Gibco StemScale PSC Suspension Medium

开启PSC培养的新维度

Gibco StemScale™ PSC悬浮培养基是一种可扩展、易于使用的培养基,支持在悬浮培养中大规模生成人多能干细胞(PSC)。该款培养基经过专门配制,可解决当前PSC球状体培养系统在聚集方面的技术挑战。

  • 更高扩增能力—每次传代可实现5-10倍扩增,细胞扩增能力超出其他市售PSC悬浮培养基系统3倍以上
  • 简化的工作流程—提供简单的培养基更换方案,无需在培养或传代过程中使用微载体或细胞滤网
  • 多种形式的可扩展性—支持将PSC培养规模扩大至多种容器形式:多孔板、摇瓶和生物反应器
  • PSC细胞系间的一致性—在保持多能性和细胞活力的同时实现可靠且一致的球状体形成

立即订购  查看数据  下载手册

“StemScale十分稳健,无论我们使用哪种细胞系,都能够获得一致的结果。”

—— C. Miranda,里斯本大学

卓越的扩增能力

Gibco StemScale PSC悬浮培养基通过球状体的自聚集进而支持悬浮多能干细胞的生长,非常适合需要大量高质量PSC的应用。

StemScale培养基每次传代可实现5-10倍扩增,细胞扩增能力超出其他培养基3倍(图1)。

Scaling expansion using StemScale Medium

图1.使用StemScale培养基进行大规模扩增。在30次传代和20周培养中,StemScale培养基每次传代均可实现10倍以上的细胞扩增(左图)。与其他供应商的培养基“M”相比,StemScale培养基可在同一时间段内实现高达3倍的扩增(右图)。

StemScale medium helps to maintain cell viability and pluripotency

图2.StemScale培养基有助于维持细胞活性和多能性。与其他悬浮培养系统相比,StemScale培养基可在传代3次后提供优越的细胞活性,并且在传代30次后仍可维持高多能性。

在更短时间内生成更多细胞

与贴壁培养相比,在StemScale悬浮培养基中培养PSC球状体允许用户在更短的时间内培养更多数量的细胞(表1),同时减少培养基和塑料耗材的消耗量。

从6孔板的单个孔开始,相比贴壁培养,在悬浮培养中生长的细胞在时间和细胞数量方面显示出明显差异。

 悬浮大规模培养贴壁大规模培养
总培养天数培养容器形式平均细胞产量培养基消耗量培养容器形式平均细胞产量*培养基消耗量
3天6孔板(单孔)1.5 x 106 个细胞6 mL6孔板(单孔)1.5 x 106 个细胞6 mL
7天6孔板(全板)18 x 106 个细胞30 mL100 mm 培养皿9 x 106 个细胞48 mL
11天100 mL 生物反应器150 x 106 个细胞200 mL150 mm 培养皿22 x 106 个细胞72 mL
15天500 mL 生物反应器750 x 106 个细胞1,000 mL经处理的Nunc TripleFlask细胞培养瓶78 x 106 个细胞800 mL
19天3 L 生物反应器4.5 x 109 个细胞6,000 mL2层Nunc Cell Factory系统300 x 106 个细胞1,200 mL
23天10层Nunc Cell Factory系统1.5 x 109 个细胞6,000 mL
27天30层Nunc Cell Factory系统4.5 x 109 个细胞18,000 mL
*该值根据每种培养容器形式的4天扩增数据估计得出。3 L生物反应器和30层Thermo Scientific Nunc Cell Factory系统的值根据表中列出的较小生物反应器和Nunc Cell Factory系统形式推断得出。

表1.悬浮培养系统与贴壁培养系统的大规模培养。悬浮培养系统(使用StemScale PSC悬浮培养基)与贴壁培养系统的大规模培养。

Pluripotent stem cells grown in StemScale PSC Suspension medium

图3.在StemScale培养基中生长的多能干细胞。在StemScale PSC悬浮培养基中接种的多能干细胞可在5天内维持最佳球状体大小和活性。


“StemScale培养基能够改善干细胞球状体形成的效率。”

—— S. Rieck,ViaCyte

简化的工作流程

Simplified workflow for pluripotent stem cell culture maintenance using StemScale Medium

图4.简化的工作流程(示意图)。使用StemScale培养基可轻松使贴壁培养适应到悬浮培养。StemScale培养基允许用户采用隔日换液的时间方案(如需要)。在StemScale培养基中开始培养后,通过更换50%的培养基以定期每天或隔天一次饲养Gibco游离型iPSC。

Chart showing similar fold PSC expansion in StemScale medium with every day and every other day feeding.
Chart shows high percent pluripotency marker expression with flexible feeding in StemScale medium

图5.隔日饲养的培养物在倍数变化(A)和多能性(B)方面与每日饲养的培养物相似。

操作视频:PSC悬浮培养的3个步骤

观看教学视频,了解如何使用StemScale PSC悬浮培养基培养人多能干细胞。

第1步:在StemScale培养基中开始PSC球状体培养
Step 2: Maintenance and feeding of PSC spheroids with 50% media change
Step 3: Passaging PSC spheroids in suspension culture
第1步:在StemScale培养基中开始PSC球状体培养
Step 2: Maintenance and feeding of PSC spheroids with 50% media change
Step 3: Passaging PSC spheroids in suspension culture

跨细胞系和不同培养容器形式的扩增能力

对于在StemScale培养基中培养的4种不同的PSC系,每次传代均可实现6-11倍扩增,且在15天内可扩增18-28倍。

Scale-up in suspension culture systems using StemScale PSC Suspension Medium vs. scale-up in adherent culture systems

图6.悬浮培养系统与贴壁培养系统。悬浮培养系统(使用StemScale PSC悬浮培养基)与贴壁培养系统的大规模培养。

PSC球状体的神经和心脏分化

从StemScale PSC悬浮培养基培养的PSC球状体直接开始神经诱导

Neural induction of spheroids

图7.球状体的神经诱导。使用PSC神经诱导培养基(货号A1647801),直接从StemScale培养基培养的PSC球状体中诱导大量成熟的神经干细胞。

将StemScale培养的球状体引入DA神经元分化工作流程

Dopaminergic neurons are directly initated from PSC spheroids cultured in StemScale medium

图8.直接从StemScale培养基培养的PSC球状体中诱导多巴胺能神经元。与35天的贴壁培养方案相比,在悬浮培养25天时使用PSC多巴胺能神经元(DA)分化试剂盒(货号A3147701)从StemScale培养基中分化的DA神经元共表达的FOXA2/Otx2数量相同(数据未显示)。

PSC球状体的心脏类器官分化

Cardiomycytes differentiated in suspension from PSC spheroids grown in StemScale medium

图9.在StemScale培养基中生长的悬浮PSC球状体分化为心肌细胞。(A)诱导形成心脏前,在StemScale培养基中生长的未分化的hPSC球体形态。(B)心脏诱导开始12天的球状体。(C)用心脏标记物α横纹肌肌动蛋白(绿色)和心肌肌钙蛋白T(红色)染色心脏类器官。细胞核用DAPI(蓝色)复染。

订购信息

StemScale培养基资源

查找使用StemScale PSC悬浮培养基进行PSC悬浮培养的相关技术和教育资源。

其他推荐的试剂、耗材和设备

仅供科研使用,不可用于诊断目的。