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反応あたりわずか数円で、困難な細胞で 70 % を超えるトランスフェクション効率を実現できます。
Lipofectamine 3000試薬は、最先端の脂質ナノ粒子技術を活用して、優れたトランスフェクション効率と再現性の高い結果をもたらします。トランスフェクションが困難な細胞や一般的な細胞など幅広い細胞タイプで、非常に優れたトランスフェクション効率を実現し、細胞生存率を向上させます(図1)。
図1.Lipofectamine 3000試薬は、Invitrogen Lipofectamine 2000および他社製品よりも優れています。各試薬を使用してHEK 293、HeLa、LNCaP、HepG2、およびA549細胞株を96ウェルフォーマットでトランスフェクションし、トランスフェクションから48時間後にGFP発現を解析した。Lipofectamine 3000試薬は、5種類すべての細胞株において、Lipofectamine 2000および他社製品よりも高いGFPトランスフェクション効率を示した。
図2.Lipofectamine 3000のトランスフェクションプロトコルは、幅広い細胞株で最適な性能と信頼性を確保しつつ、使いやすくなるように開発されました。
Lipofectamine 3000試薬を開発する際、トランスフェクションプロセスの4つのステップすべてを最適化し、最先端の脂質ナノ粒子技術を組み合わせました。優れたトランスフェクション性能により、試薬量を減らし、細胞株を扱う際の潜在的な毒性リスクを低減できます。
もっとも生物学的に関連性の高い細胞株を使用することで、研究課題に対するもっとも適切な回答を得ることができます。Lipofectamine 3000試薬の優れた細胞スペクトルと高いトランスフェクション効率により、研究で選択した細胞株を使用する優れた柔軟性が得られます。
細胞種 | Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率 | タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬 | 細胞種の由来 |
---|---|---|---|
NIH/3T3 | 4 | マウス胚性線維芽細胞株 | |
4T1 | 2 | マウス乳房腫瘍細胞株 | |
A431 | 2 | ヒト表皮がん細胞株 | |
A549 | 3 | ヒト肺がん細胞株 | |
ACHN | 2 | ヒト腎がん細胞株 | |
bEend.3 | 9 | マウス脳内皮腫細胞株 | |
BJ | 3 | ヒト皮膚線維芽細胞株 | |
BT-1512 549 | 4 | ヒト乳がん細胞株 | |
C2C12 | 3 | マウス筋芽細胞株 | |
C6 | 5 | ラット神経膠腫細胞株 | |
Caco-2 | 2 | ヒト結腸癌細胞株 | |
Caki-1 | 4 | ヒト腎臓明細胞がん細胞株 | |
CHO-K1 | 1 | チャイニーズハムスター卵巣細胞株 | |
CHO-S | 1 | チャイニーズハムスター卵巣細胞株 | |
Colo 205 | 4 | ヒト結腸がん細胞株 | |
COS-7 | 4 | サル線維芽細胞様細胞株 |
トランスフェクション効率(%):<30% 30~50% 51~79% >80%
細胞種 | Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率 | タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬 | 細胞種の由来 |
---|---|---|---|
Du 145 | 2 | ヒト前立腺がん細胞株 | |
H460 | 3 | ヒト肺がん細胞株 | |
H9c2 | 3 | ラット心筋細胞株 | |
HCC1937 | 5 | ヒト乳がん細胞株 | |
HCT 116 | 1 | ヒト結腸がん細胞株 | |
HEK- 293 | 2 | ヒト胎児腎細胞株 | |
HeLa | 3 | ヒト子宮頸部がん細胞株 | |
HEP 3B. | 2 | ヒト肝がん細胞株 | |
HEPA 1-6 | 1 | マウス肝がん細胞株 | |
HEP G2 | 9 | ヒト肝がん細胞株 | |
HS 578T | 3 | ヒト乳がん細胞株 | |
HT-1080 | 1 | ヒト線維肉腫細胞株 | |
HT- 29 | 1 | ヒト大腸がん細胞株 | |
Huh-7 | 4 | ヒト肝がん細胞株 | |
Jurkat | 1 | ヒト T リンパ球細胞株 |
トランスフェクション効率(%):<30% 30~50% 51~79% >80%
細胞種(続き) | Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率 | タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬 | 細胞種の由来 |
---|---|---|---|
K-562 | 1 | ヒト骨髄性白血病細胞株 | |
L6. | 8 | ラット骨格筋細胞株 | |
L929 | 2 | マウス線維肉腫細胞株 | |
LNCaP | 6 | ヒト前立腺がん細胞株 | |
MCF 10A | 5 | ヒト乳腺上皮細胞株 | |
MCF7 | 2 | ヒト乳がん細胞株 | |
MDA-MB-231 | 3 | ヒト乳がん細胞株 | |
MDA-MB-215 453 | 1 | ヒト乳がん細胞株 | |
MDA-MB-215 468 | 9 | ヒト乳がん細胞株 | |
MDCK | 1 | イヌ腎細胞株 | |
Neuro-2a. | 1 | マウス神経芽腫細胞株 | |
NCI-H23 | 2 | ヒト肺腺がん細胞株 | |
NCI-H460 | 17 | ヒト肺がん細胞株 | |
P19 | 1 | マウス胚様がん細胞株 | |
PANC-1 | 3 | ヒト膵臓腺腫細胞株 | |
PC-12 | 2 | ラット褐色細胞腫細胞株 |
トランスフェクション効率(%):<30% 30~50% 51~79% >80%
細胞種(カウント) | Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率 | タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬 | 細胞種類の由来 |
---|---|---|---|
RAW 264.7 | 4 | マウスマクロファージ細胞株 | |
RBL | 2 | ラット好塩基球白血病細胞 | |
RD | 4 | ヒト横紋筋肉腫細胞株 | |
Saos-2 | 4 | ヒト骨肉腫細胞株 | |
SH-SY5Y | 1 | ヒト神経芽腫細胞株 | |
SK-BR-3 | 4 | ヒト乳がん細胞株 | |
SK-MEL-28 | 2 | ヒトメラノーマ細胞株 | |
SK-N-SH | 6 | ヒト神経芽腫細胞株 | |
SK-OV-3 | 3 | ヒト卵巣がん細胞株 | |
SW480 | 2 | ヒト結腸がん細胞株 | |
SW620 | 5 | ヒト結腸がん細胞株 | |
T98G | 4 | ヒト神経膠芽腫細胞株 | |
U2OS | 3 | ヒト骨肉腫細胞株 | |
U- 937 | 2 | ヒト組織球性白血病細胞株 | |
Vero | 1 | サル腎臓細胞株 |
トランスフェクション効率(%):<30% 30~50% 51~79% >80%
細胞種 | Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率 | タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬 | 細胞種の由来 |
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NIH/3T3 | 4 | マウス胚性線維芽細胞株 | |
4T1 | 2 | マウス乳房腫瘍細胞株 | |
A431 | 2 | ヒト表皮がん細胞株 | |
A549 | 3 | ヒト肺がん細胞株 | |
ACHN | 2 | ヒト腎がん細胞株 | |
bEend.3 | 9 | マウス脳内皮腫細胞株 | |
BJ | 3 | ヒト皮膚線維芽細胞株 | |
BT-1512 549 | 4 | ヒト乳がん細胞株 | |
C2C12 | 3 | マウス筋芽細胞株 | |
C6 | 5 | ラット神経膠腫細胞株 | |
Caco-2 | 2 | ヒト結腸癌細胞株 | |
Caki-1 | 4 | ヒト腎臓明細胞がん細胞株 | |
CHO-K1 | 1 | チャイニーズハムスター卵巣細胞株 | |
CHO-S | 1 | チャイニーズハムスター卵巣細胞株 | |
Colo 205 | 4 | ヒト結腸がん細胞株 | |
COS-7 | 4 | サル線維芽細胞様細胞株 |
トランスフェクション効率(%):<30% 30~50% 51~79% >80%
細胞種 | Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率 | タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬 | 細胞種の由来 |
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Du 145 | 2 | ヒト前立腺がん細胞株 | |
H460 | 3 | ヒト肺がん細胞株 | |
H9c2 | 3 | ラット心筋細胞株 | |
HCC1937 | 5 | ヒト乳がん細胞株 | |
HCT 116 | 1 | ヒト結腸がん細胞株 | |
HEK- 293 | 2 | ヒト胎児腎細胞株 | |
HeLa | 3 | ヒト子宮頸部がん細胞株 | |
HEP 3B. | 2 | ヒト肝がん細胞株 | |
HEPA 1-6 | 1 | マウス肝がん細胞株 | |
HEP G2 | 9 | ヒト肝がん細胞株 | |
HS 578T | 3 | ヒト乳がん細胞株 | |
HT-1080 | 1 | ヒト線維肉腫細胞株 | |
HT- 29 | 1 | ヒト大腸がん細胞株 | |
Huh-7 | 4 | ヒト肝がん細胞株 | |
Jurkat | 1 | ヒト T リンパ球細胞株 |
トランスフェクション効率(%):<30% 30~50% 51~79% >80%
細胞種(続き) | Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率 | タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬 | 細胞種の由来 |
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K-562 | 1 | ヒト骨髄性白血病細胞株 | |
L6. | 8 | ラット骨格筋細胞株 | |
L929 | 2 | マウス線維肉腫細胞株 | |
LNCaP | 6 | ヒト前立腺がん細胞株 | |
MCF 10A | 5 | ヒト乳腺上皮細胞株 | |
MCF7 | 2 | ヒト乳がん細胞株 | |
MDA-MB-231 | 3 | ヒト乳がん細胞株 | |
MDA-MB-215 453 | 1 | ヒト乳がん細胞株 | |
MDA-MB-215 468 | 9 | ヒト乳がん細胞株 | |
MDCK | 1 | イヌ腎細胞株 | |
Neuro-2a. | 1 | マウス神経芽腫細胞株 | |
NCI-H23 | 2 | ヒト肺腺がん細胞株 | |
NCI-H460 | 17 | ヒト肺がん細胞株 | |
P19 | 1 | マウス胚様がん細胞株 | |
PANC-1 | 3 | ヒト膵臓腺腫細胞株 | |
PC-12 | 2 | ラット褐色細胞腫細胞株 |
トランスフェクション効率(%):<30% 30~50% 51~79% >80%
細胞種(カウント) | Lipofectamine 3000試薬のトランスフェクション効率 | タンパク質発現量の向上、Lipofectamine 3000 vs 2000試薬 | 細胞種類の由来 |
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RAW 264.7 | 4 | マウスマクロファージ細胞株 | |
RBL | 2 | ラット好塩基球白血病細胞 | |
RD | 4 | ヒト横紋筋肉腫細胞株 | |
Saos-2 | 4 | ヒト骨肉腫細胞株 | |
SH-SY5Y | 1 | ヒト神経芽腫細胞株 | |
SK-BR-3 | 4 | ヒト乳がん細胞株 | |
SK-MEL-28 | 2 | ヒトメラノーマ細胞株 | |
SK-N-SH | 6 | ヒト神経芽腫細胞株 | |
SK-OV-3 | 3 | ヒト卵巣がん細胞株 | |
SW480 | 2 | ヒト結腸がん細胞株 | |
SW620 | 5 | ヒト結腸がん細胞株 | |
T98G | 4 | ヒト神経膠芽腫細胞株 | |
U2OS | 3 | ヒト骨肉腫細胞株 | |
U- 937 | 2 | ヒト組織球性白血病細胞株 | |
Vero | 1 | サル腎臓細胞株 |
トランスフェクション効率(%):<30% 30~50% 51~79% >80%
Lipofectamine 3000試薬は、さまざまな組織から得られたがん細胞のパネルにおいて、Lipofectamine 2000試薬などの主要なトランスフェクション試薬と比較して、トランスフェクション性能が大幅に向上しています。Lipofectamine 2000試薬を使用すると、選択したがん細胞株パネルのわずか25%のみがトランスフェクションしやすい(>50%のトランスフェクション効率)と考えられますが、Lipofectamine 3000試薬ではパネルの60%が簡単にトランスフェクションできます。
図4.Lipofectamine 2000試薬およびLipofectamine 3000試薬を用い、17種の細胞株にプラスミド0.5 µg/ウェルおよび各試薬の推奨プロトコルを使用して、24ウェルプレートでGFP発現プラスミドをトランスフェクトした。トランスフェクション から48時間後にGFP発現を解析した。各条件を3回試験し、データポイントは平均トランスフェクション効率と標準偏差を示す。
Lipofectamine 3000試薬の優れたトランスフェクション効率とInvitrogen Epi5 Episomal iPSC Reprogramming Kitとの組み合わせにより、エレクトロポレーションを必要とせずに体細胞を高効率にリプログラミングできます。
図5.エレクトロポレーションと比較したLipofectamine 3000試薬のリプログラミング効率。BJ線維芽細胞、新生児(HDFn)および成人(HDFa)のヒト皮膚線維芽細胞に、Lipofectamine 3000試薬またはInvitrogen Neon Transfection Systemを使用してEpi5ベクターをトランスフェクションし、iPSCにリプログラミングした。コロニーを(A)明視野顕微鏡で可視化し、(B)アルカリホスファターゼで染色した。
Lipofectamine 3000試薬は、より生物学的に関連性の高いシステムにおいて、導入の限界を打破し、ゲノム工学などの新技術を促進するために開発されました。この試薬を用いて、Invitrogen GeneArt TALsおよびCRISPR配列がHepG2およびU2OS細胞のAAVS1遺伝子座を標的とし、トランスフェクション効率、平均蛍光強度、およびゲノム切断の向上を示しました。導入におけるこれらの進歩は、ダウンストリーム工程での面倒なワークフローを最小限に抑え、幹細胞の操作を容易にし、細胞ゲノムへの導入遺伝子の部位特異的な挿入を強化するのに役立ちます。
図6.GeneArt TALおよびCRISPRの切断効率。TALおよびCRISPRは、(A)U2OSおよび(B)HepG2細胞株のAAVS1遺伝子座を標的とした。切断はInvitrogen GeneArt Genomic Cleavage Detection Kitを使用してアッセイした。
図7.CRISPRベクターを用いたトランスフェクション効率とタンパク質発現。ベクターにはOFPレポーター遺伝子が含まれており、Lipofectamine 2000またはLipofectamine 3000試薬を用いて(A)U2OSおよび(B)HepG2細胞株にトランスフェクションした。棒グラフはレポーター遺伝子発現を示し、画像はOFPを発現する対応する細胞の蛍光を示す。
図8.幹細胞のトランスフェクション。Lipofectamine 3000試薬を使用して( A)H9 ESCまたは(B)iPSCをトランスフェクションした。細胞を蛍光顕微鏡で可視化し、フローサイトメトリーで処理してトランスフェクション効率を測定した。
Packaging must protect the product inside—but that doesn’t have to mean sacrificing sustainability. Lipofectamine products are shipped at ambient temperature, diverting 24,000 ft3 of Expanded Polystyrene (EPS) coolers from landfills annually. We reduce the carbon footprint from packaging and shipping these products by 80 tons (CO2 equivalents).
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