用两种染料(蓝色和黄色)可轻松跟踪 DNA 的迁移,这两种染料在电泳过程中易于查看(泳道分别如右图中 5 分钟和 15 分钟所示)。

使用 Platinum直接 PCR 通用预混液进行高效 PCR 扩增

PCR 运行时间

Platinum直接 PCR 通用预混液使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶设计而成,该酶是一种可快速进行 DNA 合成的基因工程酶。因此,与其它直接 PCR 试剂盒相比,Platinum 直接 PCR 预混液可以更快地获得 PCR 结果(图 19)。

条形图显示循环次数和升温时间,用于比较不同 直接 PCR 试剂盒的 PCR 运行时间

图 19.快速扩增,缩短 PCR 运行时间。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液和其它供应商的直接 PCR 试剂盒对 1 kb 的片段进行35 个循环的扩增。每种试剂盒的循环次数以紫色显示,Applied Biosystems ProFlex PCR 系统的升温时间(6°C /秒的升温速率)以红色显示。

扩增片段长度

Platinum直接 PCR 通用预混液的直接方案和裂解方案所扩增片段的大小范围。

使用直接方案和裂解方案扩增出的 0.2 kb、0.35 kb、0.8 kb、2 kb、3.3 kb、4.5 kb 和 7.5 kb PCR 产物的凝胶电泳图像,显示了两种方案的扩增片段大小范围

图 20.Platinum Direct PCR 通用预混液的直接和裂解方案扩增范围。直接方案可扩增长达 2 kb 的片段,而裂解方案可扩增长达 8 kb 的片段。使用肝素保存的人血进行 PCR 扩增。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

高特异性

Platinum直接 PCR 通用预混液使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶含有 Invitrogen Platinum 热启动技术。这项基于抗体的热启动技术在使用粗样进行直接 DNA 扩增时呈现出卓越的特异性。

0.3 kb、0.5 kb、1.1 kb、2.2 kb、2.9 kb、3.6 kb 和 5.5 kb PCR 产物的凝胶电泳图像显示了 PCR 扩增的特异性

图 21.直接 PCR 扩增的高特异性。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液的裂解方案,从鼠耳中扩增 0.3 kb、0.5 kb、1.1 kb、2.2 kb、2.9 kb、3.6 kb 和 5.5 kb 的靶序列。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

高灵敏度

Platinum直接 PCR 通用预混液使用 Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶设计而成,该酶是一种高灵敏度的基因工程酶。因此,可以使用 Platinum直接 PCR 预混液检测低样本起始量的靶序列。

不同细胞数量(10,000 至 1 个细胞)的凝胶电泳图像显示了PCR 扩增的灵敏度

图 22.对低起始量样本的高灵敏PCR扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液的裂解方案,从 5–500个 HeLa S3 细胞中扩增 0.4 kb 和 2.2 kb 靶序列。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

高AT含量和高GC含量模板PCR

Platinum直接 PCR 通用预混液可从 高AT含量和高GC含量模板中进行高效扩增。产品随附提供一管单独的 Platinum GC Enhancer,用于对高 GC 含量的靶标进行扩增,提高扩增特异性和产量。

不同 GC%(29%-77%)PCR 产物的凝胶电泳图像显示了对 At-rich 和 GC-rich 模板的扩增效果

图 23.对 高AT含量和高GC含量靶标的强劲直接扩增。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液的裂解方案,从人口腔拭子中扩增 14 种不同 GC 含量的靶标。Platinum GC Enhancer(包含在试剂盒中)用于 GC 含量超过 65% 靶标的扩增。所用分子量标准为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

多重 PCR

Platinum Direct PCR 通用预混液可在一个反应中扩增多个靶标。

使用小鼠耳朵、尾巴和头发样本在单个试管中扩增出的 1-5 种 PCR 产物的凝胶电泳图像

图 24.在直接 PCR 中进行多达5个靶标的高效多重扩增。使用单重和5重PCR扩增,从小鼠耳朵、尾巴和头发中扩增不同长度(0.1 kb-1.1 kb)的片段。使用 Platinum直接 PCR 通用预混液裂解方案进行直接PCR扩增。所用分子量标准(M)为 Invitrogen TrackIt 100 bp DNA Ladder

室温稳定性

Platinum Direct PCR 通用预混液在室温下的扩展稳定性可实现高通量分析。该酶的 Platinum 热启动技术可确保室温稳定性和试剂盒的高特异性。

在室温下、冰上配制反应体系后,在室温下放置 8 小时后进行 PCR 反应的凝胶电泳图像可看出出色的室温稳定性

图 25.使用Platinum直接 PCR 通用预混液配制的反应体系在室温下保持稳定。使用 Platinum直接 PCR 预混液的裂解方案,从鼠尾扩增一个 2.2 kb 的片段。反应体系在室温(25°C)或在冰上(4°C)进行配制,然后立即进行 PCR 或在室温(25°C)下放置 8 小时后再进行PCR。可以看到即使在室温下放置 8 小时后,Platinum直接 PCR 预混液仍可获得具有高特异性和高产率的结果。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

与其它商业试剂盒的数据对比

使用商业化直接PCR试剂盒对烟叶样本进行直接PCR扩增,比较靶标扩增的产率和特异性。

使用 Platinum直接 PCR 通用预混液和其它同类试剂盒从烟叶中扩增出的 0.15 kb、0.6 kb、0.75 kb、1.6 kb 和 2.2 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 26.对烟叶可直接进行强劲的 DNA 扩增。使用直接方案,Platinum直接 PCR 通用预混液(最左边泳道)可高特异性、高产量地从烟叶中直接扩增一系列不同大小的DNA片段(0.15 kb、0.6 kb、0.75 kb、1.6 kb 和 2.2 kb)。同时使用市售同类直接PCR 试剂盒扩增相同的靶标。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

使用商业直接 PCR 试剂盒扩增烟草种子,比较靶标扩增的产率和特异性。

使用 Platinum直接 PCR 通用预混液和其它同类试剂盒从烟草种子中扩增的 0.15 kb、0.6 kb、1.6 kb 和 2.2 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 27.直接对烟草种子进行强劲的 DNA 扩增。使用裂解方案,Platinum直接 PCR 通用预混液(最左边泳道)可高特异性、高产量地从烟草种子中直接扩增一系列不同大小地DNA片段(0.15 kb、0.6 kb、1.6 kb 和 2.2 kb)。同时使用市售同类其它直接PCR 试剂盒扩增相同的靶标。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

使用商业直接 PCR 试剂盒直接扩增鼠耳样本,比较靶标扩增的产量和特异性。

图 28.直接对鼠耳进行强劲的 DNA 扩增。使用裂解方案,Platinum Direct PCR 通用预混液(最左边泳道)可高特异性、高产量的从鼠耳中直接扩增一系列不同大小的DNA片段(0.3 kb、0.5 kb、1.1 kb、2.2 kb、2.9 kb、3.6 kb 和 5.5 kb)。同时使用其它同类直接 PCR 试剂盒扩增相同的靶标。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

使用商业直接PCR试剂盒对人类唾液样本进行直接PCR扩增,比较靶标扩增的产量和特异性。

使用 Platinum直接 PCR 通用预混液和其它同类试剂盒从人类唾液样本中扩增出的 0.2 kb、0.8 kb、2 kb、4.5 kb 和 7.5 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 29.直接对人类唾液进行强劲的 DNA 扩增。使用裂解方案,Platinum直接 PCR 通用预混液(最左边泳道)可高特异性、高产量的从人类唾液中直接扩增一系列不同大小的DNA片段(0.2 kb、0.8 kb、2 kb、4.5 kb 和 7.5 kb)。同时使用同类直接PCR 试剂盒扩增相同的靶标。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

使用商业直接PCR试剂盒对人类血液样本进行直接PCR扩增,比较靶标扩增的产量和特异性。

使用 Platinum直接 PCR 通用预混液和其它同类试剂盒从人类血液样本中扩增出的 0.2 kb、0.35 kb、0.8 kb、2 kb、3.3 kb、4.5 kb 和 7.5 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 30.直接对人类血液进行强劲的 DNA 扩增。使用直接方案或裂解方案,Platinum直接 PCR 通用预混液(左边泳道)可高特异性、高产量的从人类血液中直接扩增一系列大小不同的DNA片段(0.2 kb、0.35 kb、0.8 kb、2 kb、3.3 kb、4.5 kb 和 7.5 kb)。同时使用同类直接PCR 试剂盒扩增相同的靶标。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

使用商业直接PCR试剂盒对人类细胞系进行直接PCR扩增,比较靶标扩增的产量和特异性。

使用 Platinum直接 PCR 通用预混液和其它同类试剂盒从人类细胞培养物中扩增出的 0.2 kb、0.8 kb、2 kb、4.5 kb 和 7.5 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 31.直接对人类细胞进行强劲的 DNA 扩增。使用直接方案或裂解方案,Platinum直接 PCR 通用预混液(最左边泳道)可高特异性、高产量的从HeLa S3 细胞中直接扩增一系列大小不同的DNA片段(0.2 kb、0.8 kb、2 kb、4.5 kb 和 7.5 kb)。同时使用市售其它直接PCR 试剂盒扩增相同的靶标。所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

使用商业直接PCR试剂盒对小鼠肾脏 FFPE 样本进行直接PCR扩增,比较靶标扩增的产量和特异性。

使用 Platinum直接 PCR 通用预混液和其它同类试剂盒从 FFPE 样本中扩增出的 0.1 kb、0.2 kb、0.3 kb、0.5 kb 和 1 kb PCR 产物的凝胶电泳图像

图 32.直接对 FFPE 样本进行强劲的 DNA 扩增。使用裂解方案,Platinum直接 PCR 通用预混液(左边泳道)可高特异性、高产量的从小鼠肾脏 FFPE 切片中直接扩增一系列不同大小的DNA片段(0.1 kb、0.2 kb、0.3 kb、0.5 kb 和 1 kb)。同时使用2.7市售其他直接PCR试剂盒扩增了相同的靶标。NTC 代表无模板对照,所用分子量标准(M)为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。请注意,FFPE DNA 通常是片段化的,样本质量决定了难以扩增大于 0.3 kb 的片段。

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