Lipofectamine 3000 Reagent

警告:トランスフェクション効率が低いほど、より多くの費用がかかる場合があります

反応あたりわずか数円で、困難な細胞で 70 % を超えるトランスフェクション効率を実現できます。

  • 優れた効率—トランスフェクションが困難な細胞の幅広いスペクトルにおいて、10倍の高効率を実現します
  • 低毒性で穏やか—細胞生存率を向上させます
  • 最高の価値—反応ごとにわずかなコストでクラス最高のトランスフェクション結果が得られます
このページの内容:

トランスフェクションが困難なさまざまな種類の細胞に対して優れた効率を発揮

Lipofectamine 3000試薬は、最先端の脂質ナノ粒子技術を活用して、優れたトランスフェクション効率と再現性の高い結果をもたらします。トランスフェクションが困難な細胞や一般的な細胞など幅広い細胞タイプで、非常に優れたトランスフェクション効率を実現し、細胞生存率を向上させます(図1)

Lipofectamine 3000試薬の性能

図1.Lipofectamine 3000試薬は、Invitrogen Lipofectamine 2000および他社製品よりも優れています。各試薬を使用してHEK 293、HeLa、LNCaP、HepG2、およびA549細胞株を96ウェルフォーマットでトランスフェクションし、トランスフェクションから48時間後にGFP発現を解析した。Lipofectamine 3000試薬は、5種類すべての細胞株において、Lipofectamine 2000および他社製品よりも高いGFPトランスフェクション効率を示した。


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低毒性で穏やか

Lipofectamine 3000試薬を開発する際、トランスフェクションプロセスの4つのステップすべてを最適化し、最先端の脂質ナノ粒子技術を組み合わせました。優れたトランスフェクション性能により、試薬量を減らし、細胞株を扱う際の潜在的な毒性リスクを低減できます。

Lipofectamine 3000試薬効率


図3.各試薬を用いて、96ウェルフォーマットでHeLa細胞に指示された用量で、エメラルドグリーン蛍光タンパク質(GFP)発現ベクターをトランスフェクションしました。
フローサイトメトリーを用いてトランスフェクションから48時間後に解析を行い、トランスフェクション効率とGFP発現の強度を測定した。Lipofectamine 3000試薬は、Lipofectamine 2000試薬およびInvitrogen Lipofectamine LTX試薬よりも高い効率とタンパク質発現を実現した。


がん研究を強化

もっとも生物学的に関連性の高い細胞株を使用することで、研究課題に対するもっとも適切な回答を得ることができます。Lipofectamine 3000試薬の優れた細胞スペクトルと高いトランスフェクション効率により、研究で選択した細胞株を使用する優れた柔軟性が得られます。

表1.Lipofectamine 3000試薬は、Lipofectamine 2000試薬よりも高いトランスフェクション効率を実現します。

細胞種Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬細胞種の由来
NIH/3T34マウス胚性線維芽細胞株
4T12マウス乳房腫瘍細胞株
A4312ヒト表皮がん細胞株
A5493ヒト肺がん細胞株
ACHN2ヒト腎がん細胞株
bEend.39マウス脳内皮腫細胞株
BJ3ヒト皮膚線維芽細胞株
BT-1512 5494ヒト乳がん細胞株
C2C123マウス筋芽細胞株
C65ラット神経膠腫細胞株
Caco-22ヒト結腸癌細胞株
Caki-14ヒト腎臓明細胞がん細胞株
CHO-K11チャイニーズハムスター卵巣細胞株
CHO-S1チャイニーズハムスター卵巣細胞株
Colo 2054ヒト結腸がん細胞株
COS-74サル線維芽細胞様細胞株

トランスフェクション効率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

細胞種Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬細胞種の由来
Du 1452ヒト前立腺がん細胞株
H4603ヒト肺がん細胞株
H9c23ラット心筋細胞株
HCC19375ヒト乳がん細胞株
HCT 1161ヒト結腸がん細胞株
HEK- 2932ヒト胎児腎細胞株
HeLa3ヒト子宮頸部がん細胞株
HEP 3B.2ヒト肝がん細胞株
HEPA 1-61マウス肝がん細胞株
HEP G29ヒト肝がん細胞株
HS 578T3ヒト乳がん細胞株
HT-10801ヒト線維肉腫細胞株
HT- 291ヒト大腸がん細胞株
Huh-74ヒト肝がん細胞株
Jurkat1ヒト T リンパ球細胞株

トランスフェクション効率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

細胞種(続き)
Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬細胞種の由来
K-5621ヒト骨髄性白血病細胞株
L6.8ラット骨格筋細胞株
L9292マウス線維肉腫細胞株
LNCaP6ヒト前立腺がん細胞株
MCF 10A5ヒト乳腺上皮細胞株
MCF72ヒト乳がん細胞株
MDA-MB-2313ヒト乳がん細胞株
MDA-MB-215 4531ヒト乳がん細胞株
MDA-MB-215 4689ヒト乳がん細胞株
MDCK1イヌ腎細胞株
Neuro-2a.1マウス神経芽腫細胞株
NCI-H232ヒト肺腺がん細胞株
NCI-H46017ヒト肺がん細胞株
P191マウス胚様がん細胞株
PANC-13ヒト膵臓腺腫細胞株
PC-122ラット褐色細胞腫細胞株

トランスフェクション効率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

細胞種(カウント)
Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬細胞種類の由来
RAW 264.74マウスマクロファージ細胞株
RBL2ラット好塩基球白血病細胞
RD4ヒト横紋筋肉腫細胞株
Saos-24ヒト骨肉腫細胞株
SH-SY5Y1ヒト神経芽腫細胞株
SK-BR-34ヒト乳がん細胞株
SK-MEL-282ヒトメラノーマ細胞株
SK-N-SH6ヒト神経芽腫細胞株
SK-OV-33ヒト卵巣がん細胞株
SW4802ヒト結腸がん細胞株
SW6205ヒト結腸がん細胞株
T98G4ヒト神経膠芽腫細胞株
U2OS3ヒト骨肉腫細胞株
U- 9372ヒト組織球性白血病細胞株
Vero1サル腎臓細胞株

トランスフェクション効率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

細胞種Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬細胞種の由来
NIH/3T34マウス胚性線維芽細胞株
4T12マウス乳房腫瘍細胞株
A4312ヒト表皮がん細胞株
A5493ヒト肺がん細胞株
ACHN2ヒト腎がん細胞株
bEend.39マウス脳内皮腫細胞株
BJ3ヒト皮膚線維芽細胞株
BT-1512 5494ヒト乳がん細胞株
C2C123マウス筋芽細胞株
C65ラット神経膠腫細胞株
Caco-22ヒト結腸癌細胞株
Caki-14ヒト腎臓明細胞がん細胞株
CHO-K11チャイニーズハムスター卵巣細胞株
CHO-S1チャイニーズハムスター卵巣細胞株
Colo 2054ヒト結腸がん細胞株
COS-74サル線維芽細胞様細胞株

トランスフェクション効率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

細胞種Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬細胞種の由来
Du 1452ヒト前立腺がん細胞株
H4603ヒト肺がん細胞株
H9c23ラット心筋細胞株
HCC19375ヒト乳がん細胞株
HCT 1161ヒト結腸がん細胞株
HEK- 2932ヒト胎児腎細胞株
HeLa3ヒト子宮頸部がん細胞株
HEP 3B.2ヒト肝がん細胞株
HEPA 1-61マウス肝がん細胞株
HEP G29ヒト肝がん細胞株
HS 578T3ヒト乳がん細胞株
HT-10801ヒト線維肉腫細胞株
HT- 291ヒト大腸がん細胞株
Huh-74ヒト肝がん細胞株
Jurkat1ヒト T リンパ球細胞株

トランスフェクション効率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

細胞種(続き)
Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬細胞種の由来
K-5621ヒト骨髄性白血病細胞株
L6.8ラット骨格筋細胞株
L9292マウス線維肉腫細胞株
LNCaP6ヒト前立腺がん細胞株
MCF 10A5ヒト乳腺上皮細胞株
MCF72ヒト乳がん細胞株
MDA-MB-2313ヒト乳がん細胞株
MDA-MB-215 4531ヒト乳がん細胞株
MDA-MB-215 4689ヒト乳がん細胞株
MDCK1イヌ腎細胞株
Neuro-2a.1マウス神経芽腫細胞株
NCI-H232ヒト肺腺がん細胞株
NCI-H46017ヒト肺がん細胞株
P191マウス胚様がん細胞株
PANC-13ヒト膵臓腺腫細胞株
PC-122ラット褐色細胞腫細胞株

トランスフェクション効率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

細胞種(カウント)
Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬細胞種類の由来
RAW 264.74マウスマクロファージ細胞株
RBL2ラット好塩基球白血病細胞
RD4ヒト横紋筋肉腫細胞株
Saos-24ヒト骨肉腫細胞株
SH-SY5Y1ヒト神経芽腫細胞株
SK-BR-34ヒト乳がん細胞株
SK-MEL-282ヒトメラノーマ細胞株
SK-N-SH6ヒト神経芽腫細胞株
SK-OV-33ヒト卵巣がん細胞株
SW4802ヒト結腸がん細胞株
SW6205ヒト結腸がん細胞株
T98G4ヒト神経膠芽腫細胞株
U2OS3ヒト骨肉腫細胞株
U- 9372ヒト組織球性白血病細胞株
Vero1サル腎臓細胞株

トランスフェクション効率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

Lipofectamine 3000試薬は、さまざまな組織から得られたがん細胞のパネルにおいて、Lipofectamine 2000試薬などの主要なトランスフェクション試薬と比較して、トランスフェクション性能が大幅に向上しています。Lipofectamine 2000試薬を使用すると、選択したがん細胞株パネルのわずか25%のみがトランスフェクションしやすい(>50%のトランスフェクション効率)と考えられますが、Lipofectamine 3000試薬ではパネルの60%が簡単にトランスフェクションできます。

がん細胞のトランスフェクション効率

 


図4.Lipofectamine 2000試薬およびLipofectamine 3000試薬を用い、17種の細胞株にプラスミド0.5 µg/ウェルおよび各試薬の推奨プロトコルを使用して、24ウェルプレートでGFP発現プラスミドをトランスフェクトした。
トランスフェクション から48時間後にGFP発現を解析した。各条件を3回試験し、データポイントは平均トランスフェクション効率と標準偏差を示す。


人工多能性幹細胞(iPSC)の作製

Lipofectamine 3000試薬の優れたトランスフェクション効率とInvitrogen Epi5 Episomal iPSC Reprogramming Kitとの組み合わせにより、エレクトロポレーションを必要とせずに体細胞を高効率にリプログラミングできます。

Lipofectamine 3000のリプログラミング効率

図5.エレクトロポレーションと比較したLipofectamine 3000試薬のリプログラミング効率。BJ線維芽細胞、新生児(HDFn)および成人(HDFa)のヒト皮膚線維芽細胞に、Lipofectamine 3000試薬またはInvitrogen Neon Transfection Systemを使用してEpi5ベクターをトランスフェクションし、iPSCにリプログラミングした。コロニーを(A)明視野顕微鏡で可視化し、(B)アルカリホスファターゼで染色した。


ゲノム編集の結果を改善

Lipofectamine 3000試薬は、より生物学的に関連性の高いシステムにおいて、導入の限界を打破し、ゲノム工学などの新技術を促進するために開発されました。この試薬を用いて、Invitrogen GeneArt TALsおよびCRISPR配列がHepG2およびU2OS細胞のAAVS1遺伝子座を標的とし、トランスフェクション効率、平均蛍光強度、およびゲノム切断の向上を示しました。導入におけるこれらの進歩は、ダウンストリーム工程での面倒なワークフローを最小限に抑え、幹細胞の操作を容易にし、細胞ゲノムへの導入遺伝子の部位特異的な挿入を強化するのに役立ちます。

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lipo-3000_figure-5

図6.GeneArt TALおよびCRISPRの切断効率。TALおよびCRISPRは、(A)U2OSおよび(B)HepG2細胞株のAAVS1遺伝子座を標的とした。切断はInvitrogen GeneArt Genomic Cleavage Detection Kitを使用してアッセイした。

lipo-3000_figure-6

図7.CRISPRベクターを用いたトランスフェクション効率とタンパク質発現。ベクターにはOFPレポーター遺伝子が含まれており、Lipofectamine 2000またはLipofectamine 3000試薬を用いて(A)U2OSおよび(B)HepG2細胞株にトランスフェクションした。棒グラフはレポーター遺伝子発現を示し、画像はOFPを発現する対応する細胞の蛍光を示す。


幹細胞のトランスフェクション

幹細胞のトランスフェクション

図8.幹細胞のトランスフェクション。Lipofectamine 3000試薬を使用して( A)H9 ESCまたは(B)iPSCをトランスフェクションした。細胞を蛍光顕微鏡で可視化し、フローサイトメトリーで処理してトランスフェクション効率を測定した。

leaf icon Sustainable packaging

Packaging must protect the product inside—but that doesn’t have to mean sacrificing sustainability. Lipofectamine products are shipped at ambient temperature, diverting 24,000 ft3 of Expanded Polystyrene (EPS) coolers from landfills annually. We reduce the carbon footprint from packaging and shipping these products by 80 tons (CO2 equivalents).

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